检测体外细胞增殖用载体及体外细胞增殖动态检测方法

摘要

本发明涉及检测体外细胞增殖用载体及体外细胞增殖动态检测方法。动态检测体外细胞增殖用载体，其特征在于，载体包括：依次连接的PLKO.1序列、CMV序列、eGFP序列、IRES序列和Puro序列。本发明构建的稳转细胞株，与同类细胞株相比，荧光亮度强、光稳定性好、背景信号低，且对细胞的生理无显著性影响。所述检测方法包括：用本发明的载体、psPAX2载体和PMD2.G载体三载体包装慢病毒；用步骤一得到的慢病毒转染目标细胞，嘌呤霉素筛选、流式细胞术分选，得到稳转细胞株；选择合适的细胞数量加入细胞培养板中，待细胞贴壁后，高内涵细胞成像系统采集图像；处理数据，并绘制细胞增殖曲线。本发明自动化程度高，误差小，重复性好，灵敏度高。