一株利用木质纤维素水解液厌氧发酵产L‑天冬氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用

摘要

本发明公开了一株能够利用木质纤维素水解液为原料，同步利用葡萄糖、木糖的混合糖厌氧发酵产L‑天冬氨酸基因工程菌，该菌株具体的构建方法为：以重组菌AS12为出发菌，采用代谢工程改造策略敲除糖转运系统的ptsG基因，得到重组大肠杆菌AS31；将能够催化草酰乙酸合成L‑天冬氨酸的天冬氨酸转氨酶基因aspC和磷酸烯醇式丙酮酸激酶编码基因pck克隆到表达质粒上，将该重组质粒转化大肠杆菌AS31，即得到利用木糖、葡萄糖混合糖同步厌氧发酵产L‑天冬氨酸的基因工程菌AS32。本发明还公布了AS32厌氧发酵产L‑天冬氨酸的培养基和培养条件，实现了利用如秸秆、玉米芯、稻草等废弃生物质资源为原料发酵制备L‑天冬氨酸的目标，具有显著的经济性。