2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷在制备治疗抑郁症药物中的应用

摘要

本发明公开了一种2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷在制备治疗抑郁症药物中的应用，以2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷为活性成分制造防治抑郁症药物。本发明了提供含有2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷作为预防和治疗抑郁症药物的用途，它具有几乎无毒的特点，用于制备预防或治疗包括内源性抑郁症、反应性抑郁症、隐匿性抑郁症、药物引起的继发性抑郁症、更年期或产后抑郁症、脑外伤或脑卒中诱发的抑郁症以及抑郁性神经症在内的各种抑郁症状的药物的应用和用于糖尿病合并抑郁症，以及相关病症的药物中的应用。

说明书

技术领域

本发明属于药物，尤其是从天然植物中提取得到的2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的药物新用途，具体涉及它们在制备治疗抑郁症产品中的应用。

背景技术

2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷属二苯乙烯类化合物，分子式为C₂₀H₂₂O₉ 。何首乌中的二苯乙烯苷目前已经成为何首乌药材的专属性指标。近年来对何首乌中2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的生物活性、提取工艺、分析检测方法等方面的研究日益深入。研究发现, 2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷具有诸多药理学作用如：具有强抗氧化清除自由基能力；具有抑制蛋白激酶C 的作用，从而抑制肿瘤生长，同时还具有较强的抗补体活性，可能参与调节机体免疫功能；能够减少大鼠模型脑海马区A -β的生成，降低血清胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平，改善血液流变学，具有明显降低油脂喂养的大鼠血清中总胆固醇作用；能够降低大鼠血浆脂质水平；防治动脉粥样硬化和高脂血症；保护肝脏的功能；对动脉血管具有舒张作用；防治老年痴呆和提高记忆功能.

抑郁症是发病率较高的重大疾病。抑郁症是一种精神科常见的疾病，据世界卫生组织统计，抑郁症已成为世界第4大疾患，中国第2大疾病负担，预测到2020年，可能成为仅次于冠心病的第二大疾病，占全球疾病负担的15%，终身抑郁症的发病率在6%-8%之间，随着人口的逐步老龄化，抑郁症在60岁以上人群中的发病率将高达20%-50%。抑郁症病人是自杀的高危人群，在病人发病至康复期，始终存在自杀的危险。抑郁症的识别诊断率很低，有效治愈率也很低。现有的抗抑郁西药主要是：三环类（ TCAs ），选择性 5-HT 重摄取抑制剂（SSRIs ) ，单胺氧化酶抑制剂 ( MAOIs) ，它们均存在着不同程度的毒副作用，且价格昂贵，因而从传统中药中研发新的抗抑郁药具有重要的理论和实际意义。

发明内容

鉴于现有技术的以上缺点，本发明的目的是研究一项使2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷为活性成分的药物的更为广泛的医学用途，使其在制备治疗抑郁症药物中的得到应用。

本发明研究了2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷在制备治疗抑郁症药物中的应用，以2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷为有效成分制造防治抑郁症药物。

本发明提供了含有2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷作为预防和治疗抑郁症药物的用途，它具有毒性小的特点，并且对抑郁症继发的学习记忆力下降等有明显的缓解作用。2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷或以其作为活性组分组成的药用组合物等用于制备预防或治疗包括内源性抑郁症、反应性抑郁症、隐匿性抑郁症、药物引起的继发性抑郁症、更年期或产后抑郁症、脑外伤或脑卒中诱发的抑郁症以及抑郁性神经症在内的各种抑郁症状的药物的应用和用于糖尿病合并抑郁症，以及用于制备预防和治疗抑郁症引起的继发性的学习记忆下降，快感缺乏等症状的药物中的应用。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明。

下面的动物实验是对本发明的进一步详细说明，但并不意味着对本发明的任何限制。显然，由于所选实验动物药理可行所具有的广泛性表达了本发明应用应溯及的动物群类。

实验动物：雄性昆明系小鼠，开始试验体重18g-30g，购于四川省医学实验动物中心，SCXK[川] 2008-14，每天接受12h光照/12h黑暗，光照周期为8:00-20:00，实验室温度20±2℃，湿度60%，动物可以自行摄取标准饲料和清洁用水，动物实验遵守国际实验动物伦理学要求。

药物:

2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷（标准品）由上海顺勃生物工程技术有限公司提供，用0.5%梭甲基纤维素水溶液制成混悬药液，备用。

实验方案：

1、行为绝望（behavioural despair, BD）抑郁模型

BD模型包括强迫游泳实验（Forced Swimming Test, FST）和悬尾实验（Tail Suspension Test, TST），其理论基础是：在强迫游泳或悬尾的应激条件下，动物经挣扎后出现绝望表现，即不动状态，而抗抑郁剂能缩短动物的不动时间。前者以动物在水中的不动时间、后者以动物被悬挂后的不动时间作为评价抑郁程度的指标。由于此类模型动物的行为学改变几乎可以被现在临床所应用的多数抗抑郁药逆转，具有敏感、简便的特点，故常用于抗抑郁药的快速筛选，是目前抗抑郁药物筛选应用最为广泛的动物模型。但影响BD模型的因素较多，如动物不动状态的判定、环境的安静程度以及实验的时间等都可能影响到实验结果的准确性。

实验方法：

KM小鼠100只随机分组为正常对照组、2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷高、中、低剂量组，共计5组，每组20只动物，各组动物给药方案如下：

⑴正常对照组：口服给蒸馏水；

⑵2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷高剂量组   200mg/kg.d；

⑶2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷中剂量组   100mg/kg.d；

⑷2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷低剂量组    50mg/kg.d

(5) 百优解组: 5mg/kg.d

悬尾实验（Tail Suspension Test, TST）

各组动物每日灌胃给药１次，连续给药7天，最后一天阳性对照组给百优解，给药30min后，将小鼠尾部距末端约2cm处用夹子固定，使小鼠倒挂在悬尾箱内，其头部离箱底约5cm。小鼠悬挂2min后，立刻开始观察，观察持续6min，累计此6min内小鼠的不动时间（小鼠在空中停止挣扎，或仅有细小的肢体运动）。

强迫游泳实验（Forced Swimming Test, FST）

各组小鼠末次给予相应药物或蒸馏水30min后，将小鼠头部朝下放入直径16cm、水深18cm的游泳杯中，水温25±2℃，随即用秒表记录小鼠6min内的不动时间。

表1  各组对小鼠悬尾实验中和强迫游泳实验中不动时间的影响（                                                ±S）

组别n悬尾不动时间（秒）游泳不动时间（秒）对照组20141.08±34.8968.15±28.61百优解组2080.09±28.38^△△34.21±12.28^△△乙烯苷高组2078.33±23.81^△△33.36±13.96^△△乙烯苷中组2080.08±23.84^△△35.92±14.43^△△乙烯苷低组2093.14±27.59^△55.86±18.24

注： 与对照组比较^△P<0.05，^△△P<0.01

2、对药物诱导抑郁状态的影响

利血平等化合物通过耗竭脑内单胺类递质诱发动物的综合症状主要包括：体温下降、眼睑下垂和活动抑制。这些症状的发生可能与利血平降低脑内单胺类递质．尤其是5-羟色胺（5-HT），而续发5-HT受体敏感性改变的结果。单胺类递质系统主要包括5-HT系统、NE系统和多巴胺(DA)系统，在抑郁症的发病机制中起重要作用。抑郁症患者脑及脑脊液中的5-HT，5-HI-AA，NE等含量均比正常人低。5-HT涉及情感、睡眠、警觉、记忆及食欲等的调节，NE不足则可导致精神迟滞。单胺氧化酶(MAO)是单胺类递质(5-HT，NE，DA)的重要灭活酶，若此酶被抑制，将使脑内单胺类递质含量增加，这对改善抑郁症有积极意义。在本世纪50年代，人们在观察抗高血压药利血平的疗效时，发现约有10-15%的病人长期服用此药可产生抑郁症状。后来的药理学研究显示，利血平的基本药理作用是耗竭神经末梢囊泡内的单胺递质，由此提出了抑郁症的单胺假说．认为突触间隙单胺递质减少是抑郁发生的机理，而抗抑郁药通过阻断单胺再摄取或抑制单胺氧化酶(MAO)，使递质代谢减少而发挥抗抑郁作用。

实验方法：

KM小鼠120只随机分组为正常对照组、模型组、百忧解组、2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷高、中、低剂量组，共计6组，每组20只动物，各组动物给药方案如下：

⑴正常对照组：口服给蒸馏水；

⑵2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷高剂量组   200mg/kg.d；

⑶2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷中剂量组   100mg/kg.d；

⑷2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷低剂量组    50mg/kg.d

(5) 百优解组: 5mg/kg.d  

(6) 模型组：利血平1mg/kg.d

各组小鼠连续灌胃蒸馏水或相应药物6天，除正常组外各组予利血平1mg/kg,60min后眼睑下垂，180min后体温下降、活动抑制。次日小鼠末次给药后30min放入小鼠开场实验箱中，适应2min，观察随后4min内小鼠的水平、垂直活动次数，即爬行格子数和站立次数。

表2各组对小鼠开场实验爬行格子数和站立次数的影响（±S）

组别n爬行格子数站立次数对照组2055.77±13.6618.54±4.70模型组2013.50±4.56^△△2.50±0.65^△△

百忧解组2029.17±10.19^﹡5.42±0.30^﹡乙烯苷高组2014.86±3.901.14±0.04乙烯苷中组2011.00±3.825.33±1.73^﹡乙烯苷低组2044.67±13.17^﹡﹡14.56±3.21^﹡﹡

注： 与对照组比较^△P<0.05，^△△P<0.01； 与模型组比较 ﹡P<0.05，﹡﹡P<0.01。

从以上实验结果可知，2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的中剂量组和低剂量组对利血平所致小鼠抑郁模型具有明显的抗抑郁作用。

 3、小鼠自主活动

实验方法同上。

各组小鼠连续灌胃蒸馏水或相应药物6天，除正常组外各组予利血平1mg/kg, 60min后眼睑下垂，180min后体温下降、活动抑制。次日小鼠末次给药后30min放入小鼠自主活动仪，记录5min内的活动次数。

表3各组对小鼠自主活动次数的影响（±S）

组别n自主活动次数对照组2092.77±20.15模型组2059.08±14.79^△百忧解组2078.11±24.02乙烯苷高组2083.83±19.73乙烯苷中组2061.67±18.34乙烯苷低组20103.90±22.42^﹡

注： 与对照组比较^△P<0.05； 与模型组比较 ^﹡P<0.05。

从以上实验结果可知，2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的低剂量组可显著提高小鼠自主活动次数。