虫草素在制备抗抑郁症的药物中的用途及其制备而得的快速抗抑郁症药物

摘要

本发明“虫草素在制备抗抑郁症的药物中的用途及其制备而得的快速抗抑郁症药物”，属于医药领域。其特征在于，将虫草素或虫草素的衍生物作为药效活性成分制备成的抗抑郁症的药剂，所述衍生物指虫草素与药学上可接收的盐、酯或糖所成的甙。该药物用于治疗或预防抑郁症，具有抗抑郁效果显著、见效快、副作用小等优点，因此是优良的抗抑郁症候选药物。

说明书

本申请是以专利号为201210302951.5的中国发明专利为母案的分案申请

技术领域

本发明涉及医药领域，特别是一种以虫草素为主要成分的快速抗抑郁症药物。

背景技术

抑郁症已成为现代社会的常见病和多发病，其发病率还在不断升高。病症以情感低落、兴趣减退、思维迟缓、以及言语与动作减少为特征，重症抑郁有厌世或自杀的念头。这类疾病对患者及其家属造成的痛苦，以及对社会造成的损失，是许多其他疾病所无法比拟的。根据世界卫生组织(WHO)发表的报告，情感障碍目前已成为世界第四大疾患，全球的抑郁症患者已达3.4亿人。目前抑郁症在中国发病率大约为4％。中国至少有2600万人患有抑郁症，抑郁症在中国造成的总经济负担达到622亿元人民币。美国估计有1700万人患有抑郁症,300万人患躁郁症，每年治疗情感障碍的费用高达440亿美元(冠心病为430亿美元)。在过去对情感障碍研究的40年中，特别引人注目的是其发病率和死亡率高，据报道自杀率高达10％以上，中国每年有25万人自杀，目前主要使用的药物是五羟色胺再摄取抑制剂等,使用这类药物起效慢,作用谱窄，副作用大,停药后易复发。目前，抗抑郁药物领域急需起效快，副作用小，更为有效的治疗方法。

目前抗抑郁药物及其弱点：当前的抗抑郁药大致可分为三类：即单胺氧化酶抑制剂、三环类抗抑郁剂及杂环类抗抑郁剂。现有的抗抑郁药物远远不能满足病人的需求，其不足之处大都是起效慢、抗抑郁谱窄、副作用大、易复发等。现有药物均不够理想，开发起效快、抗抑郁谱广泛、毒副作用较小的新药，确实是迫在眉睫。开发起效快、抗抑郁谱广泛、毒副作用较小的新药在这个领域是非常迫切的需要，将带来巨大的经济回报。

虫草素在抗炎、抗菌、抗病毒、抗肿瘤方面的效果已被越来越多的临床和基础实验证实，然而，在对于抑郁症的治疗效果尚未见报道。虫草素又称虫草菌素、蛹虫草菌素，是蛹虫草中(尤其是核苷类)主要活性成分，是第一个从真菌中分离出来的核苷类抗生素。虫草素是腺苷的类似物，分子式:C10H13N5O3，分子量:251.24，碱性，针状或片状结晶，熔点230℃～231℃，分子结构如图1。

经研究发现，虫草素可以拮抗NO产物的生成，由此，虫草素很可能成为一种治疗由炎症引起的相关紊乱的药物。同时，虫草素具有广谱抗菌的作用，它能抑制链球菌、鼻疽杆菌、炭疽杆菌、猪出血性败血症杆菌及葡萄球菌等病原菌的生长。此外，虫草素对石膏样小芽孢癣菌、羊毛状小芽孢癣菌、须疮癣菌等皮肤致病性真菌以及枯草杆菌也有抑制作用。此外，虫草素也具有较强的抗病毒活性。另外有研究发现，虫草素有抗疱疹病毒和抑制脑炎病毒的功能，对人体免疫缺陷型病毒HIV-I型的侵染亦有抑制作用。近年来，研究人员发现虫草素具有免疫调节作用。对T淋巴细胞转化有促进作用，它还可以提高机体单核巨噬细胞系统的吞噬功能,激活巨噬细胞产生细胞毒素直接杀伤癌细胞。虫草素作为核苷类新药,由于它能干扰基因细胞RNA和DNA的合成，抑制癌细胞的分裂并能作为区别细胞中不同的RNA聚合酶的工具，并具有修复基因细胞、保护生命体遗传密码的特殊功效。2000年美国NCI研究人员和美国波士顿大学医学院教授共同研究证实虫草素对治疗白血病有很好疗效。

在以上众多的动物实验或临床实验的报道中，并未见有学者提及化合物虫草素用于治疗抑郁症的报道。

发明内容

本发明提供虫草素作为抗抑郁症药物的用途及制备而得的抗抑郁症药物。该药物具有抗抑郁效果显著、见效快、副作用小等优点，技术方案如下：

虫草素在制备抗抑郁症的药物的用途，其特征在于，将虫草素和/或虫草素的衍生物作为药效活性成分制备成抗抑郁症的药剂，所述衍生物指虫草素盐、酯或虫草素与糖所成的甙。

所述抗抑郁症的药物指预防或治疗抑郁症的药物。

所述药剂为片剂、胶囊、溶液、悬浮液、注射液或滴注液。

一种抗抑郁症的药物，其特征在于：其药效活性成分为虫草素和/或虫草素的衍生物，所述衍生物指虫草素盐、酯或虫草素与糖所成的甙。

所述抗抑郁症指预防或治疗抑郁症。

药物的剂型为片剂、胶囊、溶液、悬浮液、注射液或滴注液。

所述药物还包括制药学上可接受的辅助成分。

所述药物还包括有与虫草素或其衍生物配合使用时对治疗抑郁症有积极作用的药物成分。

所述药物还包括有使虫草素稳定性提高的成分。

上述药物治疗抑郁症的用途。

上述药物治疗抑郁症的方法，其特征在于：给药剂量为每天0.5mg～1000mg/kg体重，给药方式为口服、滴注或注射；给药对象为哺乳动物，所述哺乳动物包括人。

所述给药剂量为每天0.5mg-1000mg/1kg。

本发明发明人发现虫草素对哺乳动物具有显著的抗抑郁效果。经实验研究发现，在哺乳动物小鼠实验中，虫草素在短时间内(90分钟)就迅速具有了明显的抗抑郁症效果,其快速性优于传统抗抑郁药物丙咪嗪，且抗抑郁效果可以持续产生。抑郁症患者普遍主诉有炎性疼痛症状，如头痛，胃痛，背痛等等。虫草素在抗抑郁的同时，还能改善病人的炎性症状，同时杀灭导致炎性症状的病毒、细菌和真菌。许多肿瘤疾病患者经化疗、放疗治疗后，并发抑郁症，虫草素可同时起到抗肿瘤和抗抑郁的作用。因此小分子化合物虫草素能够综合性地改善抑郁症病人的各种症状，包括精神抑郁症状、疼痛、炎症等等。它的抗抑郁效果在动物模型中显著、快速、并且持久。目前使用的抗抑郁药物见效很慢，一般需要几个星期。业界急需发展快速见效的抗抑郁药物。虫草素作为一种传统中药冬虫夏草的主要成分，长期被人类服用，它的毒副作用至今未见报道，在试验过程未见常规抗抑郁药物的镇定、诱发癫痫、共济失调等缺点。虫草素可以从培养的虫草菌中提取。虫草素有成为快速的、高效的、无毒副作用的抗抑郁新药具有巨大的商业的潜力，具有很强的工业实用性。

本发明采用的药物筛选试验为：小鼠强迫游泳和悬尾试验，是较为常用的两种动物行为绝望抑郁症模型试验，能较好保证筛选结果的可靠性：

小鼠强迫游泳试验已用于很多抗抑郁药物的筛选试验。而且大多数有临床治疗作用的抗抑郁药也被证实在强迫游泳试验中能有效地减少不动时间。所谓不动是指“动物在水中停止挣扎，或呈漂浮状态，仅露出鼻孔保持呼吸，仅有细小的肢体运动，以保持头部浮在水面”。在测试前给拟筛选的药物。由于动物在强迫状态下游泳使动物不能逃出恶劣环境，导致动物行为绝望。此种模型方法简便，可靠，已广泛用于抗抑郁药剂的筛选和评价。

小鼠悬尾试验是小鼠在悬尾状态下不再挣扎，呈现特有的安静不动状态，抗抑郁药可明显缩短不动状态的持续时间。测试时，将小鼠尾部用夹子固定、倒悬。勿使小鼠尾部扭曲折叠。计录不动时间。不动指标为：“动物除呼吸外所有肢体均不动”。悬尾试验对各种抗抑郁药均很敏感，而且避免了游泳试验中温度和动物运动功能障碍的干扰,因而在用一些鼠种筛选抗抑郁药物时,可以有效地验证和补充强迫游泳实验的结果。

本发明提供的虫草素作为抗抑郁症药物的用途，不限于如图1所示结构式的虫草素在制备抗抑郁症中的用途，将虫草素制备成虫草素的盐、酯或其与糖所成的甙是本领域技术人员所具备的常规实验技能，因此这种还包括虫草素的盐、酯或其与糖所成的甙在制备抗抑郁症药物中的用途。制备的药物的药物活性成分可以是虫草素、虫草素的盐、酯或所述甙的甙；或者药物活性成分可以是虫草素、虫草素的盐、酯和/或所述甙。

本发明提供的虫草素制备抗抑郁症药物的用途，所制备而得的抗抑郁症药物，可以基于制药领域的技术人员的常识而加入不影响药物药效的辅助成分，如载体、赋型剂等。由于该药物通过口服、注射、皮下包埋等方式均可见效，因此，剂型可以是多样的。

本发明提供的抗抑郁症药物还可以是混合有其它与虫草素或其衍生物配合使用对治疗抑郁症有积极作用的药物成分。

由于虫草素稳定性较差，本领域技术人员可以加入稳定剂，只要不影响虫草素药效的发挥，所得的抗抑郁症药物均在本发明要求保护的范围内。

本发明所提供的抗抑郁症的药物，所述抗抑郁症包括预防和治疗两个阶段。

在专利法允许的范围内，本发明还要求保护虫草素在抗抑郁症治疗中的用途，在动物模型试验中达到抗抑郁治疗效果的剂量范围是每天0.5mg-1000mg/1kg。

附图说明

图1虫草素的化学结构式,

图2虫草素对小鼠悬尾实验的影响,

竖坐标：悬尾不动时间(S),

横坐标：从左到有依次为：虫草素对照，虫草素低，虫草素高，丙咪嗪对照组，丙咪嗪。

结果：CD1雄性小鼠经不同剂量的虫草素的腹腔注射九十分钟后，高剂量组(12.5毫克/公斤)在小鼠悬尾实验中显示出抗抑郁的效果。抗抑郁效果比传统抗抑郁药物丙咪嗪起效快速。

图3虫草素对小鼠悬尾实验的影响,

竖坐标：强迫游泳实验小鼠不动时间(S),

横坐标：从左到有依次为：虫草素对照，虫草素低，虫草素高，丙咪嗪对照组，丙咪嗪；

结果：CD1雄性小鼠经不同剂量的虫草素的腹腔注射三天后，在小鼠强迫游泳实验中显示出抗抑郁的效果。这个抗抑郁效果和传统抗抑郁药物丙咪嗪相比有更强的趋势。(每组动物N＝4～8,*t检验p<0.05,**p<0.01)。

具体实施方案

实施例1：虫草素对动物抑郁模型悬尾实验的影响。

动物CD1种小鼠，雄性，重量25-35克，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，许可证号:SCXK(京)2011-0011。动物分笼饲养，食水自由，饲料由中国科学院遗传研究所实验动物中心提供，实验鼠食用的普通饲料均可。

试验药品：

虫草素购自上海源叶生物科技有限公司，货号YY91028,批号20120615。

阳性对照盐酸丙米嗪(Imipramine hydrochloride)为Sigma公司产品，货号I7379，批号O56K1380。

实验器材：

横杆，胶布，Sumsung Intelli-200m数码摄像机(韩国三星公司)，JUNSO多功能计时器。

虫草素母液：虫草素溶于少量纯乙醇得10ug/ul，再用生理盐水稀释。

实验步骤：

雄性CD1小鼠经适应性饲养一周，分成5组，每组八只，分别为：

虫草素对照组(生理盐水加1.6％乙醇，按0.3ml/30g体重注射)；

虫草素低(5mg/kg体重，虫草素溶于生理盐水加1.6％乙醇)剂量组；

虫草素高(12.5mg/kg体重，虫草素溶于生理盐水加1.6％乙醇)剂量组；

丙咪嗪阳性对照组(15mg/kg体重丙咪嗪，生理盐水溶解)；

丙咪嗪对照组(生理盐水，按0.3ml/30g体重注射)。

上午10时按设计剂量腹腔注射给药，注射九十分钟后开始悬尾实验统计。

小鼠悬尾实验时，用胶布将小鼠尾在距尾尖2厘米处粘在一根水平横杆上，使动物成倒挂状态，其头部离桌面约15厘米。观察6分钟，记录后4分钟内的累计不动时间。不动指标为：“动物除呼吸外所有肢体均不动。”

统计方法：

实验结果用均值±SE表示,两个样本平均数比较用t检验。

结果见图1。虫草素的高剂量组与空白对照组相比,在九十分钟就能明显缩短小鼠悬尾不动时间。其中低剂量组尚未起效，显示出了一个剂量反应。结果表明高剂量的虫草素在很短的时间内即可起效。可以对抗小鼠因强迫悬尾造成的抑郁症状，虫草素的抗抑郁功效发生比传统抗抑郁药早，一个半小时就很明显了。

与空白对照组相比，虫草素剂量为12.5毫克/公斤处理小鼠的不动时间由86.43±20.37s降低为33.86±7.46(P<0.05)，缩短了60.8％。低剂量的虫草素显示出不动时间降低的趋势，但尚未明显减低。由于溶剂是乙醇，所以虫草素对照的不动时间略有降低。和传统抗抑郁药物丙咪嗪相比，高剂量的虫草素展示出快速的抗抑郁作用。90分钟时，传统抗抑郁药丙咪嗪(15毫克/公斤)处理的小鼠的不动时间与空白对照基本没有区别，即尚未生效，丙咪嗪起效较慢。

实施例2小鼠强迫游泳实验

动物为CD1种小鼠雄性，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，许可证号:SCXK(京)2011-0011。实验前一周将动物分笼饲养,明暗周期12h/12h,室温20～22℃,自由饮食。饲料由中国科学院遗传研究所实验动物中心提供。

实验药物：

虫草素(cordycepin)购自上海源叶生物科技有限公司，货号YY91028,批号20120615。阳性对照盐酸丙米嗪(Imipramine hydrochloride)为Sigma公司产品，货号I7379，批号O56K1380。

试验仪器：

玻璃圆筒(高20cm,直径14cm)；小鼠开阔箱(直径30cm,高20cm,底部16等分)；温度计；JUNSO多功能计时器。

药物准备同悬尾实验。

实验步骤：

动物药物注射：

CD1小鼠,年龄7周，重量25-35克，适应环境一周后开始实验。动物随机分组，共有5组，每组八只动物。处理同实施例1,每天上午10点开始腹腔注射，每天腹腔注射一次，注射三天后开始强迫游泳实验。

强迫游泳实验：

将各组CD1鼠单个垂直地放入有机玻璃圆筒中(40cm×14cm直径),水深15cm,水温23℃。各给药组和对照组录像6分钟,比较各组小鼠在后4分钟内的累计不动时间。不动时间判定:小鼠漂浮在水面，不努力爬出圆筒，仅做一些必须保持其头部在水面的动作。

统计分析方法：

分析人按照统一标准分析结果。实验结果用均值±SE表示,两个样本平均数比较用t检验。

结果表明虫草素具有较强的抗抑郁作用。与空白对照组比较，虫草素高剂量组和低剂量组小鼠强迫游泳4分钟内的不动时间显著缩短,并呈一定的剂量依赖性,虫草素剂量为12.5毫克/千克体重时的不动时间与空白对照组相比,由111.96±14.58s分别降低为69.88±10.25(P<0.05)和34.94±12.16(P<0.05),分别缩短了37.6％和68.8％。

结果见图3。和传统抗抑郁药丙咪嗪相比，高剂量的虫草素的抗抑郁作用有更强的趋势。

由于经典抑郁动物模型中的动物不动时间的缩短可能是由于药物的中枢兴奋性作用引起，所以我们进行了小鼠开野实验来检验虫草素的中枢兴奋性，实验结果显示,小鼠在中心4格停留时间在虫草素低剂量处理后(399.75±72.25秒)和高剂量处理后(379.88±95.28秒)与对照组(424.15±82.78秒)相比，均无明显变化(Anova,p>0.05,N＝12)。并且没有任何升高的趋势，故可排除其引发躁狂状态的可能性。

实施例3.虫草素盐，酯及与糖合成的甙的合成及抗抑郁试验。

实施例4.有效剂量范围筛选试验。