公开/公告号CN102247478A
专利类型发明专利
公开/公告日2011-11-23
原文格式PDF
申请/专利权人 黑龙江哈尔滨医大药业有限公司;
申请/专利号CN201110131707.2
申请日2011-05-20
分类号A61K36/808(20060101);A61P9/06(20060101);A61P9/10(20060101);
代理机构11271 北京安博达知识产权代理有限公司;
代理人徐国文
地址 150060 黑龙江省哈尔滨开发区哈平路集中区渤海路
入库时间 2023-12-18 03:47:24
法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2017-04-19
专利权人的姓名或者名称、地址的变更 IPC(主分类):A61K36/808 变更前: 变更后: 申请日:20110520
专利权人的姓名或者名称、地址的变更
2013-03-20
授权
授权
2012-01-04
实质审查的生效 IPC(主分类):A61K36/808 申请日:20110520
实质审查的生效
2011-11-23
公开
公开
技术领域
本发明涉及药物的提取及其制备方法,具体地讲,涉及中药的提取及其制备方法。
背景技术
冠状动脉性心脏病(coronary artery heart disease,CHD)简称冠心病,是一种最常见的心 脏病,是指因冠状动脉狭窄、供血不足而引起的心肌机能障碍和(或)器质性病变,故又称缺 血性心肌病(IHD)。CHD/IHD是一种最常见的心脏病。世界卫生组织对CHD/IHD分类如下: (1)原发性心脏骤停;(2)心绞痛;(3)心肌梗塞;(4)缺血性心脏病中的心力衰竭;(5) 心律失常。
流行病学调查表明各种心脏病均可导致心源性猝死(SCD),CHD/IHD为最主要的原因 之一,在西方国家冠心病可能占猝死原因的80%,约20%~25%的CHD/IHD以猝死为首发 表。冠心病在美国发病率最高,美国SCD的发生率在30万/年~40万/年。我国冠心病发生 率低于美国和一些欧洲国家,但人口总基数大,近期由阜外心血管病医院牵头开展的我国一 项十五攻关项目公布了我国SCD流行病调查结果,得出我国的SCD发生率,若以13亿人口 推算,我国猝死的总人数约为54.4万/年。其危害程度不言而喻。目前天然药物的研究工作在 全世界范围都是热点,对于传统中药方剂开发利用是国内研发新药的重要来源之一。
中医在治疗冠心病方面主要采取以下几方面治疗:(1)补益类方药治疗冠心病:动脉粥样 硬化在中医辩证有正虚的一面,扶正是一个主要治则,其中根据不同脏腑定位选用不同治法 方药,如补脾,补肾,温阳等。(2)活血化瘀类方药治疗冠心病:活血化瘀很早就受到人们 的重视,在这方面做了大量的研究,并结合现代药理学研究揭示了相关机制。主要有脂质侵 润;血小板聚集和血栓形成;炎性反应;血管平滑肌细胞增殖等方面。(3)除湿祛痰类方药治 疗冠心病:导致动脉粥样硬化的主要因素是血脂过高,脂质代谢失调。而高脂血症,根据临 床表现属于中医学痰浊、痰瘀范畴。药理研究表明,化痰方药在降低血清总胆固醇(TC)、 低密度脂蛋白(LDL)和对抗脂斑形成方面具有显著作用。(4)清热解毒类方药治疗冠心病: 动脉粥样硬化发病机制中的炎症学说,为该类方药的应用提供了理论基础。现代药理学研究 表明,以含有玄参、石斛、牛膝、金银花等中药的脉络宁复方注射液对血栓栓塞性疾病效果 突出,且四种以上的药物结合使得其在心脑血管系统中也可以相对提高纤溶活性、减少纤维 蛋白原含量、抗栓溶栓、改善血流变特性、改善微循环、保护心脑血管和组织等(于锋、金 亦涛、綦春玉、解炜、施钰文.脉络宁注射液药理学研究进展[J].中国新药杂志,2002,(12).), 但这些药理活性仅仅说明金银花与玄参具有配伍、治疗心脑血管疾病的基础,在实际治疗是 否可以单独将二者结合用于缺血性心脏病和心律失常的疾病方面,及治疗的有效部位上尚且 需要进一步深入的研究。
发明内容
本发明的目的在于,针对上述问题,提供一种治疗缺血性心脏病及心律失常的中药提取物 及其制备方法,申请人通过大量实验优选单独将金银花与玄参结合,且更进一步到得到二者 配比及提取工艺,采用正交试验和实验动物模型药效活性评价手段,获得对缺血性心脏病及 心律失常作用明确的活性部位,不但具有组方简单、有效成分清晰等优点;且动物实验中表 明,有效部位在治疗缺血性心脏病和抗化学药物诱导的心律失常的两个适应症中,疗效明显 优于目前市售脉络宁注射液,在治疗缺血性心脏病及因心肌缺血诱发的心律失常方面具有显 著的适应症明确、疗效确切的特点。
本发明的另一个目的在于,提供一种由玄参和金银花组成的治疗缺血性心脏病及心律失 常的中药提取物。
本发明的再一个目的在于,提供一种由玄参和金银花组成的治疗缺血性心脏病及心律失 常的中药提取物的制备方法。
本发明提供的治疗缺血性心脏病的中药提取物是由5~800重量份的玄参和10~1500重量 份的金银花为原料制得的。
本发明提供的优选的治疗缺血性心脏病的中药提取物是由150~750重量份的玄参和 300-1500重量份的金银花为原料制得的。
本发明提供的最优选的治疗缺血性心脏病的中药提取物是由500重量份的玄参和1000重 量份的金银花为原料制得的。
本发明提供的治疗缺血性心脏病及心律失常的中药提取物是采用玄参和金银花为原料, 通过包括以下步骤的方法制备而成:(1)将玄参和金银花药材充分混合,用水煎煮,合并提 取液,浓缩;(2)在浓缩液中加入乙醇,搅拌并静置,滤除沉淀,将滤液浓缩、干燥,获得 所述中药提取物。
本发明提供的治疗缺血性心脏病的中药提取物的制备方法,包括以下步骤:(1)将玄参 和金银花药材充分混合,加入两味药材总量6-12倍的水煎煮1~4次,每次1~4小时,合并提 取液,浓缩至半固体状,使波美度达到1.05~1.20(80℃);(2)在浓缩液中加入乙醇使醇浓 度达到50~80%,搅拌并在4~40℃温度下静置8~24小时,滤除沉淀,回收乙醇后制成浓缩膏, 使浓缩膏的波美度为1.05~1.20(80℃),干燥,获得所述中药提取物。
本发明所提供的中药提取物的制备方法为水煎煮醇沉淀法,水煎法遵循了中药传统用药 的习惯,可以将中药中的化学成分较为完全地提取出来,且完全满足大工业生产中药制剂的 需要;醇沉法为现代中药纯化技术,可以有效且经济地去除大部分玄参和金银花中含有的多 糖、淀粉、蛋白质等无效成分,最大限度地保留玄参中的主要化学成分苯丙素苷类、环烯醚 萜苷类成分和金银花中的环烯醚萜苷类、有机酸类成分。这几类化学成分具有中强度极性, 且在热水中具有较好的溶解性,故采用水煎煮醇沉淀法可以高效、简便、经济地进行提取富 集。
本发明还提供了上述中药提取物在制备治疗缺血性心脏病药物中的应用。
本发明所提供的中药提取物可以制成任何一种临床或药学上可接受的剂型,如口服常释 制剂、缓释控释制剂、丸剂、滴丸剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液体制剂、注射剂、吸入剂、 栓剂等,优选口服制剂或注射剂。
本发明所提供的中药提取物可采用现有制药领域的常规方法生产,可以添加各种药学上 可接受的辅料,如赋形剂、稀释剂、崩解剂、粘合剂、增溶剂、等渗调节剂、润滑剂、促溶 剂、甜味剂、着色剂等。
与现有技术相比,本发明提供的一种治疗缺血性心脏病及心律失常的中药提取物及其制 备方法具有如下的有益效果:
1、经药效学实验证明,本发明的中药提取物对乌头碱诱发小鼠心律失常、哇巴因诱发的 豚鼠心律失常和大鼠冠脉结扎诱发的心律失常均具有预防作用,能够明显降低大鼠冠脉结扎 后心肌梗死面积,揭示该中药提取物对缺血性心脏病及心律失常具有很好的预防和治疗作用。
2、提供了由玄参和金银花组成的新的用于治疗缺血性心脏病的中药提取物,满足了临床 上对于中药、天然药物来源的治疗缺血性心脏病药物的需要;
3、该中药提取物效果显著,能够治疗心律失常及缺血性心脏病;
4、单纯以玄参和金银花为原料,组方简单,为医学上进一步探讨玄参和金银花在治疗缺 血性心脑血管疾病的治病机理方面提供了有力的帮助;
5、利用正交试验和实验动物模型药效活性评价手段,获得对缺血性心脏病及心律失常作 用明确的活性部位;
6、实验证明玄参与金银花的结合,在治疗缺血性心脏病及相应的心律失常模型上具有突 出显著的作用,效果优于试验中设定的阳性药物脉络宁注射液。
具体实施方式
以下通过实施例对实施例对本发明提供的一种治疗缺血性心脏病及心律失常的中药提取 物及其制备方法做进一步更详细的说明。
相关试验
试验1中药提取物的制备
第一组:分别取金银花和玄参干燥药材800g、40g,充分混合,加入两味药材总量6倍 的水煎煮3次,每次4小时,合并提取液,浓缩至半固体状,使波美度达到1.12(80℃);在 浓缩液中加入乙醇使醇浓度达到70%,搅拌并在20℃温度下静置10小时,滤除沉淀,回收 乙醇后制成浓缩膏,使浓缩膏的波美度为1.16(80℃),干燥,获得所述中药提取物(JX1-A)。
第二组:分别取金银花和玄参干燥药材500g、100g,充分混合,加入两味药材总量8 倍的水煎煮4次,每次1小时,合并提取液,浓缩至半固体状,使波美度达到1.14(80℃); 在浓缩液中加入乙醇使醇浓度达到80%,搅拌并在40℃温度下静置18小时,滤除沉淀,回 收乙醇后制成浓缩膏,使浓缩膏的波美度为1.08(80℃),干燥,获得所述中药提取物(JX1-B)。
第三组:分别取金银花和玄参干燥药材500g、50g,充分混合,加入两味药材总量10 倍的水煎煮1次,每次3小时,合并提取液,浓缩至半固体状,使波美度达到1.10(80℃); 在浓缩液中加入乙醇使醇浓度达到60%,搅拌并在15℃温度下静置24小时,滤除沉淀,回 收乙醇后制成浓缩膏,使浓缩膏的波美度为1.04(80℃),干燥,获得所述中药提取物(JX1-C)。
第四组:分别取金银花和玄参干燥药材500g、500g,充分混合,加入两味药材总量12 倍的水煎煮3次,每次2小时,合并提取液,浓缩至半固体状,使波美度达到1.10(80℃); 在浓缩液中加入乙醇使醇浓度达到50%,搅拌并在4℃温度下静置24小时,滤除沉淀,回收 乙醇后制成浓缩膏,使浓缩膏的波美度为1.12(80℃),干燥,获得所述中药提取物(JX2-A)。
第五组:分别取金银花和玄参干燥药材800g、400g,充分混合,加入两味药材总量12 倍的水煎煮4次,每次2小时,合并提取液,浓缩至半固体状,使波美度达到1.13(80℃); 在浓缩液中加入乙醇使醇浓度达到50%,搅拌并在30℃温度下静置12小时,滤除沉淀,回 收乙醇后制成浓缩膏,使浓缩膏的波美度为1.12(80℃),干燥,获得所述中药提取物(JX2-B)。
第六组:分别取金银花和玄参干燥药材200g、400g,充分混合,加入两味药材总量10 倍的水煎煮1次,每次4小时,合并提取液,浓缩至半固体状,使波美度达到1.11(80℃); 在浓缩液中加入乙醇使醇浓度达到60%,搅拌并在25℃温度下静置8小时,滤除沉淀,回收 乙醇后制成浓缩膏,使浓缩膏的波美度为1.05(80℃),干燥,获得所述中药提取物(JX3-A)。
第七组:分别取金银花和玄参干燥药材100g、500g,充分混合,加入两味药材总量7 倍的水煎煮2次,每次3小时,合并提取液,浓缩至半固体状,使波美度达到1.10(80℃); 在浓缩液中加入乙醇使醇浓度达到75%,搅拌并在35℃温度下静置24小时,滤除沉淀,回 收乙醇后制成浓缩膏,使浓缩膏的波美度为1.20(80℃),干燥,获得所述中药提取物(JX3-B)。
第八组:分别取金银花和玄参干燥药材60g、600g,充分混合,加入两味药材总量6倍 的水煎煮4次,每次4小时,合并提取液,浓缩至半固体状,使波美度达到1.16(80℃);在 浓缩液中加入乙醇使醇浓度达到80%,搅拌并在10℃温度下静置24小时,滤除沉淀,回收 乙醇后制成浓缩膏,使浓缩膏的波美度为1.18(80℃),干燥,获得所述中药提取物(JX3-C)。
试验2中药提取物的药效评价
获得的中药组合物(JX2-B)在缺血性心脏病和心律失常中的药效学研究。
1、药物对小鼠乌头碱诱发心律失常的保护作用
方法1:雄性小鼠18-25g,随机分为六组,每组20只,给药组灌胃实验药物,空白组灌 胃等体积生理盐水。每组小鼠腹腔注射戊巴比妥钠40mg·kg-1麻醉。实验组和对照组小鼠 使用恒流泵尾静脉恒速给予乌头碱0.2ml/min(10ug/ml),观察首次心律失常出现时间和存活时 间。结果见表1,结果说明JX2-B具有良好的抗乌头碱诱导动物心律失常活性,且效果优于 脉络宁注射液。
方法2:雄性小鼠18-25g,随机分为六组,每组20只,给药组尾静脉注射实验药物,空 白组静脉注射等体积生理盐水。每组小鼠腹腔注射戊巴比妥钠40mg·kg-1麻醉。实验组和 对照组小鼠使用恒流泵尾静脉恒速给予乌头碱0.2ml/min(10ug/ml),观察首次心律失常出现时 间和存活时间。结果见表2,结果说明静脉注射JX2-B同样可以延长乌头碱诱导动物心律失 常的存活时间。
从以上两组实验结果表明,JX2-B可能是抗药物诱导心律失常的最佳提取工艺。
表1.口服药物JX1-A、JX1-B、JX1-C、JX2-A、JX2-B、JX3-A、JX3-B和JX3-C对小鼠乌头 碱诱发心律失常的作用(n=20)
*表示与空白组比较p<0.05;**表示与空白组比较p<0.01
表2.静脉注射药物JX1-A、JX1-B、JX2-B、JX3-A和JX3-B对小鼠乌头碱诱发心律失常的作 用(n=20)
*表示与空白组比较p<0.05;**表示与空白组比较p<0.01
2、JX2-B对豚鼠哇巴因诱发心律失常的保护作用
方法:雄性豚鼠300-350g随机分为四组,每组6只.。给药组尾静脉给予实验药物,空白 组给予等体积生理盐水。安慰剂组给予安慰剂,阳性药物选择脉络宁。末次给药30分钟后, 各组用10%水合氯醛3.5ml·kg-1麻醉。固定并记录心电,分离颈总静脉,插管并连接输液 泵,静脉恒速注射哇巴因300ug·ml-1,6ug·min-1。记录首次心律失常出现时间,室速,室 颤百分率。存活时间。结果见表3,结果显示JX2-B不仅对乌头碱诱发的心律失常具有良好 的拮抗作用,还能对抗哇巴因诱导的豚鼠心律失常,进一步验证了JX2-B具有良好的抗心律 失常的药效活性。
表3.静脉注射药物JX2-B、HHJ(安慰剂)、脉络宁阳性药物对豚鼠哇巴因诱发心律失常的 作用(n=6)
*表示与空白组比较p<0.01;▲表示与HHJ组比较p<0.05
3、药物对大鼠冠脉结扎后出现心律失常及心肌梗死面积的保护作用
方法1:雄性Wistar大鼠300g±25g随机分为四组,每组6只。给药组灌胃实验药物,空 白组灌胃等体积生理盐水。腹腔注射戊巴比妥钠50mg·kg-1麻醉。气管插管,通呼吸机。 左侧开胸,暴露心脏。在肺动脉圆锥与左心耳之间心前壁上穿一丝线(3-0),四肢皮下置 电极针,观测心电。结扎左冠状动脉前降支。观察首次早搏出现时间,早搏出现次数。室速 (VT),室颤(VF)持续时间。结果见表4,口服JX2-B具有良好的抗心梗诱发的心律失常,且 能有效的降低心梗引起的心肌细胞梗死面积。
方法2:雄性Wistar大鼠300g±25g随机分为四组,每组6只。给药组尾静脉给予实验药 物,空白组给予等体积生理盐水。腹腔注射戊巴比妥钠50mg·kg-1麻醉。气管插管,通呼 吸机。左侧开胸,暴露心脏。在肺动脉圆锥与左心耳之间心前壁上穿一丝线(3-0),四肢皮 下置电极针,观测心电。结扎左冠状动脉前降支。观察首次早搏出现时间,早搏出现次数。 室速,室颤持续时间。结果见表5,静脉注射JX2-B同样具有良好的抗心律失常及减少心肌 梗死面积的作用。
以上实验结果证明,JX2-B具有广泛的抗心律失常活性,在化学药物诱导和手术诱导的动 物心律失常模型中具有良好的治疗效果,且能够降低因心肌缺血诱导的心肌细胞梗死面积, 结果优于上市药物脉络宁注射液。
表4口服药物JX2-B对大鼠冠脉结扎诱发心律失常的保护作用(n=6)
*表示与Control组比较p<0.05,n=6
表5.静脉注射药物JX2-B对大鼠冠脉结扎诱发心律失常的保护作用(n=6)
*表示与Control组比较p<0.01,▲表示与HHJ组比较p<0.05n=6
(1)胶囊剂形式的中药提取物的制备
组成:中药提取物10g
淀粉100g
60%乙醇适量
制法:将中药提取物与淀粉混合均匀,加入适量60%乙醇制成软材,制粒后于50℃下干 燥后于14目筛整粒,灌装胶囊,即得。
(2)片剂形式的中药提取物的制备:
组成:
制法:将中药提取物与淀粉混合均匀,加入适量60%乙醇制成软材,制粒后于50℃下干 燥后于14目筛整粒,加入硬脂酸镁混合后,压片机压片,即得。
(3)颗粒剂形式的中药提取物的制备
组成:
制法:将中药提取物中加入蔗糖粉和淀粉混合均匀,用60%乙醇调节干湿度,制得软材 后制成湿颗粒,50℃下干燥后于14目筛整粒,使颗粒均匀一致,装袋,即得。
(4)小容量注射剂的中药提取物的制备:
组成:
制法:将中药提取物及氯化钠用全量60-80%的注射用水混合均匀,煮沸,冷却,过滤, 补加适量注射用水,加入普朗尼克F-68,搅匀,加20%NaOH溶液调节pH至8.5-9.2,再将 注射用水加至10ml,过滤,灌封,100℃灭菌45min,即得。
(5)大容量注射剂的中药提取物的制备:
组成:
制法:将中药提取物及氯化钠用全量60-80%的注射用水混合均匀,煮沸,冷却,过滤, 补加适量注射用水,加入普朗尼克F-68,搅匀,加20%NaOH溶液调节pH至5-8,再将注 射用水加至10ml,过滤,灌封,115℃灭菌45min,即得。
(6)水丸剂的中药提取物的制备:
组成:金银花提取物5g
玄参 5g
制法:将金银花提取物和玄参粉碎成细粉,过筛,混匀,制水泛丸,干燥,打光即得。
(7)滴丸剂的中药提取物的制备:
组成:中药提取物 300g
聚乙二醇6000 700g
制法:将主药溶解、混悬或乳化在已熔融的聚乙二醇6000基质中,保持恒定的温度(80 ℃~100℃)经过大小管径的滴头等速滴入冷凝液中,凝固形成的丸粒徐徐沉入器底,取出, 洗去冷凝液,干燥,即成滴丸。
(8)口服溶液剂的中药提取物的制备:
组成:中药提取物 150ml
单糖浆 300ml
苯甲酸钠 2.5g
制法:将中药提取物用适量水稀释,滤过,加入单糖浆、苯甲酸钠,再加适量的水至1000 ml。冷藏,滤封装于10ml口服液瓶中,100℃灭菌30分钟,即得。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对其限制,尽管参照上述实施例对本发明 进行了详细的说明,所属领域的普通技术人员应当理解:技术人员阅读本申请说明书后依然 可以对本发明的具体实施方式进行修改或者等同替换,但这些修改或变更均未脱离本发明申 请待批的权利要求保护范围之内。
机译: 用于检测和/或诊断一种或多种心律失常原因的方法,用于检测和/或治疗一种或多种心律失常原因的系统,用于治疗心律失常的用于检测心律失常的可调传感器装置,用于检测和/或诊断心律失常的方法/或诊断生物节律紊乱的一种或多种原因,用于检测和/或治疗心律的一种或多种病因,生物节律紊乱的系统以及治疗生物节律紊乱的方法
机译: 包含中提琴中药提取物或中提琴中药精子肉桂和甘草提取物的组合物。用于预防或治疗脂质相关的心血管疾病和肥胖
机译: 一种治疗皮肤病的菊花提取物的制备方法,一种治疗皮肤病的菊花提取物和包含该提取物的药物组合物