一种三叶斑潜蝇热休克转录因子蛋白原核表达的方法

摘要

本发明公开了一种三叶斑潜蝇热休克转录因子蛋白原核表达的方法，包括蛋白表达载体构建和原核表达载体的诱导表达两个部分，具体为：设计带有特定酶切位点(BamHI和XhoI)的特异性引物并进行目的片段的扩增。将PCR产物回收、克隆并在测序正确之后进行提取质粒。原核表达载体的构建酶切。表达菌的制备。诱导表达最佳条件摸索。目的蛋白表达形式及Western blot鉴定。本实验不仅摸索出了提高三叶斑潜蝇热休克转录因子蛋白原核表达水平的最佳IPTG浓度，提高了实验效率和效果，而且对我们系统全面研究整个Hsp家族基因转录调控机制，及其在斑潜蝇温度耐受性和入侵传播中的功能具有重要的意义。