通过以限定的组织形式靶向整合多个表达盒来产生多价多特异性抗体表达细胞的方法

摘要

本文尤其报道了一种产生三价双特异性抗体的方法，所述方法包括以下步骤：培养包含编码所述三价双特异性抗体的脱氧核糖核酸的哺乳动物细胞，并从细胞或培养基中回收所述三价双特异性抗体，其中编码所述三价双特异性抗体的所述脱氧核糖核酸稳定地整合到所述哺乳动物细胞的基因组中并且在5'至3'方向上包含编码第一重链的第一表达盒、编码第一重链的第二表达盒、编码第一轻链的第三表达盒、编码第一轻链的第四表达盒、编码第二重链的第五表达盒、编码第一轻链或第二重链或第二轻链的第六表达盒和编码第二轻链的第七表达盒，其中所述第一重链从N末端至C末端包含第一重链可变结构域、CH1结构域、铰链区、CH2结构域、CH3结构域、肽接头、第二重链可变结构域和CL结构域，所述第二重链从N末端至C末端包含第一重链可变结构域、CH1结构域、铰链区、CH2结构域和CH3结构域，所述第一轻链从N末端至C末端包含第一轻链可变结构域和CH1结构域，且所述第二轻链从N末端至C末端包含第二轻链可变结构域和CL结构域，其中所述第二重链可变结构域和所述第一轻链可变结构域形成第一结合位点，且所述第一重链可变结构域和所述第二轻链可变结构域形成第二结合位点。