两步法制备牛磺熊去氧胆酸的方法

摘要

本发明公开了一种两步法制备牛磺熊去氧胆酸的方法。包括：第一步：牛磺鹅去氧胆酸（TCDCA）通过化学氧化反应制备得到牛磺7‑酮石胆酸(T‑7K)；第二步：将第一步制备得到的牛磺7‑酮石胆酸(T‑7K)通过共表达7β‑羟基类固醇脱氢酶（7β‑HSDH）和葡萄糖脱氢酶（GDH）的大肠杆菌全细胞催化还原生产得到牛磺熊去氧胆酸（TUDCA）。本发明主要利用来源广泛的TCDCA，先通过化学氧化生产牛磺7‑酮石胆酸(T‑7K)，然后利用7β‑类固醇脱氢酶（7β‑HSDH）将牛磺7‑酮石胆酸转化为牛磺熊去氧胆酸，同时共表达的葡萄糖脱氢酶在葡萄糖存在的情况下将NADP+循环再生。上述方法中两种酶蛋白共表达，且催化过程全细胞催化，保证高活性的同时使酶蛋白具体更好的稳定性，能够实现牛磺熊去氧胆酸高收率、高纯度的制备。