使用固载液液萃取柱从中药材水提液中萃取有效成分的方法

摘要

本发明公开了一种使用固载液液萃取柱从中药材水提液中萃取有效成分的方法，包括如下步骤：将中药材水提液置于规格为10-5000g的固载液液萃取柱内，静置15-20min，用与水相不相溶的溶剂进行洗脱，洗脱液的流速为10-400mL/min，收集洗脱液，减压浓缩为固体粉末。本发明的特点在于：1、萃取操作简单，萃取次数由液液萃取的3-4次降为1次；2、溶剂使用量降低10-40％；3、处理时间由原来的1-2h降为0.5-1h；4、有效成分回收率保持不变或略有增加。5、固载液液萃取柱填料采用硅藻土，通过固载液液萃取方法替代传统液液萃取进行萃取液的提纯，有效的避免了乳化现象。

说明书

技术领域

本发明涉及从中药材水提液中萃取有效成分的方法。

背景技术

天然产物中有效成分的提取通常是以水回流的提取液用有机溶剂进行液液萃取，以除去多糖、鞣质等干扰物，液液萃取的方法虽然可以达到提纯的目的，但操作复杂，易乳化，重现性不高，回收率低，溶剂使用量大。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种通用的操作简单、重现性好，溶剂使用量少的使用固载液液萃取柱从中药材水提液中萃取有效成分的方法。

本发明的技术方案概述如下：

使用固载液液萃取柱从中药材水提液中萃取有效成分的方法，包括如下步骤：将中药材水提液置于规格为10-5000g的固载液液萃取柱内，静置15-20min，用与水相不相溶的溶剂进行洗脱，洗脱液的流速为10-400mL/min，收集洗脱液，减压浓缩为固体粉末。

中药材水提液为藿香水提液、剑叶淫羊藿水提液或五味子水提液。

固载液液萃取柱的规格为10-5000kg。

与水相不相溶的溶剂优选：三氯甲烷、二氯甲烷、石油醚至少一种。

洗脱液的流速为优选：10-400mL/min。

本发明的特点在于：1、萃取操作简单，萃取次数由液液萃取的3-4次降为1次；2、溶剂使用量降低10-40％；3、处理时间由原来的1-2h降为0.5-1h；4、有效成分回收率保持不变或略有增加。5、固载液液萃取柱填料采用硅藻土，通过固载液液萃取方法替代传统液液萃取进行萃取液的提纯，有效的避免了乳化现象。

附图说明

图1用本发明的方法从藿香水提液中萃取厚朴酚及和厚朴酚的色谱图；

图2用本发明的方法从剑叶淫羊藿水提液中萃取淫羊藿苷的色谱图；

图3用本发明的方法从五味子水提液中萃取戈米辛Q和戈米辛H的色谱图。

具体实施方式

固载液液萃取柱内的填料为硅藻土，硅藻土具有吸水性和多孔性，样品水溶液在其多孔表面快速均匀分散，然后用另一种与水相不相溶的溶剂在平衡中进行淋洗(洗脱)，将有效成分从水溶液中萃取出来，达到富集、去干扰的目的。通过硅藻土的分散作用，使水相提取液在硅藻土表面形成一层水相的薄膜，大大提高了有机萃取溶剂与水相的接触和交换面积。同时这种萃取方式还可以避免由于机械震荡导致在有机萃取溶剂和水相提取液之间形成的乳化层。本发明的方法还可以通过选择性吸附，进一步去除某些杂质，并且同时过滤掉一些水相提取液中带来的或者在两相接触表面所形成的颗粒物或胶状物。

本发明采用的固载液液萃取柱品牌为Cleanert^R SLE，购于博纳艾杰尔科技有限公司。

下面通过具体实施例对本发明作进一步的说明。

实施例1

使用固载液液萃取柱从中药材水提液中萃取有效成分的方法，包括如下步骤：

取藿香水提液500mL，加入浓盐酸使体积浓度为0.04％，置于规格为800g/1500mL的固载液液萃取柱内，静置15min，用1.2L三氯甲烷以100mL/min的流速洗脱，收集洗脱液，35℃下减压浓缩为固体粉末。

取固体粉末3mg，用甲醇溶解，过滤，取续滤液按药典方法进HPLC检测；

经检测，以27g藿香药材计，藿香水提液中的厚朴酚及和厚朴酚含量分别为0.453g和0.585g，以藿香水提液中厚朴酚及和厚朴酚的含量为0.730mg/mL和0.975mg/mL计算其回收率分别为80.6％和83.3％；使用洗脱液1.2L。从藿香水提液中萃取厚朴酚及和厚朴酚的色谱图见图1。保留时间14.655min的峰为和厚朴酚；保留时间24.574min为厚朴酚的峰。

对比例：

使用液液萃取法从中药材水提液中萃取有效成分的方法，包括如下步骤：

取藿香水提液500mL，加入浓盐酸使体积浓度为0.04％，然后加入500mL三氯甲烷，振摇5min，静置15min，取出上层，再次加入500mL三氯甲烷，重复萃取3次，合并萃取液，加入5g无水氯化钙，静置10min，过滤，滤液在35℃下减压浓缩为固体粉末。

取固体粉末3mg，用甲醇溶解，过滤，取续滤液按药典方法进HPLC检测；

经检测，用与固载液液萃取相同的方式计算，藿香水提液中厚朴酚及和厚朴酚的含量为0.727mg/mL和0.964mg/mL计算其回收率分别为80.2％和82.4％；使用洗脱液1.5L.

实施例2

使用固载液液萃取柱从中药材水提液中萃取有效成分的方法，包括如下步骤：

取剑叶淫羊藿水提液浓缩的浸膏2.0g，加入25mL水超声20min，置于规格为10g/100mL的固载液液萃取柱内，静置20min，用45mL体积比为2:8的二氯甲烷与石油醚组成的混合溶液以10mL/min的流速洗脱，收集洗脱液，35℃下减压浓缩为固体粉末。

经检测，以9g剑叶淫羊藿药材计，以HPLC检测计算，得含淫羊藿苷25％的固体1.6g，提取净化效果良好。从剑叶淫羊藿水提液中萃取淫羊藿苷的色谱图见图2；保留时间11.174min为淫羊藿苷。

实施例3

使用固载液液萃取柱从中药材水提液中萃取有效成分的方法，包括如下步骤：

取4.2L五味子水提液加入1L乙腈和5mL甲酸，加水至10L，混匀，置于规格为5kg/10L的固载液液萃取柱中，静置20min，用4L体积浓度为0.01％三乙胺的三氯甲烷溶液，以400mL/min的流速洗脱，收集洗脱液，向洗脱液中加入无水氯化钙50g，搅拌后过滤，滤纸用100mL体积浓度为0.01％三乙胺的三氯甲烷溶液冲洗，合并；35℃减压浓缩为固体粉末。

4.2L五味子水提液折合2.3kg五味子药材，以HPLC检测计算，浓缩后的固体粉末中含戈米辛Q和戈米辛H分别为17％和18.3％的固体38.4g。从五味子水提液中萃取戈米辛Q和戈米辛H的色谱图见图3，图中保留时间为12.269min为戈米辛Q；14.401min为戈米辛H。

上述各实施例是为了使本领域的技术人员能够理解本发明，但本发明不作任何限制。与水相不相溶的溶剂还可以选择乙醚、甲基叔丁基醚、石油醚、正己烷、辛烷、乙酸乙酯、丁醇、戊醇、己醇和辛醇至少一种。