二步微生物转化法提高虎杖中白藜芦醇含量的方法

摘要

本发明提供一种二步微生物转化法提高虎杖中白藜芦醇含量的方法，是先将干燥的虎杖粉粹至80目，加水浸润，用专用微生物将浸润后的虎杖粉置于温度控制在35～60℃的容器内，恒温发酵12～30小时，使白藜芦醇的类似物转化成虎杖甙或白藜芦醇，然后加入低温酵母，使温度降低到20-30℃，恒温发酵30-48小时，使虎杖甙转化成白藜芦醇。本发明可大大提高虎杖原料中白藜芦醇的含量，操作简单、容易，降低了生产成本，而且转化工艺稳定、白藜芦醇转化率高，设备简单，投资少。

说明书

技术领域

本发明涉及微生物转化提取植物有效成分的技术领域，具体地说，是提供一种提高中药虎杖原料中白藜芦醇含量的方法。

技术背景

    白藜芦醇(Resveratrol)，化学名称为3，4^，，5一三羟基二苯乙烯，具有明显的抗菌、抗炎、抗癌、抗血栓、抗高血脂症、抗脂质边氧化等多方面的药理活性，广泛用于保健品、食品、化妆品等领域。其广泛存在于葡萄科、百全科、豆科、伞形科、莎草科等植物中。研究发现白藜芦醇在虎杖中的含量最高，而且虎杖中还含有白藜芦醇的葡萄糖甙即虎杖甙。中国发明专利申请99115156.9公开了《一种从中药虎杖中提取白藜芦醇的工艺》，该工艺是在粉未状虎杖原料中加入复合酶在恒温下进行酶解反应48～72小时酶解原料：再用溶剂萃取、浓缩与精制而得。中国专利公开的“微生物转化虎杖材料提取高纯白藜芦醇的工艺”（200610031850.3），采用微生物专用酶在15-45℃的条件下酶解反应28～30小时，提高白藜芦醇的含量，后经提取、层析分离得到白藜芦醇产品。进行这种从中药虎杖中提取白藜芦醇的工艺使原本仅作为中药材使用的虎杖得到了深度开发和利用。但是，通过酶解提取白藜芦醇的工艺路线较复杂，原料中白藜芦醇含量提高有限，成本较高。

发明内容

本发明的目的是提供二步微生物转化法提高虎杖中白藜芦醇含量的方法，这种方法工艺简单、操作容易、转化率高。

   本发明的二步微生物转化法提高虎杖中白藜芦醇含量的方法，其工艺包括以下步骤：

  （1）先将干燥的虎杖粉粹至80目，加水浸润虎杖粉；用专用微生物将浸润后的虎杖粉置于温度控制在35～60℃的容器内，恒温发酵12～30小时，获得第一步发酵后的虎杖粉，使白藜芦醇的类似物转化成虎杖甙或白藜芦醇，所述专用微生物为高温酵母或酵母+糖化酶或高温酵母+糖化酶；

（2）在第一步转化的基础上，加入低温酵母，调节发酵的温度，使温度降低到20-30℃，恒温发酵30-48小时，使虎杖甙转化成白藜芦醇。

   步骤（1）中，专用微生物的加入量与虎杖的重量比为：专用微生物∶虎杖=1～3∶100。

   步骤（2）中，低温酵母的加入量与虎杖的重量比为：低温酵母∶虎杖=1～3∶100。

    采用本发明工艺实施提高中药虎杖原料白藜芦醇的含量方法，具有如下优点：（1）虎杖资源分布广泛，价廉，通过二步转化可大大提高虎杖原料中白藜芦醇的含量。操作简单、容易，大大提高了资源的利用，降低了生产原材料成本。（2）转化工艺稳定、白藜芦醇转化率高，设备简单，投资少。

    具体实施方式

下面给出本发明的几个实施例。

    实施例1：二步微生物转化法提高虎杖中白藜芦醇含量的方法，步骤如下

  （1）虎杖原料粉粹：先将干燥虎杖采用粉粹机粉粹至80目；

  （2）第一步转化：取虎杖5kg，加入4kg水即虎杖原料重量70%的水浸润虎杖粉，并搅拌均匀；加入50g高温酵母将浸润后的虎杖粉置于温度控制在55℃的容器内，恒温发酵25小时，获得第一步发酵后的虎杖粉；使白藜芦醇的类似物转化成虎杖甙或白藜芦醇，专用微生物为高温酵母或酵母+糖化酶或高温酵母+糖化酶。

    （3）第二步转化：在第一步转化的基础上，加入低温酵母50g，调节发酵的温度为25℃，恒温发酵40小时，使虎杖甙转化成白藜芦醇。

实施例2：加入的专用微生物为酵母50g+糖化酶100g，其他同实施例1。

实施例3：加入的专用微生物为高温酵母50g+糖化酶100g，其他同实施例1。

发酵前后虎杖原料中虎杖甙及白藜芦醇的含量变化见下表：

由上表对比可以看出，采用两步转化法可大幅度提高虎杖中白藜芦醇的含量。