9－2－双（三甲基乙酰氧）甲基氧磷基甲氧基－乙基腺嘌呤的制备方法

摘要

本发明涉及制备无定型的9－[2－[[[双(三甲基乙酰氧)甲基]氧磷基]甲氧基]－乙基]腺嘌呤的方法。本发明由于采用了低成本的Me3SiCl试剂替代现有技术中的进口试剂Me3SiBr，并加入催化剂A和/或催化剂B，故9－[2－[[[双(三甲基乙酰氧)甲基]氧磷基]甲氧基]－乙基]腺嘌呤的合成成本大为下降。

说明书

技术领域

本发明涉及9-[2-[[[双(三甲基乙酰氧)甲基]氧磷基]甲氧基]-乙基]腺嘌呤的制备方法。

背景技术

阿德福韦酯(Adefovir Dipivoxil，简称AD)的化学结构式为9-[2-[[[双(三甲基乙酰氧)甲基]氧磷基]甲氧基]-乙基]腺嘌呤，它对HIV、HBV、人CMV、HSV-1和HSV-2都具有较强的体外抗病毒活性，且可抑制HSB-2细胞中人体疱疹病毒6(HHV-6)的复制，因此可抑制HHV-6-引起的细胞病变效应和HHV-6-特定抗原表达。体内给药后，该化合物还能明显地延缓MSV-诱发的肿瘤形成和小鼠的死亡及明显抑制FLV-引起的脾肿大。

临床研究发现，9-[2-[[[双(三甲基乙酰氧)甲基]氧磷基]甲氧基]-乙基]腺嘌呤能有效地治疗HIV感染的病人，其毒性较低。除此之外，9-[2-[[[双(三甲基乙酰氧)甲基]氧磷基]甲氧基]-乙基]腺嘌呤也可用作慢性肝炎B(HBV)的初步治疗或与其它抗HBV药物结合用药。

基于9-[2-[[[双(三甲基乙酰氧)甲基]氧磷基]甲氧基]-乙基]腺嘌呤的上述广泛应用，人们很需要低成本，使用性能好的9-[2-[[[双(三甲基乙酰氧)甲基]氧磷基]甲氧基]-乙基]腺嘌呤。

美国专利4,724,233和4,808,716，EP 481,214，Starrett等J.Med.Chem(1994)37：1857-1864等揭示了9-[2-[[[双(三甲基乙酰氧)甲基]氧磷基]甲氧基]-乙基]腺嘌呤及其制备方法，其所制备的都为无定形形式，其物理性能不利于后续的使用，具有不明确的熔点、流动性差、纯度低及制备困难。

WO 99/04774(PCT/US98/15304)揭示了含AD结晶的组合物及其应用，其还涉及了合成AD的方法。该对比文献中以腺嘌呤为起始物，通过使用碳酸乙烯酯、溴代三甲基硅烷、氯代甲基新戊酸酯、乙氰及甲苯等反应试剂，合成得到含AD的混合液，然后再用选自丙酮、二正丁基醚的混合液，乙酸乙酯和二正丙基醚的混合液，叔丁醇和二正丁基醚的混合液，二氯甲烷和二正丁基醚的混合液，乙醚和二正丙基醚的混合液，四氢呋喃和二正丁基醚的混合液，乙酸乙酯和二正丁基醚的混合液，四氢吡喃和二正丁基醚的混合液，乙酸乙酯和乙醚的混合液，叔丁基·甲基醚，乙醚，二正丁基醚，叔丁醇，甲苯，乙酸异丙酯或乙酸乙酯的溶剂进行结晶，得到AD晶体，结晶收率低于50％。总收率低于10％。

上述部分试剂和结晶溶剂或依赖于国外进口，或其成本昂贵，从而大大提高了9-[2-[[[双(三甲基乙酰氧)甲基]氧磷基]甲氧基]-乙基]腺嘌呤晶体的生产成本，不利于9-[2-[[[双(三甲基乙酰氧)甲基]氧磷基]甲氧基]-乙基]腺嘌呤的使用，收率低，溶剂消耗量大，部分溶剂毒性高，不利于环境保护。

本技术领域长期以来一直致力于开发出生产成本低的9-[2-[[[双(三甲基乙酰氧)甲基]氧磷基]甲氧基]-乙基]腺嘌呤的制备方法。

发明内容

本发明的一个目的是提供所述9-[2-[[[双(三甲基乙酰氧)甲基]氧磷基]甲氧基]-乙基]腺嘌呤晶体的制备方法。

本发明的构思是通过下列技术方案来实施的：

一种下式(V)9-[2-[[[双(三甲基乙酰氧)甲基]氧磷基]甲氧基]-乙基]腺嘌呤的制备方法，

该方法包括：使下式(III)化合物

与二氯甲烷、氯代三甲基硅烷在催化剂A和/或催化剂B的存在下反应，得9-[2-(磷酸甲氧基)乙基]腺嘌呤产物(IV，PMEA)；

然后使化合物(IV)与新戊酸氯甲酯、NMP和三乙胺在催化剂A和/或催化剂B存在下反应得所需的9-[2-[[[双(三甲基乙酰氧)甲基]氧磷基]甲氧基]-乙基]腺嘌呤(V)。

所述的催化剂A是含溴的无机化合物或含溴的有机化合物，优选地选自溴化钠、溴化钾、溴化铵、(R₁R₂R₃)NBr，其中R₁、R₂和R₃可相同或不同，各自独立地选自C_1-16直链或支链烃基。所述的催化剂B是含碘的无机化合物或含碘的有机化合物，优选地选自碘化钠、碘化钾、碘化铵或(R₁R₂R₃)NI，其中R₁、R₂和R₃的定义同上。

所述的催化剂A和催化剂B可单独使用或组合物使用，对其混合比例没有特别限制。

所述的无定形9-[2-[[[双(三甲基乙酰氧)甲基]氧磷基]甲氧基]-乙基]腺嘌呤是通过下列反应流程制得的：

a.Et₃N，b.TsCl，c.KOH/NaOH，d.DMF，e.CH₃ONa/DMF/CH₂Cl₂

f.Me₃SiCl/CH₂Cl₂/H₂O/催化剂A和/或B，g.NMP/催化剂A和/或B

具体实施方式

在本发明的一个实施方案中，所述的无定形9-[2-[[[双(三甲基乙酰氧)甲基]氧磷基]甲氧基]-乙基]腺嘌呤是按照下列步骤来制备的：

(1)向反应容器中加入亚磷酸二乙酯、多聚甲醛，0℃以下加入磺酰氯，三乙胺，反应完成，得到反应产物(I)；

(2)向反应容器中加入由碳酸二乙酯、乙二醇及N，N-二甲基甲酰胺(DMF)组成的混合液反应后，再加入氢氧化钠和腺嘌呤，直至腺嘌呤含量≤0.3％。加入醋酸异丙酯，得到反应产物(II)；

(3)依次加入步骤(2)得到的反应产物(II)、DMF、CH₃ONa，搅拌后加入由步骤(1)得到的反应产物(I)及DMF组成的混合液，搅拌后加入二氯甲烷，回流，再常温搅拌，得浅褐色固体(III)即9-[2-(二乙基磷酸甲氧基)乙基]腺嘌呤；

(4)向反应容器中依次加入(III)，二氯甲烷，氯代三甲基硅烷，加催化剂A和/或催化剂B，搅拌至反应完全，调pH3.0～3.5得9-[2-(磷酸甲氧基)乙基]腺嘌呤产物(IV，PMEA)；

(5)向(IV)中加入新戊酸氯甲酯，NMP和三乙胺，加催化剂A和/或催化剂B，搅拌至反应完全，再加入醋酸异丙酯搅拌后滤除固体，蒸去溶剂，加入丙酮和正丁醚，搅拌得粗品9-[2-[[[双(三甲基乙酰氧)甲基]氧磷基]甲氧基]-乙基]腺嘌呤(V)。

下面结合具体实施例来阐述本发明的9-[2-[[[双(三甲基乙酰氧)甲基]氧磷基]甲氧基]-乙基]腺嘌呤的制备方法。

实施例1

二乙基磺酸氧甲磷酸酯(I)的合成

往N₂保护的反应釜中依次加入亚磷酸二乙酯(购自浙江兰溪嘉华化工有限公司)1.0Kg(7.24摩尔)、多聚甲醛(购自上海溶剂厂，ACS：3525-89-4)0.28kg(8.77摩尔)，搅拌反应2小时，0℃以下加入磺酰氯1.25kg(6.57摩尔)，三乙胺1kg(9.88摩尔)，室温搅拌反应8～10小时，TLC检测反应完成。过滤，用溶剂2×250ml洗涤，合并滤液水洗，活性碳脱色干燥，减压蒸馏除至溶剂含量小于1％(GC)，得油状物，冷却后呈糖浆状，得(I)。收率75～80％，含量：≥85％(HPLC)。

实施例2

9-(2-羟乙基)腺嘌呤(II)的合成：

干燥反应釜N₂保护，依次投入碳酸二乙酯(购自上海试剂总厂)0.75kg(6.35摩尔)、乙二醇(购自上海试剂总厂)0.4Kg(6.45摩尔及DMF 1kg组成的混合液，保温搅拌至反应完成，在投入氢氧化钠0.005kg(0.125摩尔，碾细)，腺嘌呤(购自浙江诚意药业有限公司)1kg(USP24)(7.40摩尔)，保温搅拌HPLC监测腺嘌呤含量≤0.3％，反应结束，加入4.0kg醋酸异丙酯搅拌2小时，滤出固体，用醋酸异内酯洗涤，真空干燥，得粉末状固体(II)，收率90％～95％，含量≥90％(HPLC)。

实施例3

9-[2-(二乙基磷酸甲氧基)乙基]腺嘌呤(III)的合成

干燥反应釜N₂保护，依次加入(II)1.0kg(5.58摩尔)，DMF 4.8kg，CH₃ONa1.0kg，(I)2.25kg(6.98摩尔)，搅拌8～10小时，HPLC监测反应完成，用冰醋酸中和后加入二氯甲烷16kg搅拌，滤出固体，用2×1.5kg二氯甲烷洗涤，合并滤液，水2×0.8kg洗涤，二氯甲烷2×1.5kg提取水相，合并有机相，回收二氯甲烷后加入环己烷3kg，搅拌得固体，真空干燥2天，得浅褐色固体(III)，收率50～65％，含量≥90％(HPLC)，mp136～138℃。

实施例4

9-[2-(磷酸甲氧基)乙基]腺嘌呤(IV，PMEA)的合成

干燥反应釜N₂保护，依次加入(III)1.0kg(3.03摩尔)，二氯甲烷5kg，氯代三甲基硅烷1.65kg(15.20摩尔)，搅拌反应2天，薄板监测未见产物斑点。

实施例5

9-[2-(磷酸甲氧基)乙基]腺嘌呤(IV，PMEA)的合成

干燥反应釜N₂保护，依次加入(III)1.0kg(3.03摩尔)，二氯甲烷5kg，溴代三甲基硅烷1.65kg(10.78摩尔)，搅拌至反应完成，蒸出二氯甲烷后加入水3kg过滤，溶于碱后滤去除不溶物，滤液酸化得固体，真空干燥2天，粉碎，得白色固体(IV)，收率50～55％，含量≥96％(HPLC)，mp≥260℃(汽化)。

实施例6

9[2(磷酸甲氧基)乙基]腺嘌呤(IV，PMEA)的合成

干燥反应釜N₂保护，依次加入(III)1.0kg(3.03摩尔)，二氯甲烷5kg，氯代三甲基硅烷1.65kg(15.20摩尔)，催化剂B(NaI，2摩尔％，相对于III)，搅拌3～5小时，TLC检测(III)反应完全，蒸出二氯甲烷后加入水3kg，过滤，溶于碱后滤去除不溶物，滤液酸化得固体，真空干燥2天，粉碎，得白色固体(IV)，收率85～90％，含量≥98％(HPLC)，mp≥278℃(汽化)。

实施例7

9-[2-[[[双(三甲基乙酰氧)甲基]氧磷基]甲氧基]-乙基]腺嘌呤(V)的合成

干燥反应釜N₂保护，依次加入(IV)1.0kg(3.66摩尔)，氯甲基新戊酸酯2.5kg(16.60摩尔)，NMP 4kg，三乙胺1kg(9.88摩尔)，搅拌6～10小时，加入醋酸异丙酯12kg，搅拌，滤除固体，有机相减压蒸去溶剂，残留油状物中加入丙酮1kg及正己烷6kg，搅拌得固体，真空干燥，得粗品(V)。收率40～50％，含量≥97％(HPLC)。

实施例8

9-[2-[[[双(三甲基乙酰氧)甲基]氧磷基]甲氧基]-乙基]腺嘌呤(V)的合成

干燥反应釜N₂保护，依次加入(IV)1.0kg(3.66摩尔)，氯甲基新戊酸酯2.5kg(16.60摩尔)，NMP 4kg，三乙胺1kg(9.88摩尔)，催化剂A(NH₄Br，2摩尔％，相对于IV)，搅拌2～3小时，加入醋酸异丙酯12kg，搅拌滤除固体，有机相减压蒸去溶剂，残留油状物中加入丙酮1kg及正己烷6kg，搅拌滤得固体，真空干燥，得粗品(V)。收率70～75％，含量≥97％(HPLC)。

元素分析(C₂OH₃₂N₅O₈P)：计算值％C 47.90；H 6.43；N 13.97；P 6.18。

测定值％C 48.01；H 6.45；N 13.86；P 6.12。

IR(KBr，cm^-1)：3367.16，3275.97，3122.44，2981.10，2935.17，2875.39，1759.15，1683.62，1605.43，1573.65，1480.43，1263.00，1137.26，1029.64，967.08。

¹H NMR(CDCl₃)δ：8.332(s，1H)，7.943(s，1H)，6.552(brs，2H)，5.709-5.653(m，4H)，4.407(t，J＝5.2Hz，2H)，3.964(t，J＝5.2Hz，2H)，3.877(d，J＝7.6Hz，2H)，1.212(s，18H)。

¹³C NMR(CDCl₃)δ：152.739(1个CH)，149.713(1个季碳)，119.245(1个季碳)，155.734(1个季碳)，141.079(1个CH)43.166(1个CH2)，71.217(d，J＝9.5Hz，1个CH2)65.392(d，J＝165.7Hz，1个CH2)，81.545(d，J＝6.4Hz，2个CH2)176.570(2个季碳)，38.525(2个季碳)，26.641(6个CH3)

³¹P NMR(CDCl₃)δ：21.745(1个P)。

MS(EI，M+)501；MS(ESI)，[M+1]+502，[M+K]+540，[2M+1]+1003，[2M+Na]+1025，[2M+K]+1041。

上述结果证明实施例8确实合成得到了式(V)的9-[2-[[[双(三甲基乙酰氧)甲基]氧磷基]甲氧基]-乙基]腺嘌呤。

本发明由于采用了低成本的Me₃SiCl试剂替代现有技术中的进口试剂Me₃SiBr，并加入催化剂A和/或催化剂B，故9-[2-[[[双(三甲基乙酰氧)甲基]氧磷基]甲氧基]-乙基]腺嘌呤的合成成本大为下降。