一种捕食螨以线虫为食的个体发育的观察装置及其制备方法和使用方法

摘要

本发明公开了一种捕食螨以线虫为食的个体发育的观察装置及其制备方法和使用方法。本观察装置包括培养皿、离心管盖、胶体平板和黑色贴纸；离心管盖位于培养皿的内部，离心管盖的顶面贴有黑色贴纸并通过双面胶倒置粘贴固定于培养皿的底部；离心管盖的内部装有胶体平板，胶体平板由琼脂糖和去离子水按1∶50的配比组成。本发明的观察装置的透气性好，观察范围集中，可以充分保障捕食螨生长发育所需的湿度，并能有效防止捕食螨的逃逸丢失，而且能使线虫存活的时间更长，可以对捕食螨以线虫为食的生长发育和繁殖情况进行持续地观察，提高观察数据的准确性和科学性。

说明书

技术领域

本发明涉及植物病虫害防治领域，特别涉及一种以植物线虫为食的捕食螨个体发育的观察装置及其制备方法和使用方法。 

背景技术

植物寄生线虫是植物侵染性病原物之一，影响植物生长发育，致使植物产量减少、品质下降，甚至死亡和绝产。目前，对植物寄生线虫最常用的防治方法是化学防治法即施用化学农药，但化学防治法不仅价格昂贵、成本高，而且它具有高毒、高残留的特性，会造成严重的环境污染和许多其他不良影响。 

采用捕食螨防治植物寄生线虫，与传统的化学药剂防治相比，捕食螨不会产生药害、残留和污染环境的问题，可见捕食螨是一种极有应用价值的植物寄生线虫防治资源，研究利用捕食螨控制植物线虫的相关方法和技术，显得尤为重要。但现有的捕食螨个体发育的观察装置，透气性较差，湿度低，对捕食螨的生存环境模拟较差，同时，存在观察视野过大，捕食螨很容易逃逸丢失等问题，不利于对捕食螨以线虫为食的个体发育情况进行长期的跟踪观察和研究。 

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中存在的缺点，提供一种工艺简单、易于操作的捕食螨以线虫为食的个体发育的观察装置。 

本发明的另一目的在于提供上述观察装置的制备方法。 

本发明的再一目的在于提供上述观察装置的使用方法。 

本发明的目的通过下述技术方案实现： 

一种捕食螨以线虫为食的个体发育的观察装置，包括培养皿1、离心管盖2、胶体平板3和黑色贴纸4；离心管盖2位于培养皿1的内部，离心管盖2的顶面贴有黑色贴纸4并通过双面胶倒置粘贴固定于培养皿1的底部；离心管盖2的内部装有胶体平板3。 

所述胶体平板3由琼脂糖和去离子水组成。 

所述捕食螨以线虫为食的个体发育的观察装置的制备方法，包括下述步骤： 

(1)按照琼脂糖∶去离子水＝1∶50的配比，先将琼脂糖装在容器中，加入去离子水混合均匀；然后加热至琼脂糖完全溶解于水形成胶液；再将胶液倒入离心管盖2，冷凝，得到胶体平板3； 

(2)在装有胶体平板3的离心管盖2的顶面贴上黑色贴纸4，再用双面胶倒置粘贴在培养皿1的底部； 

(3)在培养皿1里面加水至离心管盖高的1/2处，形成水栅台，最后制备得到捕食螨以线虫为食的个体发育的观察装置。 

所述捕食螨以线虫为食的个体发育的观察装置的使用方法，包括下述步骤： 

(1)将线虫加入蒸馏水中，置于离心管内以4000r/min的速度离心2min；然后用吸管吸去上清液，在离心管底部留下含有线虫的液体； 

(2)将含有线虫的液体滴在胶体平板3上，并涂抹均匀，静置10～20min，使表面水分蒸发； 

(3)收集捕食螨在4h内所产的卵，并将捕食螨的卵单个置于胶体平板3上； 

(4)将加载线虫和捕食螨的观察装置置于黑暗培养箱进行培养，培养条件设置为25±1℃、80％RH；每12h从培养箱中取出，在体视显微镜下观察捕食螨的生长发育和存活情况，记录产卵前期、产卵期、产卵后期、日产卵量及寿命。 

本发明与现有技术相比具有如下优点和效果： 

(1)本发明的观察装置的透气性好，观察范围集中，可以充分保障捕食螨生长发育所需的湿度，并能有效防止捕食螨的逃逸丢失。 

(2)本发明采用琼脂糖的胶体平板，与普通琼脂平板相比，能使线虫存活的时间更长，可以对捕食螨以线虫为食的生长发育和繁殖情况进行持续地观察，提高观察数据的准确性和科学性。 

附图说明

图1为捕食螨以线虫为食的个体发育的观察装置的结构示意图。 

图2为捕食螨以线虫为食的个体发育的观察装置的结构俯视示意图。 

其中，1、培养皿；2、离心管盖；3、胶体平板；4、黑色贴纸。 

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。 

实施例1 

捕食螨个体发育的观察装置，包括培养皿1、离心管盖2、胶体平板3和黑色贴纸4。离心管盖2的直径为10mm、高为5mm，位于培养皿1的内部。离心管盖2的顶面贴有黑色贴纸4，并通过双面胶倒置粘贴固定于培养皿1的底部。离心管盖2的内部有胶体平板3，胶体平板3由琼脂糖和去离子水组成，胶体平板3用于放置线虫和捕食螨。 

上述捕食螨个体发育的观察装置的制备方法，包括下述步骤： 

(1)按照琼脂糖∶去离子水＝1∶50的配比，先将琼脂糖装在三角瓶中，加入去离子水混合均匀；然后用微波炉加热至琼脂糖完全溶解于水形成胶液；再将胶液倒入离心管盖至其容积的1/2左右，冷凝10min，得到胶体平板3； 

(2)在装有胶体平板3的离心管盖2的顶面贴上圆形直径10mm的黑色贴纸4，再用双面胶倒置粘贴在培养皿1底部的中间； 

(3)在培养皿1里面加水至离心管盖2高的1/2处，形成水栅台，最后制备得到捕食螨以线虫为食的个体发育的观察装置。 

上述捕食螨个体发育的观察装置的使用方法，包括下述步骤：(1)将线虫加入蒸馏水中，置于1.5mL离心管内以4000r/min的速度离心2min；然后用吸管吸去上清液，在离心管底部留下约0.1mL含有线虫的液体； 

(2)用吸管吸取留下的含有线虫的液体滴在胶体平板3上，并涂抹均匀，静置10～20min，使表面水份适度蒸发； 

(3)收集捕食螨在小于4h内所产的卵，并用挑针将收集到的捕食螨的卵单个置于胶体平板3上； 

(4)将加载线虫和捕食螨的观测装置置于黑暗培养箱中进行培养，培养条件设置为25±1℃、80％RH；每12h从培养箱中取出，在体视显微镜下观察捕食螨的生长发育和存活情况，记录产卵前期、产卵期、产卵后期、日产卵量及寿命。