丁苯酞或其衍生在制备治疗或预防脑震荡的药物中的应用

摘要

本发明一方面提供了一种丁苯酞的新用途，涉及丁苯酞或其衍生物在制备治疗或预防意外事故引发的脑震荡的药物中的用途。

说明书

技术领域

本发明涉及药物用途领域，具体涉及一种丁苯酞或其衍生在制备治疗或预防意外事故引发的脑震荡的药物中的应用。

背景技术

脑震荡是指头部遭受外力打击后，即刻发生短暂的脑功能障碍。病理改变无明显变化，发生机理至今仍有许多争论。临床表现为短暂性昏迷、近事遗忘以及头痛、恶心和呕吐等症状，神经系统检查无阳性体征发现。

大多数脑震荡表现出为一过性神经功能改变，但是如果不及时有效的治疗，反复、长期脑震荡，其脑组织的病理变化尤为显著，可引起严重的后遗症，存在一些因脑震荡死亡的病例和拳击手反复受到脑部撞击后发生慢性脑萎缩甚至一些严重的神经系统疾病；职业拳师发生慢性脑萎缩损害甚至痴呆，以及业余拳击者亦有脑功能轻度障碍。

脑震荡致伤机制目前尚不明确，现有的各种学说都不能全面解释所有与脑震荡有关的问题。对脑震荡所表现的伤后短暂性意识障碍有多种不同的解释，可能与暴力所致的脑血液循环障碍、脑室系统内脑脊液冲击、脑中间神经元受损及脑细胞生理代谢紊乱所致的异常放电等因素有关。

脑震荡大多数是由于意外事故引发的，事故发生前，病人的脑组织各项正常，突然的外力使得脑组织出现的病理变化；引发脑震荡的意外事故可能为：交通事故容易引发脑震荡；打架斗殴中容易引发脑震荡；拳击手在搏斗过程中容易引发脑震荡；战场上战斗过程中容易引发脑震荡等等。

丁苯酞(3-n-butylpHathlide，NBP)其化学名称为3-正丁苯酞，商品名恩必普(NBP)，又名芹菜甲素，是从芹菜籽中分离出来的一种有效成分，其分子式：C₁₂H₁₄O₂，分子量：190.24，结构式如下：

。

丁苯酞是继青蒿素、双环醇之后世界承认的第三个中国原创的新化学是实体药物，具有多种治疗作用，关于丁苯酞的治疗作用，现有技术公开如下：

中国专利CN93117148.2公开了芹菜甲素在制备预防和治疗哺乳动物或人类脑缺血引起的疾病的药中的应用。

中国专利CN98125618.X公开了丁苯酞在制备抗血栓形成及抗血小板凝集药物中的应用。

中国专利CN03137457.3公开了左旋正丁苯酞的预防和治疗痴呆的用途。

中国专利CN200410001748.X公开了左旋丁苯酞在制备预防和治疗脑缺血疾病药物中的应用。

中国专利CN200710139470.6公开了丁苯酞在制备治疗线粒体病药物中的应用。

中国专利CN201010033365.6公开了丁苯酞及其衍生物在制备治疗帕金森病的药物中的应用。

中国专利CN201010289987.5公开了丁苯酞及其衍生物在制备预防和治疗ALS的药物中的应用。

中国专利CN201010521843.8公开了丁苯酞或其衍生物在制备促进血管生成的药物中的应用。

中国专利CN201010541274.3公开了左旋丁苯酞在制备预防和治疗脑梗塞的药物中的应用。

现有技术对丁苯酞的研究多集中在心脑血管病领域，已证明丁苯酞在心血管、血液与平滑肌等方面有明显的药理活性，丁苯酞可阻断缺血性脑卒中所致脑损伤的多个病理环节，具有较强的抗脑缺血和脑保护作用。但是丁苯酞在治疗脑震荡方面的研究在国内外尚未见报道。

发明内容

发明人长期从事丁苯酞制剂及治疗作用的研究，在研究中发现了丁苯酞或其衍生物在脑震荡的治疗或预防中效果显著。

因此，本发明的主要目的在于提供丁苯酞或其衍生物对脑震荡的治疗作用。

本发明的主要目的还在于提供含有丁苯酞或其衍生物的组合物对脑震荡的治疗作用。

本发明的技术方案为丁苯酞或其衍生物在制备治疗或预防脑震荡药物中的应用；含有丁苯酞或其衍生物的组合物在制备治疗或预防脑震荡药物中的应用。

所述的丁苯酞为消旋丁苯酞、左旋丁苯酞。

所述丁苯酞衍生物为丁苯酞的代谢产物，即3-（3’-羟基）-丁苯酞和3-羟基-3-丁苯酞；丁苯酞的开环产物即2-（α-羟基戊基）苯甲酸。

3-（3’-羟基）-丁苯酞

3-羟基-3-丁苯酞

2-（α-羟基戊基）苯甲酸

进一步地，所述丁苯酞衍生物为在体内代谢为丁苯酞、3-（3’-羟基）-丁苯酞、3-羟基-3-丁苯酞、2-（α-羟基戊基）苯甲酸的化合物。

进一步的，所述的丁苯酞衍生物为消旋体、左旋体、右旋体。

进一步地，所述的丁苯酞衍生物为NO供体型丁苯酞衍生物（结构式如式I所示）

I

其中A为C₂~C₈烷基、C₂~C₈烯烃基、C₂~C₈炔烃基、苯基或取代苯基、芳杂环或取代芳杂环；所述取代苯基被1个或多个选自于羟基、C₁~C₆烷基、C₁~C₆烷氧基、-CH=CHCOO（CH₂）_n，n=2~6取代的苯基，各取代基可以相同或不同；所述芳杂环为1至4个杂原子的5至7元芳香环，所述杂原子独立的选自O、S或N；所述取代芳杂环可任选被1个或多个选自于C₁~C₆烷基、C₁~C₆烷氧基或卤素取代，各取代基可以相同或不同；

R为二甲胺、二乙胺、吡咯、哌啶、吗啉、哌嗪、N-甲基哌嗪、N-乙基哌嗪、N-异丙基哌嗪、N-苯基哌嗪、N-苄基哌嗪或N-叔丁氧羰基哌嗪。

作为优选，R为吗啉基；A为，n=3，所述衍生物为[2-（1-吗啉基乙酰氧）正戊基]苯甲酸-﹛2-甲氧基-4-[2-（4-硝氧丁氧羰基）乙烯基]﹜苯酯。

作为优选，R为哌啶基；A为，n=3，所述衍生物为[2-（1-哌啶基乙酰氧）正戊基]苯甲酸-﹛2-甲氧基-4-[2-（4-硝氧丁氧羰基）乙烯基]﹜苯酯。

作为优选，R为二乙胺基；A为，n=3，所述衍生物为[2-（1-二乙胺基乙酰氧）正戊基]苯甲酸-﹛2-甲氧基-4-[2-（4-硝氧丁氧羰基）乙烯基]﹜苯酯。

作为优选，R为二乙胺基；A为，n=3，所述衍生物为[2-（1-二乙胺基乙酰氧）正戊基]苯甲酸-4-[2-（4-硝氧丁氧羰基）乙烯基]苯酯。

作为优选，R为吗啉基；A为，n=3，所述衍生物为[2-（1-吗啉基乙酰氧）正戊基]苯甲酸-4-[2-（4-硝氧丁氧羰基）乙烯基]苯酯。

作为优选，R为二乙胺基；A为C4烷基，所述衍生物为[2-（1-二乙胺基乙酰氧）正戊基]苯甲酸-（4-硝氧）丁酯。

作为优选，R为吗啉基；A为C4烷基，所述衍生物为[2-（1-吗啉基乙酰氧）正戊基]苯甲酸-（4-硝氧）丁酯。

作为优选，R为哌啶基；A为C4烷基时，所述衍生物为[2-（1-哌啶基乙酰氧）正戊基]苯甲酸-（4-硝氧）丁酯。

作为优选，R为二乙胺基；A为苯环上间位取代基为C2烷基时，所述衍生物为[2-（1-二乙胺基乙酰氧）正戊基]苯甲酸-[4-（2-硝氧乙基）]苯酯。

作为优选，R为哌啶基；A为苯环上间位取代基为C2烷基时，所述衍生物即为[2-（1-哌啶基乙酰氧）正戊基]苯甲酸-[4-（2-硝氧乙基）]苯酯。

作为优选，R为吗啉基；A为苯环上间位取代基为C2烷基，所述衍生物即为[2-（1-吗啉基乙酰氧）正戊基]苯甲酸-[4-（2-硝氧乙基）]苯酯。

作为优选，所述衍生物包括[2-（1-吗啉基乙酰氧）正戊基]苯甲酸-﹛2-甲氧基-4-[2-（4-硝氧丁氧羰基）乙烯基]﹜苯酯、[2-（1-哌啶基乙酰氧）正戊基]苯甲酸-﹛2-甲氧基-4-[2-（4-硝氧丁氧羰基）乙烯基]﹜苯酯、[2-（1-二乙胺基乙酰氧）正戊基]苯甲酸-﹛2-甲氧基-4-[2-（4-硝氧丁氧羰基）乙烯基]﹜苯酯、[2-（1-二乙胺基乙酰氧）正戊基]苯甲酸-4-[2-（4-硝氧丁氧羰基）乙烯基]苯酯、[2-（1-吗啉基乙酰氧）正戊基]苯甲酸-4-[2-（4-硝氧丁氧羰基）乙烯基]苯酯、[2-（1-二乙胺基乙酰氧）正戊基]苯甲酸-（4-硝氧）丁酯、[2-（1-吗啉基乙酰氧）正戊基]苯甲酸-（4-硝氧）丁酯、[2-（1-哌啶基乙酰氧）正戊基]苯甲酸-（4-硝氧）丁酯、[2-（1-二乙胺基乙酰氧）正戊基]苯甲酸-[4-（2-硝氧乙基）]苯酯、[2-（1-哌啶基乙酰氧）正戊基]苯甲酸-[4-（2-硝氧乙基）]苯酯、[2-（1-吗啉基乙酰氧）正戊基]苯甲酸-[4-（2-硝氧乙基）]苯酯。

进一步地，所述的丁苯酞衍生物为3-（3’-羟基）-丁苯酞酯及盐。

所述3-（3’-羟基）-丁苯酞酯及盐优选为：

3-(3’-甘氨酸酯)-丁苯酞或其盐酸盐：

3-(3’-琥珀酸酯)-丁苯酞或其钠盐：

3-(3’-磷酸)-丁苯酞或其二钠盐

。

进一步地，所述衍生物为2-(α-羟基戊基)苯甲酸盐，结构式如式Ⅱ所示：

II

其中，M为一价金属离子、或是二价金属离子或是有机碱基，n=1或n=2。

作为优选，2-(α-羟基戊基)苯甲酸盐中所述M为钾离子、钠离子、锂离子、钙离子、镁离子或锌离子、N,N-二苄基乙二胺。

所述的含有丁苯酞或其衍生物的组合物，包括但不限于丁苯酞或其衍生物与丹参的组合物、丁苯酞或其衍生物与冰片的组合物、二氧化钛纳米化的丁苯酞组合物。

所述的丁苯酞或其衍生物与丹参的组合物，其比例可以为任意比例，优选丁苯酞或其衍生物与丹参的重量比为1:0.01~100，更优选1:0.1~10；更优选1:1、1:0.625。

所述的丁苯酞或其衍生物与冰片的组合物，其比例可以为任意比例，优选丁苯酞或其衍生物与冰片的重量比为1:0.001~1，更优选1:0.01~1；更优选1:0.1.

本发明还提供了一种二氧化钛纳米化的丁苯酞的组合物（简称：TiO2纳米化的丁苯酞组合物）制备方法，包括以下步骤：

(1)将助熔剂溶于水中，加入丁苯酞；搅拌溶解至溶液澄清；

(2)将二氧化钛纳米管加入步骤(1)所述溶液中，超声波分散，将丁苯酞载入二氧化钛纳米管中；

(3)将步骤（2）得到的溶液冷冻干燥，得到二氧化钛纳米化的丁苯酞组合物。

上述步骤（1）中，所述的助熔剂可以为环糊精或环糊精的衍生物、聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯、聚乙二醇-VE-碳酸酯、聚乙二醇-VE琥珀酸酯、聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、聚乙二醇-胆固醇琥珀酸酯、聚乙二醇-胆固醇甲酯、聚乙二醇-胆固醇硫酸酯、聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯类、泊洛沙姆中的一种或几种。优选羟丙基-β-环糊精、聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯。

上述步骤（1）中，所述的丁苯酞、助熔剂、水的重量比为1:1~100:50~500；优选1:2~80:50~400。

上述步骤（2）中，所述的二氧化钛纳米管可以采用阳极氧化法制备，也可以采用其他方法制备，平均管径为15~80nm；平均管长为50~200nm。

上述步骤（2）中，所述的二氧化钛纳米管的步骤（1）中丁苯酞的重量比为2~10（二氧化钛纳米管）:1（丁苯酞）。

上述步骤（2）中，所述的超声波分散时间不少于30min。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

本发明丁苯酞或其衍生物可用于制备治疗或预防脑震荡的药物，是丁苯酞及衍生物的又一新的适应症，对于脑震荡患者无疑将是一个巨大的福音。

附图说明

图1：大鼠脑震荡模型制备中头盖骨受到冲击的物体及降落方式。

具体实施方式

本发明公开了丁苯酞或其衍生物在制备预防和治疗脑震荡病的药物中的应用，本领域技术人员可以借鉴本发明的内容，适当改进工艺参数或化合物的结构实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明范围内。本发明的应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

实施例1：二氧化钛纳米化的丁苯酞组合物的制备

(1)将38.54g羟丙基-β-环糊精（0.025mol）溶于150g水中，加入1.0g丁苯酞；搅拌溶解至溶液澄清；

(2)将二氧化钛纳米管3.2g（平均管径51nm，平均管长132nm）加入步骤(1)所述溶液中，超声波分散60min，将丁苯酞载入二氧化钛纳米管中；

(3)将步骤（2）得到的溶液冷冻干燥，得到二氧化钛纳米化的丁苯酞组合物。

实施例2：二氧化钛纳米化的丁苯酞组合物的制备

(1)将4.5g聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯溶于400g水中，加入丁苯酞1.0g；搅拌溶解至溶液澄清；

(2)将二氧化钛纳米管4.5g（平均管径70nm，平均管长148nm）加入步骤(1)所述溶液中，超声波分散100min，将丁苯酞载入二氧化钛纳米管中；

(3)将步骤（2）得到的溶液冷冻干燥，得到二氧化钛纳米化的丁苯酞组合物。

实施例3：二氧化钛纳米化的丁苯酞组合物的制备

(1)将32.38g羟丙基-β-环糊精（0.021mol）溶于120g水中，加入1.0g丁苯酞；搅拌溶解至溶液澄清；

(2)将二氧化钛纳米管2.8g（平均管径42nm，平均管长115nm）加入步骤(1)所述溶液中，超声波分散45min，将丁苯酞载入二氧化钛纳米管中；

(3)将步骤（2）得到的溶液冷冻干燥，得到二氧化钛纳米化的丁苯酞组合物。

实施例4：二氧化钛纳米化的丁苯酞组合物的制备

(1)将4.0g聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯溶于350g水中，加入丁苯酞1.0g；搅拌溶解至溶液澄清；

(2)将二氧化钛纳米管4.3g（平均管径60nm，平均管长136nm）加入步骤(1)所述溶液中，超声波分散80min，将丁苯酞载入二氧化钛纳米管中；

(3)将步骤（2）得到的溶液冷冻干燥，得到二氧化钛纳米化的丁苯酞组合物。

实施例5丁苯酞对大鼠脑震荡的治疗作用或预防作用

1.动物模型制备：

清洁级成熟雄性大鼠140只，体重200-300g；室温下（21℃±1℃）常规饲养,自由饮食,明暗周期各半(12h/12h),环境适应两周后,其中120只进行脑震荡模型的制备，另外20只作为正常对照组；

脑震荡模型的制备；用10%水合氯醛0.4g/Kg腹腔注射，使大鼠麻醉，用重量为114.6g的物体从大鼠右侧头盖骨上方20cm处落下，大鼠的头盖骨受到0.224N的冲击(图1)，产生严重的脑震荡。

2.分组及给药：

（1）正常对照组（n=20）：等量生理盐水灌胃；

（2）脑震荡模型组（n=20）：脑震荡动物模型20只，等量溶媒（大豆油）灌胃；

（3）丁苯酞40mg/kg（n=20）：脑震荡动物模型20只，分别于制备模型后8小时、12小时时刻分别给予丁苯酞40mg/kg灌胃，制备模型24小时后处死，进行检测；

（4）实施例1制备的TiO2纳米化的丁苯酞40mg/kg（n=20）：脑震荡动物模型20只，制备模型8小时、12小时时刻分别给予丁苯酞40mg/kg灌胃，制备模型24小时后处死，进行检测；

（5）实施例2制备的TiO2纳米化的丁苯酞40mg/kg（n=20）：脑震荡动物模型20只，制备模型8小时、12小时时刻分别给予丁苯酞40mg/kg灌胃，制备模型24小时后处死，进行检测；

（6）丁苯酞40mg/kg+丹参40mg/kg（n=20）：脑震荡动物模型20只，制备模型8小时、12小时候分别给予丁苯酞40mg/kg、丹参40mg/kg混合灌胃，制备模型24小时后处死，进行检测；

（7）丁苯酞40mg/kg+丹参25mg/kg（n=20）：脑震荡动物模型20只，制备模型8小时、12小时候分别给予丁苯酞40mg/kg、丹参25mg/kg混合灌胃，制备模型24小时后处死，进行检测。

2、评价方法：

2.1测定大鼠BBB（血脑屏障，下同）通透性：采用EBA（伊文思蓝,下同）示踪法，每组取6只大鼠，处死前1h经大鼠尾静脉注入2%的EBA（0.3ml/100g），大鼠皮肤、球结膜等变蓝表示注入成功，1h后，经心脏灌注预冷的生理盐水，直至右心房流出清亮液体时，快速取病变侧脑组织，称湿重后，放入5ml甲酰胺溶液中，酶标仪测定其630nm处的吸光度值，测定EBA的含量。

2.2受损神经元个数的测定：切除额极，放置于2%的TTC磷酸盐缓冲液中，避光，37℃恒温水浴箱中染色15min，染上颜色后弃去TTC，置于4%多聚甲醛中固定24h，计算受损的神经元个数。

2.3脑组织含水量测定：采用干湿法，每组取6只大鼠以水合氯醛深度麻醉后颈椎脱臼法处死，快速断头取脑，切除额极后，在病变侧取约2mm厚的脑组织测定脑含水量。脑组织称重(湿重);置于烤箱内100℃烘24h后，再次称重(干重)。脑组织含水量(%)=(湿重－干重)/湿重×100%。

3.统计学处理：数据以均数±标准差()表示，应用SPSS11.5统计软件对资料进行分析。组间比较采用onewayANOVA，进行Student-Newman-Keuls检验。

4.试验结果：

4.1大鼠BBB通透性

。

血脑屏障的完整性在脑震荡病理生理过程中发挥重要作用，血脑屏障通透性增高造成毛细血管内血浆蛋白与水分渗出引起脑组织细胞外液含量增加，从而引起血管源性脑水肿。

由表1可知：与正常对照组比较，脑震荡模型组的EBA含量显著升高，表明脑震荡发生后，BBB的通透性显著提高，具有非常显著地差异（P<0.01）。

丁苯酞给药能显著降低EBA含量，表明丁苯酞能够显著降低BBB的通透性，与脑震荡模型组相比，消旋丁苯酞、丁苯酞与丹参的组合物、TiO2纳米化的丁苯酞能显著降低BBB的通透性，具有非常显著的差异（P<0.01），说明丁苯酞对脑震荡具有治疗作用。

TiO2纳米化的丁苯酞能显著降低EBA的含量，表明TiO2纳米化的丁苯酞能够显著降低BBB的通透性，与相同剂量的消旋丁苯酞相比，具有非常显著的差异（P<0.01），说明与（消旋）丁苯酞相比，TiO2纳米化的丁苯酞对脑震荡的治疗效果更好。

丁苯酞与丹参的组合物能显著降低EBA的含量，表明丁苯酞与丹参的组合物能够显著降低BBB的通透性，与相同剂量的消旋丁苯酞相比，具有显著的差异（P<0.05或P<0.01），说明与（消旋）丁苯酞相比，丁苯酞与丹参的组合物对脑震荡的治疗效果更好；其中重量比为1:0.625的丁苯酞与丹参的组合物（丁苯酞40mg/kg+丹参25mg/kg）的效果更好。

2.2受损神经元个数的测定

。

由表2可知：与正常对照组比较，脑震荡模型组的受损神经元个数显著升高，表明脑震荡发生后，神经损伤程度显著提高，具有非常显著地差异（P<0.01）。

丁苯酞给药能显著降低受损神经元个数，表明丁苯酞能够显著改善神经损伤程度，与脑震荡模型组相比，消旋丁苯酞、丁苯酞与丹参的组合物、TiO2纳米化的丁苯酞能显著降低受损神经元个数，具有非常显著的差异（P<0.01），说明丁苯酞对脑震荡具有治疗作用。

TiO2纳米化的丁苯酞能显著降低受损神经元个数，表明TiO2纳米化的丁苯酞能够显著改善神经损伤程度，与相同剂量的消旋丁苯酞相比，具有非常显著的差异（P<0.01），说明与（消旋）丁苯酞相比，TiO2纳米化的丁苯酞对脑震荡的治疗效果更好。

丁苯酞与丹参的组合物能显著降低受损神经元个数，表明丁苯酞与丹参的组合物能够显著改善神经损伤程度，与相同剂量的消旋丁苯酞相比，具有显著的差异（P<0.05或P<0.01），说明与（消旋）丁苯酞相比，丁苯酞与丹参的组合物对脑震荡的治疗效果更好；其中重量比为1:0.625的丁苯酞与丹参的组合物（丁苯酞40mg/kg+丹参25mg/kg）的效果更好。

2.3脑组织含水量

。

由表3可知：与正常对照组比较，脑震荡模型组的脑组织含水量显著升高，表明脑震荡发生后，脑水肿情况严重，具有非常显著地差异（P<0.01）。

丁苯酞给药能显著降低脑组织含水量，表明丁苯酞能够显著改善脑水肿程度，与脑震荡模型组相比，消旋丁苯酞、丁苯酞与丹参的组合物、TiO2纳米化的丁苯酞能显著降低脑组织含水量，具有非常显著的差异（P<0.01），说明丁苯酞对脑震荡具有治疗作用。

TiO2纳米化的丁苯酞能显著降低脑组织含水量，表明TiO2纳米化的丁苯酞能够显著改善脑水肿程度，与相同剂量的消旋丁苯酞相比，具有非常显著的差异（P<0.01），说明与（消旋）丁苯酞相比，TiO2纳米化的丁苯酞对脑震荡的治疗效果更好。

丁苯酞与丹参的组合物能显著脑组织含水量，表明丁苯酞与丹参的组合物能够显著改善脑水肿程度，与相同剂量的消旋丁苯酞相比，具有显著的差异（P<0.05或P<0.01），说明与（消旋）丁苯酞相比，丁苯酞与丹参的组合物对脑震荡的治疗效果更好；其中重量比为1:0.625的丁苯酞与丹参的组合物（丁苯酞40mg/kg+丹参25mg/kg）的效果更好。

实施例6：丁苯酞衍生物对脑震荡的治疗作用或预防作用

1.动物及模型的制备：

1.1动物模型制备：

清洁级成熟雄性大鼠100只，体重200-300g；室温下（21℃±1℃）常规饲养,自由饮食,明暗周期各半(12h/12h),环境适应两周后,其80只进行脑震荡模型的制备，另外20只作为正常对照组；

脑震荡模型的制备；同实施例1。

1.2分组及给药：

（1）正常对照组：等量生理盐水灌胃；

（2）脑震荡模型组：脑震荡动物模型20只，等量生理盐水灌胃；

（3）2-（α-羟基戊基）苯甲酸（结构式如下式所示）40mg/kg：脑震荡动物模型20只，分别于制备模型后8小时、12小时时刻分别给予40mg/kg灌胃，制备模型24小时后处死，进行检测；

（4）2-（α-羟基戊基）苯甲酸钾盐（结构式如下式所示）40mg/kg，脑震荡动物模型20只，分别于制备模型后8小时、12小时时刻分别给予40mg/kg灌胃，制备模型24小时后处死，进行检测；

（5）2-（α-正戊酮基）苯甲酸钾盐（结构式如下式所示）40mg/kg，脑震荡动物模型20只，分别于制备模型后8小时、12小时时刻分别给予40mg/kg灌胃，制备模型24小时后处死，进行检测。

2.评价方法：同实施例1。

统计学处理：同实施例1。

试验结果：

4.1大鼠BBB通透性

。

血脑屏障的完整性在脑震荡病理生理过程中发挥重要作用，血脑屏障通透性增高造成毛细血管内血浆蛋白与水分渗出引起脑组织细胞外液含量增加，从而引起血管源性脑水肿。

由表4可知：与正常对照组比较，脑震荡模型组的EBA含量显著升高，脑震荡发生后，BBB的通透性显著提高，具有非常显著地差异（P<0.01）。

2-（α-羟基戊基）苯甲酸给药能显著降低EBA含量，表明2-（α-羟基戊基）苯甲酸能够显著降低BBB的通透性，与脑震荡模型组相比，具有显著地差异（P<0.01），说明2-（α-羟基戊基）苯甲酸对脑震荡具有治疗作用。

2-（α-羟基戊基）苯甲酸钾盐给药能显著降低EBA含量，表明2-（α-羟基戊基）苯甲酸钾盐能够显著降低BBB的通透性，与脑震荡模型组相比，具有显著地差异（P<0.01），说明2-（α-羟基戊基）苯甲酸钾盐对脑震荡具有治疗作用。

2-（α-正戊酮基）苯甲酸钾盐给药能降低EBA含量，与脑震荡模型组相比，不具有显著地差异（P>0.05），说明2-（α-正戊酮基）苯甲酸钾盐对脑震荡不具有治疗作用。

4.2受损神经元个数的测定

。

由表5可知：与正常对照组比较，脑震荡模型组的受损神经元个数显著升高，表明脑震荡发生后，神经损伤程度显著严重，具有非常显著地差异（P<0.01）。

2-（α-羟基戊基）苯甲酸给药能显著减少受损神经元个数，表明2-（α-羟基戊基）苯甲酸能够显著改善神经损伤程度，与脑震荡模型组相比，具有显著地差异（P<0.01），说明2-（α-羟基戊基）苯甲酸对脑震荡具有治疗作用。

2-（α-羟基戊基）苯甲酸钾盐给药能显著减少受损神经元个数，表明2-（α-羟基戊基）苯甲酸钾盐能够显著改善神经损伤程度，与脑震荡模型组相比，具有显著地差异（P<0.01），说明2-（α-羟基戊基）苯甲酸钾盐对脑震荡具有治疗作用。

2-（α-正戊酮基）苯甲酸钾盐给药能减少受损神经元个数，与脑震荡模型组相比，不具有显著地差异（P>0.05），说明2-（α-正戊酮基）苯甲酸钾盐对脑震荡不具有治疗作用。

2.3脑组织含水量

。

由表6可知：与正常对照组比较，脑震荡模型组的脑组织含水量显著升高，表明脑震荡发生后，脑水肿情况严重，具有非常显著地差异（P<0.01）。

2-（α-羟基戊基）苯甲酸给药能显著降低脑组织含水量，表明2-（α-羟基戊基）苯甲酸能够显著改善脑水肿程度，与脑震荡模型组相比，具有显著地差异（P<0.01），说明2-（α-羟基戊基）苯甲酸对脑震荡具有治疗作用。

2-（α-羟基戊基）苯甲酸钾盐给药能降低脑组织含水量，表明2-（α-羟基戊基）苯甲酸钾盐能够显著改善脑水肿程度，与脑震荡模型组相比，具有显著地差异（P<0.01），说明2-（α-羟基戊基）苯甲酸钾盐对脑震荡具有治疗作用。

2-（α-正戊酮基）苯甲酸钾盐给药能降低脑组织含水量，与脑震荡模型组相比，不具有显著地差异（P>0.05），说明2-（α-正戊酮基）苯甲酸钾盐对脑震荡不具有治疗作用。