法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2022-04-26
未缴年费专利权终止 IPC(主分类):A01H 4/00 专利号:ZL2016103178359 申请日:20160513 授权公告日:20180316
专利权的终止
2018-03-16
授权
授权
2016-09-14
实质审查的生效 IPC(主分类):A01H4/00 申请日:20160513
实质审查的生效
2016-08-17
公开
公开
技术领域
本发明涉及一种植物组织的快速繁殖方法,具体为一种多肉植物虹之玉的组织快速繁殖方法及其培养的虹之玉,属于植物组织培养技术领域。
背景技术
虹之玉(Sedum rubrotinctum)是景天科景天属的多肉植物,多年生肉质草本植物,生长速度比较快,春夏是主要生长季节,夏季35度高温需遮阴,其株高10-20厘米,多分枝,肉质叶膨大互生,圆筒形至卵形,长2厘米,绿色,表皮光亮、无白粉,在阳光充足的条件下转为红褐色,小花淡黄红色,形态可爱,深受大家喜爱,观赏价值高。虹之玉的培养通常采取扦插法,即从茎上取下完整叶片,放置3天后再扦插,使用叶插进行繁殖的方法,虽然繁殖系数大,但成型较慢,生长期长,目前还没有关于虹之玉快速繁殖的相关技术。
发明内容
针对现有技术的不足,本发明提供一种多肉植物红之玉的组织快速繁殖方法及其培养的虹之玉,该方法具有易操作、培养周期短、成活率高的特点。
本发明的技术方案如下:一种多肉植物虹之玉的组织快速繁殖方法,该方法包括如下步骤:(1)外植体的选择与消毒:以虹之玉叶片或茎段为外植体,将表面清洗干净的外植体用70vt%-75vt%的酒精浸泡20-30秒,再用0.1wt%的氯化汞水溶液浸泡3-10分钟,每次浸泡完后均用无菌水洗涤,得到无菌外植体;
(2)丛生芽的诱导:将无菌外植体接种于诱导丛生芽培养基中,以虹之玉的茎段做外植体时,先将茎段切割成1cm左右的小段后再接种 到培养基中,在23-26℃、光照强度800-1500lux、光照时间为24小时/天、相对湿度55%-65%的环境下培养3-7天后外植体会先生根,继续培养3-5天后得到丛生芽,诱导丛生芽培养基是以MS培养基为基本培养基,向每升基本培养基中加入0.6-1.5mg 6-苄基腺嘌呤、0.6-1.5mg吲哚乙酸、25-30g蔗糖、8.0-8.4g琼脂,3-7g活性炭,NaOH调节pH值为5.80-6.0,优选为:1.0mg 6-苄基腺嘌呤、1.0mg吲哚乙酸、30g蔗糖、8.0g琼脂,5g活性炭,NaOH调节pH值为5.82;
(3)继代:将步骤(2)培养得到的丛生芽的幼芽切下转移至继代培养基中,培养2-3周即可得到完整植株;继代培养基是以MS培养基为基本培养基,向每升基本培养基中加入1.0mg 6-苄基腺嘌呤、1.0mg吲哚乙酸、30g蔗糖、8.0g琼脂,5g活性炭,pH值为5.82。
(4)移栽:将经继代培养得到的完整植株其根上残留的培养基冲洗干净,置于阴凉处风干后移栽至沙性土壤中,遮荫,在温度为18-26℃、相对湿度为55%-65%下生长即可。
本发明同时请求保护按照上述方法培养得到的多肉植物虹之玉。
本发明的有益效果如下:本发明通过对虹之玉叶片或茎段进行组织培养获得了虹之玉幼苗,该方法材料易得,消毒方便,成活率高,生产周期短,提高了虹之玉的繁殖系数和繁殖速度,并能较好的保持虹之玉的品系优势,能快速繁殖出大量适合移栽的优良虹之玉幼苗,满足了生产需求;本发明中的诱导丛生芽培养基添加了适宜浓度的活性炭吸附有害物质不仅对外植体的褐变有一定的抑制作用,进而提高提高了虹之玉的繁殖系数、繁殖速度和植株成活率,提高了种植者的经济效益。
附图说明
图1为实施例1得到的叶片生根的照片;
图2为实施例2得到的丛生芽的照片;
图3为实施例1移栽到土里的完整植株;
图4为对比例叶片的照片;
图5为对比例叶片发生褐变的照片。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明进一步详细说明,但本发明的保护范围不仅限于这些实施例,如无特殊说明,本发明所用原料均市售可得。
实施例1
本实施例中:诱导丛生芽培养基是以MS培养基为基本培养基,每升基本培养基中加入1.0mg 6-苄基腺嘌呤、1.0mg吲哚乙酸、30g蔗糖、8.0g琼脂,5g活性炭配制而成,再用NaOH调节pH值为5.82;
继代培养基是以MS培养基为基本培养基,向每升基本培养基中加入1.0mg6-苄基腺嘌呤、1.0mg吲哚乙酸、30g蔗糖、8.0g琼脂,5g活性炭,再用NaOH调节pH值为5.82。
(1)外植体的选择与消毒
选取健康虹之玉植株,用水洗净植株表面泥土再用流水冲洗15分钟。在超净工作台上先用体积分数为75%的酒精浸泡虹之玉植株30秒,然后用无菌水洗涤3次,每次2分钟;取虹之玉的叶片作为外植体,将外植体转入质量分数为0.1%的氯化汞水溶液中浸泡3分钟,然后用无菌水洗涤6次,每次2分钟,得到无菌外植体;
(2)丛生芽的诱导
将无菌外植体接种于组培瓶内的诱导丛生芽培养基中,每瓶接种4片,在25℃、光照强度1200lux、光照时间为24小时/天、相对湿度55%的环境下培养6天后外植体生根,继续培养3天后发芽得到丛生芽;经过上述9天诱导培养,虹之玉叶片已经诱导形成丛生芽;
(3)继代:将丛生芽接入继代培养基中继续培养3周得到生根的完整植株;
(4)移栽:将带完整植株根上残留的培养基冲洗干净,置于阴凉处 风干1天,移栽至沙性土壤中,遮荫,在温度为22℃、相对湿度为55%下生长。
实施例2
本实施例中:诱导丛生芽培养基是以MS培养基为基本培养基,每升基本培养基中加入0.6mg 6-苄基腺嘌呤、0.6mg吲哚乙酸、25g蔗糖、8.0g琼脂,3g活性炭配制而成,再用NaOH调节pH值为5.80;
继代培养基是以MS培养基为基本培养基,向每升基本培养基中加入1.0mg6-苄基腺嘌呤、1.0mg吲哚乙酸、30g蔗糖、8.0g琼脂,5g活性炭,再用NaOH调节pH值为5.82。
(1)外植体的选择与消毒
选取健康虹之玉植株,用水洗净植株表面泥土再用流水冲洗15分钟。在超净工作台上先用体积分数为70%的酒精浸泡虹之玉植株30秒,然后用无菌水洗涤3次,每次2分钟;取虹之玉的茎段作为外植体,将外植体转入质量分数为0.1%的氯化汞水溶液中浸泡3分钟,然后用无菌水洗涤6次,每次2分钟,得到无菌外植体;
(2)丛生芽的诱导
先将茎段切割成1cm左右的小段后再接种到培养基中,每瓶接种3段,在26℃、光照强度1500lux、光照时间为24小时/天、相对湿度55%的环境下培养6天后外植体生根,继续培养5天后发芽得到丛生芽;经过上述11天诱导培养,虹之玉叶片已经诱导形成丛生芽,见图2;
(3)继代:将丛生芽接入继代培养基中继续培养2周得到生根的完整植株;
(4)移栽:将带完整植株根上残留的培养基冲洗干净,置于阴凉处风干1天,移栽至沙性土壤中,遮荫,在温度为22℃、相对湿度为55%下生长。
实施例3
本实施例中:诱导丛生芽培养基是以MS培养基为基本培养基,每升基本培养基中加入1.5mg 6-苄基腺嘌呤、1.5mg吲哚乙酸、30g蔗糖、8.4g琼脂,7g活性炭配制而成,再用NaOH调节pH值为6.0;
继代培养基是以MS培养基为基本培养基,向每升基本培养基中加入1.0mg6-苄基腺嘌呤、1.0mg吲哚乙酸、30g蔗糖、8.0g琼脂,5g活性炭,再用NaOH调节pH值为5.82。
(1)外植体的选择与消毒
选取健康虹之玉植株,用水洗净植株表面泥土再用流水冲洗15分钟。在超净工作台上先用体积分数为70%的酒精浸泡虹之玉植株30秒,然后用无菌水洗涤3次,每次2分钟;取虹之玉的叶片作为外植体,将外植体转入质量分数为0.1%的氯化汞水溶液中浸泡10分钟,然后用无菌水洗涤6次,每次2分钟,得到无菌外植体;
(2)丛生芽的诱导
将无菌外植体接种于组培瓶内的诱导丛生芽培养基中,每瓶接种4片,在24℃、光照强度1000lux、光照时间为24小时/天、相对湿度65%的环境下培养6天后外植体生根,继续培养5天后发芽得到丛生芽;经过上述11天诱导培养,虹之玉叶片已经诱导形成丛生芽;
(3)继代:将丛生芽接入继代培养基中继续培养2周得到生根的完整植株;
(4)移栽:将带完整植株根上残留的培养基冲洗干净,置于阴凉处风干1天,移栽至沙性土壤中,遮荫,在温度为22℃、相对湿度为65%下生长。
对比例
对比例中:诱导丛生芽培养基是以MS培养基为基本培养基,每升基本培养基中加入1.5mg 6-苄基腺嘌呤、1.5mg吲哚乙酸、30g蔗糖、8.4g琼脂配制而成,再用NaOH调节pH值为6.0;
继代培养基是以MS培养基为基本培养基,向每升基本培养基中加入1.0mg6-苄基腺嘌呤、1.0mg吲哚乙酸、30g蔗糖、8.0g琼脂,再用NaOH调节pH值为5.82。
对比例以虹之玉的叶片为外植体,培养方法、条件与实施例1完 全相同。在丛生芽的诱导过程中,培养至6天时没有生根,也没有发芽,培养至10天部分叶片发生褐变,见图4-5。而使用本发明添加了活性炭的培养基,经丛生芽的诱导和继代培养长出完整植株,见图1、3。综上所述,本发明中的诱导丛生芽培养基和继代培养基添加了适宜浓度的活性炭吸附有害物质,对外植体的褐变有一定的抑制作用,进而提高提高了虹之玉的繁殖系数、繁殖速度和植株成活率,提高了种植者的经济效益。
上面对本发明具体实施方式及应用效果作了详细说明,但是本发明并不限于上述实施方式,在本领域技术人员所具备的知识范围内,还可以在不脱离本发明构思的前提下作出各种变化。
机译: 分离的核酸分子,载体,宿主细胞;组织培养;花粉或植物部分;用稳定的核酸分子转化的转基因植物细胞;转基因植物的种子。植物花粉的一部分或被核酸分子稳定转化的部分;用核酸分子转化的转基因植物;转基因植物的种子转化了COm一个核酸分子;转基因植物种子或花粉粒;任何一代转基因植物的植物后代;粮食;蛋白;植物加工产品;一种具有核酸分子的转基因植物细胞的PR.Odu u00e7 u00e30的方法;转基因植物的细胞生产转基因宿主的方法具有更高的生产率;栽培方法D和转基因植物;和核酸的用途;
机译: 一种提高植物转化效率的方法,包括在含有3,6-二氯邻茴香酸的共培养介质中培养植物组织的共培养步骤
机译: 一种提高植物转化效率的方法,包括在含有3,6-二氯邻茴香酸的共培养介质中培养植物组织的共培养步骤