使用血液样本的呼吸道传染病的诊断

摘要

本发明提供检测伴有细菌感染的呼吸道传染病的方法、选择进行抗生素给药的呼吸道传染病患者的方法、决定正在进行抗生素给药的呼吸道传染病患者的抗生素的给药结束时机的方法，所述方法的特征在于：可以适当选择应该进行抗生素给药的呼吸道传染病患者、并使抗生素的给药期间合理化，可以治疗伴有细菌感染的呼吸道传染病，并以血中的sCD14-ST的测定值为指标。

说明书

技术领域

本发明涉及检测伴有细菌感染的呼吸道传染病的方法、选择进行抗生素 给药的呼吸道传染病患者的方法、决定正在进行抗生素给药的呼吸道传染病 患者的抗生素的给药结束时机的方法。另外，本发明还涉及治疗伴有细菌感 染的呼吸道传染病的方法。

背景技术

呼吸道传染病是在临床现场频繁遭遇的疾病，主要存在由病毒感染引起 的呼吸道传染病、伴有细菌感染的呼吸道传染病。对于病毒性的呼吸道传染 病，抗生素是无效的。进行抗生素给药时，其原则是：鉴定病原菌，并根据 其药物敏感性等选择抗生素。但是，通过血液培养或喀痰检查来探索病原菌 要花费时间，所以实际上，基本是在病原体确定之前就开始使用抗生素进行 治疗。另外，血液培养或喀痰检查的细菌的检测灵敏度未必就高，所以即使 是阴性，也不能否定是细菌感染。因此，在疑似细菌感染的呼吸道传染病患 者中，不管怎样都使用抗生素，就连本来不需要抗生素的患者也给予抗生素， 这成为耐药菌増加的一个原因（非专利文献1）。

为了抗生素的合理使用，需要在临床现场可以快速且正确地诊断呼吸道 传染病中是否存在细菌感染。作为这样的诊断标记物之一，有人在研究降钙 素原的有效性。有报道称：在下呼吸道传染病（lower respiratory tract infection） 和肺炎中，以血中降钙素原浓度为指标进行抗生素治疗时，可以减少抗生素 的使用（非专利文献2、非专利文献3）。

降钙素原还被用作败血症的诊断标记物，作为血中浓度为0.5ng／mL以 上时诊断为败血症、血中浓度为2.0ng／mL以上时诊断为重度败血症的指标。 另一方面，关于下呼吸道传染病和肺炎中的血中降钙素原浓度，需要检测其 在0.1～0.5ng／mL的范围的変化，所以存在着需要采用高灵敏度的测定的制 约。另外，还有报道称：由于降钙素原在血中稳定存在，所以就连治疗成功 时，其也是相对地慢慢减少（专利文献1）。血中半衰期长时，认为难以检 测浓度変化。

作为比降钙素原优异的新的败血症标记物，有人在研究sCD14-ST（可 溶性CD14抗原亚型；别名为普莱晒谱星（presepsin））的有效性。据报道， 即使与难以和败血症进行判别、且显示出全身性炎症反应（SIRS）的患者相 比较，sCD14-ST在败血症患者的血中也显示出高值，认为sCD14-ST作为 败血症的诊断标记物是有效的（非专利文献4、专利文献2）。

另外，据报道，sCD14-ST是在吞噬细胞贪食外来微生物或异物并进行 消化的过程中产生的，在关节炎等发生局部性自身免疫反应或感染所伴随的 贪食的疾病中，可以检测到关节液中的sCD14-ST浓度上升（专利文献3）。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：国际公开第2008／104321号

专利文献2：国际公开第2005／108429号

专利文献3：国际公开第2009／142303号

非专利文献

非专利文献1：Ball等人，Journal of Antimicrobial Chemotherapy49： 31-40，2002年.

非专利文献2：Christ-Crain等人，The Lancet363：600-607，2004年.

非专利文献3：Christ-Crain等人，Am J Respire CritCare Med174：84-93， 2006年.

非专利文献4：Yaegashi等人，Journal of Infection and Chemotherapy11： 234-238，2005年．

发明内容

发明所要解决的课题

本发明的课题在于：提供一种适当选择应该进行抗生素给药的呼吸道传 染病患者、并使抗生素的给药期间合理化的方法。即，本发明的目的在于： 解决呼吸道传染病中的抗生素的合理使用的课题。具体而言，本发明提供： 检测伴有细菌感染的呼吸道传染病的方法、选择进行抗生素给药的呼吸道传 染病患者的方法、决定正在进行抗生素给药的呼吸道传染病患者的抗生素的 给药结束时机的方法。因此，要求提供一种用于适当选择伴有细菌感染的呼 吸道传染病的新的标记物。另外，寻求一种随着呼吸道中的细菌感染的缩小、 消失，浓度迅速降低的敏锐的标记物。而且，本发明还提供一种治疗伴有细 菌感染的呼吸道传染病的方法。

解决课题的方法

本发明人发现：通过以血中的sCD14-ST的测定值为指标，可以适当选 择应该进行抗生素给药的呼吸道传染病患者，还可以使抗生素的给药期间合 理化，从而完成了本发明。

本发明的更详细说明如下。

本发明提供：下述的检测伴有细菌感染的呼吸道传染病的方法。

（1-1）一种伴有细菌感染的呼吸道传染病的检测方法，其特征在于，其 测定来自受检者的血液样本中的sCD14-ST。

（1-2）一种伴有细菌感染的呼吸道传染病的检测方法，其特征在于，其 包括下述工序：

1）测定来自受检者的血液样本中的sCD14-ST的工序；以及

2）以样本中的sCD14-ST的测定值为指标，判定受检者是否是伴有细菌 感染的呼吸道传染病的工序。

（1-3）一种伴有细菌感染的呼吸道传染病的检测方法，其特征在于，其 包括下述工序：

1）测定来自受检者的血液样本中的sCD14-ST的工序；

2）将样本中的sCD14-ST测定值与正常值进行比较的工序；以及

3）判定样本的测定值是否是高于正常值的值的工序。

（1-4）上述（1-3）所述的方法，其特征在于，其采用健康人的血液样 本中的sCD14-ST测定值的平均值+2SD作为所述正常值。

（1-5）一种伴有细菌感染的呼吸道传染病的检测方法，其特征在于，其 包括下述工序：

1）测定来自受检者的血液样本中的sCD14-ST的工序。

（1-6）上述（1-5）所述的检测方法，其特征在于，其进一步包括下述 工序：

2）将所述血液样本中的sCD14-ST的测定值与正常值进行比较的工序。

（1-7）上述（1-6）所述的检测方法，其特征在于，其进一步包括下述 工序：

3）判定所述测定值是否是高于正常值的值的工序。

（1-8）上述（1-1）～（1-7）中任一项所述的方法，其中，所述伴有细 菌感染的呼吸道传染病是下呼吸道传染病或肺炎。

（1-9）上述（1-1）～（1-8）中任一项所述的方法，其中，其可以进行 与病毒感染引起的呼吸道传染病的鉴别诊断。

（1-10）上述（1-1）～（1-9）中任一项所述的方法，其特征在于，除 了测定来自受检者的血液样本中的sCD14-ST，还进行至少一项病原微生物 检查。

（1-11）上述（1-10）所述的方法，其中，所述病原微生物检查是选自 由通过染色进行的涂抹镜检检查、流感病毒、腺病毒、军团菌、衣原体、支 原体、曲霉菌、念珠菌、隐球菌、巨细胞病毒或肺炎球菌的抗原检查、以及 血液、喀痰或肺胞清洗液的培养检查所组成的组中的至少一项。

（1-12）伴有细菌感染的呼吸道传染病标记物，其特征在于，其包含 sCD14-ST。

（1-13）上述（1-12）所述的标记物，其中，其进一步包含：选自由TNF-α、 乳酸脱氢酶、唾液酸、IL-1β、IL-6和IL-10组成的炎症标记物、活化部分 促凝血酶原激酶时间、血小板数目、血纤蛋白原、DIC诊断基准、蛋白C、 D-二聚体、凝血酶·抗凝血酶III复合体和凝血酶原片段F1+2组成的血栓止 血相关标记物、降钙素原（PCT）、C反应性蛋白（CRP）、血中尿素氮、 白细胞数目、内毒素、肾上腺髓质素、肾上腺髓质素前体、MR-proADM、B 型钠利尿肽、在髓样细胞-1上表达的触发受体和HMGB1组成的传染病标记 物、皮质醇与和肽素组成的应激标记物、以及KL-6、SP-A、SP-D和MCP-1 组成的间质性肺炎标记物所组成的组中的至少一种。

（1-14）一种伴有细菌感染的呼吸道传染病的检测方法，其特征在于， 其测定来自受检者的血液样本中的sCD14-ST和至少一种sCD14-ST以外的 生物标记物。

（1-15）上述（1-14）所述的方法，其中，sCD14-ST以外的生物标记 物是上述（1-13）中所述的标记物中的至少一种。

本发明提供：下述的选择进行抗生素给药的呼吸道传染病患者的方法。

（2-1）一种选择进行抗生素给药的呼吸道传染病患者的方法，其特征在 于，其测定来自患者的血液样本中的sCD14-ST。

（2-2）一种选择进行抗生素给药的呼吸道传染病患者的方法，其特征在 于，其包括下述工序：

1）测定来自患者的血液样本中的sCD14-ST的工序；以及

2）以样本中的sCD14-ST的测定值为指标，判定患者是否是伴有细菌感 染的呼吸道传染病的工序。

（2-3）一种选择进行抗生素给药的呼吸道传染病患者的方法，其特征在 于，其包括下述工序：

1）测定来自患者的血液样本中的sCD14-ST的工序；

2）将样本中的sCD14-ST测定值与正常值进行比较的工序；以及

3）判定样本的测定值是否是高于正常值的值的工序。

（2-4）上述（2-3）所述的方法，其特征在于，其采用健康人的血液样 本中的sCD14-ST测定值的平均值+2SD作为所述正常值。

（2-5）上述（2-1）～（2-4）中任一项所述的方法，其中，所述呼吸道 传染病是下呼吸道传染病或肺炎。

本发明提供：下述的决定正在进行抗生素给药的呼吸道传染病患者的抗 生素的给药结束时机的方法。

（3-1）一种决定正在进行抗生素给药的呼吸道传染病患者的抗生素的给 药结束时机的方法，其特征在于，其以来自患者的血液样本中的sCD14-ST 的测定值为指标。

（3-2）一种决定正在进行抗生素给药的呼吸道传染病患者的抗生素的给 药结束时机的方法，其特征在于，其包括下述工序：

1）测定来自患者的血液样本中的sCD14-ST的工序；

2）将样本中的sCD14-ST测定值与预先确定的基准值进行比较的工序； 以及

3）当样本的测定值低于预先确定的基准值时，决定结束抗生素给药的工 序。

（3-3）上述（3-2）所述的方法，其特征在于，其使用健康人的血液样 本中的sCD14-ST测定值的平均值+SD作为所述预先确定的基准值。

（3-4）一种从正在进行抗生素给药的呼吸道传染病患者中选择结束抗生 素给药的患者的方法，其特征在于，其以来自患者的血液样本中的sCD14-ST 的测定值为指标。

（3-5）一种从正在进行抗生素给药的呼吸道传染病患者中选择结束抗生 素给药的患者的方法，其特征在于，其包括下述工序：

1）测定来自患者的血液样本中的sCD14-ST的工序；

2）将样本中的sCD14-ST测定值与预先确定的基准值进行比较的工序； 以及

3）当样本的测定值低于预先确定的基准值时，决定结束抗生素给药的工 序。

（3-6）上述（3-5）所述的方法，其特征在于，其使用健康人的血液样 本中的sCD14-ST测定值的平均值+SD作为所述预先确定的基准值。

（3-7）上述（3-1）～（3-6）中任一项所述的方法，其中，所述呼吸道 传染病是下呼吸道传染病或肺炎。

本发明提供：下述的伴有细菌感染的呼吸道传染病的治疗方法。

（4-1）一种治疗伴有细菌感染的呼吸道传染病的方法，其特征在于，其 包括下述工序：

1）测定来自患者的血液样本中的sCD14-ST的工序；

2）以样本中的sCD14-ST的测定值为指标，选择进行抗生素给药的患者 的工序；以及

3）对所选择的患者进行抗生素给药的工序。

（4-2）上述（4-1）所述的方法，其特征在于，所述以样本中的sCD14-ST 的测定值为指标选择进行抗生素给药的患者的工序，进一步包括下述工序：

1）将样本中的sCD14-ST测定值与正常值进行比较的工序；以及

2）当样本的测定值是高于正常值的值时，选择患者作为抗生素给药对象 的工序。

（4-3）上述（4-2）所述的方法，其特征在于，其使用健康人的血液样 本中的sCD14-ST测定值的平均值+2SD作为正常值。

（4-4）上述（4-1）～（4-3）中任一项所述的方法，其特征在于，其进 一步包括下述工序：

1）随时间测定来自正在进行抗生素给药的患者的血液样本中的 sCD14-ST的工序；

2）将样本中的sCD14-ST测定值与预先确定的基准值进行比较的工序； 以及

3）当样本的测定值低于预先确定的基准值时，决定抗生素的给药结束的 工序。

（4-5）上述（4-4）所述的方法，其特征在于，其使用健康人的血液样 本中的sCD14-ST测定值的平均值+SD作为预先确定的基准值。

（4-6）上述（4-1）～（4-5）中任一项所述的方法，其中，所述伴有细 菌感染的呼吸道传染病是下呼吸道传染病或肺炎。

本发明提供：下述的伴有细菌感染的呼吸道传染病治疗用组合物。

（5-1）一种作为有效成分含有抗生素的伴有细菌感染的呼吸道传染病治 疗用组合物，其特征在于，该组合物被用于：当测定来自疑似伴有细菌感染 的呼吸道传染病的患者的血液样本中的sCD14-ST，将测定值与正常值进行 比较，并且样本的测定值是高于正常值的值时，对所述患者进行给药。

（5-2）上述（5-1）所述的伴有细菌感染的呼吸道传染病治疗用组合物， 其特征在于，其使用健康人的血液样本中的sCD14-ST测定值的平均值+2SD 作为正常值。

（5-3）一种作为有效成分含有抗生素的伴有细菌感染的呼吸道传染病治 疗用组合物，其特征在于，该组合物被用于：当测定来自疑似伴有细菌感染 的呼吸道传染病的患者的血液样本中的sCD14-ST，将测定值与正常值进行 比较，并且样本的测定值是高于正常值的值时，对所述患者进行给药，并且， 在给药期间随时间测定血液样本中的sCD14-ST，当测定值低于预先确定的 基准值时，结束给药。

（5-4）上述（5-3）所述的伴有细菌感染的呼吸道传染病治疗用组合物， 其特征在于，其使用健康人的血液样本中的sCD14-ST测定值的平均值+2SD 作为正常值，并且使用健康人的血液样本中的sCD14-ST测定值的平均值+SD 作为预先确定的基准值。

（5-5）上述（5-1）～（5-4）中任一项所述的伴有细菌感染的呼吸道传 染病治疗用组合物，其中，伴有细菌感染的呼吸道传染病是下呼吸道传染病 或肺炎。

（6）上述（1-1）～（5-5）中任一项所述的方法、标记物或组合物，其 中，在血液样本中的sCD-14浓度的测定中，伴有细菌感染的肺炎患者的平 均值超过健康人的平均值，而病毒性肺炎患者的平均值低于健康人的平均值。

（7）上述（1-1）～（6）中任一项所述的方法、标记物或组合物，其中， 血液样本中的sCD-14的半衰期低于1小时。

发明效果

根据本发明，通过以血中的sCD14-ST的测定值为指标，可以适当选择 应该进行抗生素给药的呼吸道传染病患者，还可以使抗生素的给药期间合理 化。抗生素是应该对伴有细菌感染的疾病进行给药的药物。通过测定血中的 sCD14-ST，可以以优异的特异性和／或灵敏度检测出伴有细菌感染的呼吸道 传染病患者。另外，通过以血中的sCD14-ST测定值为指标，决定抗生素给 药结束的时机，可以缩短抗生素给药期间。以血中的sCD14-ST测定值为指 标的呼吸道传染病中的抗生素的合理使用，不会损及安全性·有效性，在可 以抑制多剂耐药菌的出现、缩短治疗期间、减少抗生素的使用量、降低医疗 成本方面是有效的。

附图的简单说明

图1是显示实施例1中制作的血中sCD14-ST测定系统的标准曲线的图。

图2是显示实施例2中测定的肺炎患者的血中sCD14-ST浓度分布的图。 横轴表示肺炎诊断后～样本采集日的天数，纵轴表示血中sCD14-ST浓度。 图中，实线显示健康人平均值（577pg／mL），虚线显示健康人平均值+2SD （895pg／mL）。

图3是显示实施例5中测定的伴有细菌感染的肺炎患者和病毒性肺炎患 者的血中sCD14-ST浓度分布的图。纵轴表示血中sCD14-ST浓度。

图4是显示实施例6中测定的静脉内给予sCD14-ST时血中sCD14-ST 的浓度变化的图。横轴表示给药后的时间，纵轴表示血中sCD14-ST浓度。

具体实施方式

以下，对本发明进行详细说明。

1．sCD14-ST

sCD14-ST（别名：普莱晒谱星（presepsin））是可溶性CD14的分子种 之一，其特征在于，在非还原条件下，在SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠聚丙 烯酰胺凝胶电泳）中泳动达到分子量13±2kDa，其保持着CD14的N端部。 另外，与全长CD14相比，sCD14-ST具有C端侧已大量缺失的氨基酸序列， 两者在立体结构方面不同，所以显示出不同的免疫原性。因此，可以根据所 结合的抗体来区别两者，sCD14-ST具有下述性质：与以肽为抗原制作的抗 体特异性结合，所述的肽由序列号2中记载的16个氨基酸残基组成。而且， 关于sCD14-ST，可以补充下述特征中的任意一个以上的特征：与由序列号3 记载的氨基酸序列的第17位～第26位组成的肽所结合的抗体特异性结合、 不与3C10抗体结合、不与MEM-18抗体结合、不具有LPS结合能力、可从 人血液中获得。sCD14-ST具有下述特征：作为氨基酸序列，在N末端序列 中具有序列号1的氨基酸序列，更详细而言，可以根据下述特征来特定：即 N末端是序列号3记载的氨基酸序列的1位、C末端是序列号3记载的氨基 酸序列的59～90位中的任意一个。详细而言，sCD14-ST公开在国际公开第 2005／108429号中。在本说明书中，只要没有特别说明，则sCD14-ST是指 人sCD14-ST。

血液样本中的sCD14-ST的测定可以利用公知的方法来进行。例如，可 以使用国际公开第2004／044005号或国际公开第2005／108429号中公开的 特异性检测sCD14-ST的免疫测定系统。具体而言，优选为以由序列号2记 载的16个氨基酸残基组成的肽为抗原制作的抗体和由序列号3记载的氨基酸 序列的17位～26位组成的肽所结合的抗体或与该抗体进行竞争的抗体 （F1106-13-3抗体或F1031-8-3抗体）的组合所形成的夹层免疫测定系统。

血液样本中的sCD14-ST的测定值，通常可以以血中sCD14-ST浓度的 形式来显示。sCD14-ST的测定值可以采用定量值、半定量值、或定性值中 的任一种。采用半定量值时，可以按照0、1、2、3或－、+、++、+++等阶 段来表示sCD14-ST浓度。该阶段与定量的sCD14-ST浓度相关，所以 sCD14-ST浓度是否为预先确定的基准值以上，这可以根据半定量的阶段表 示与定量的sCD14-ST浓度的相关关系来判断。或者，采用半定量时，可以 将低于基准值设定为0或－的阶段。采用定性值时，可以如下设定：低于基 准值为阴性、基准值以上为阳性。

作为血液样本，没有特别限定，可以使用全血、血浆、血清中的任意一 种。另外，血液样本还可以是采血后加入EDTA、肝素、枸橼酸等抗凝剂而 得到的样本。

2.伴有细菌感染的呼吸道传染病的检测方法

本发明提供伴有细菌感染的呼吸道传染病的检测方法，其特征在于，其 测定来自受检者的血液样本中的sCD14-ST。

伴有细菌感染的呼吸道传染病的优选例子是下呼吸道传染病和肺炎。

下呼吸道传染病包括急性下呼吸道传染病和慢性下呼吸道传染病。急性 下呼吸道传染病包括：急性气管炎、急性支气管炎、急性细支气管炎，大多 是通过上呼吸道的病毒感染波及到下呼吸道而发病，但有一部分是由细菌引 起的二次感染的继发。发现细菌二次感染的征兆时，适合抗生素给药。慢性 下呼吸道传染病是指，在支气管扩张症或慢性阻塞性肺病等中，在具有器质 性障碍的下呼吸道中细菌的持续感染成立的病态，存在持续感染和急性恶化。 发生下呼吸道的器质性障碍的疾病包括：支气管扩张症、慢性阻塞性肺病、 慢性支气管炎、弥漫性泛细支气管炎、陈旧性肺结核、尘肺、非结核性抗酸 菌症、变应性支气管肺曲霉菌病、肺纤维症、慢性支气管哮喘等。持续感染、 急性恶化均适合抗生素给药。

肺炎包括社区获得性肺炎、院内感染性肺炎。优选为社区获得性肺炎。

对受检者没有特别限定，根据临床所见疑似为呼吸道传染病者是优选的 对象。作为临床所见，可以列举：至少出现呼吸困难或咳嗽。除此以外，还 优选出现选自由喀痰、胸痛、喘鸣、胸部X线阴影、发热、白细胞数目所组 成的组中的至少一项临床所见者。

本发明的伴有细菌感染的呼吸道传染病的检测方法，其特征在于，其包 括下述工序：1）测定来自受检者的血液样本中的sCD14-ST的工序；以及2） 以样本中的sCD14-ST的测定值为指标，判定受检者是否是伴有细菌感染的 呼吸道传染病的工序。更具体而言，2）的工序可以包括下述工序：3）将样 本中的sCD14-ST测定值与正常值进行比较的工序、以及4）判定样本的测 定值是否是高于正常值的值的工序。

通过将样本中的sCD14-ST的测定值与预先确定的基准值进行比较，可 以判定受检者是否是伴有细菌感染的呼吸道传染病。作为本发明的伴有细菌 感染的呼吸道传染病的检测方法中使用的基准值，优选采用根据健康人的血 液样本中的sCD14-ST测定值设定的正常值。正常值可以采用健康人的血液 样本中的sCD14-ST测定结果的平均值或通过取得范围等标准化的值。来自 健康人的样本的测定值与测定系统的本底值几乎相等时，可以采用测定系统 中的本底值的平均值或通过设定范围等进行标准化的值。测定系统中的本底 值是指，向测定系统中添加缓冲液或分析溶液等而非样本时的测定值。作为 将来自受检者的样本的测定值标准化了的值，可以采用健康人的平均值 +0.5SD～+5SD（SD为标准偏差）、健康人测定值的5～95%、10～90%、15～ 85%或25～75%的值等。优选为健康人的平均值+SD、+2SD或+3SD。

另外，根据健康人的血液样本中的sCD14-ST的测定值来设定正常值时， 可以考虑预先测定的来自伴有细菌感染的呼吸道传染病患者的血液样本中的 sCD14-ST的测定值。此时，可以采用疾病检测的灵敏度和／或特异度达到 最优化的截断值作为正常值。例如是500pg／mL。

比较来自受检者的样本的测定值和正常值，当样本的测定值是高于正常 值的值时，可以判断为：该受检者罹患伴有细菌感染的呼吸道传染病的可能 性高、即阳性。另外，测定值越大，则可以判断为疾病的进行度和／或疾病 的重症度越高。

在不伴有细菌感染的病毒性呼吸道传染病中，血中几乎不会产生 sCD14-ST，所以通过测定血液样本中的sCD14-ST，可以将伴有细菌感染的 呼吸道传染病和病毒性呼吸道传染病鉴别开来。

另外，本发明的伴有细菌感染的呼吸道传染病的检测方法，除了测定来 自受检者的血液样本中的sCD14-ST，还可以进行至少一项病原微生物检查。 作为病原微生物检查，可以从涂抹镜检检查、抗原检查、培养检查等公知的 方法中适当选择使用。

另外，本发明的伴有细菌感染的呼吸道传染病的检测方法，除了测定来 自受检者的血液样本中的sCD14-ST，还可以测定至少一种的sCD14-ST以 外的生物标记物。作为sCD14-ST以外的生物标记物，可以从炎症标记物、 血栓止血相关标记物、传染病标记物、间质性肺炎标记物等中适当选择使用。 作为优选的例子，可以列举：降钙素原、C反应性蛋白（CRP）、KL-6等， 但并不限于这些。

本发明的伴有细菌感染的呼吸道传染病的检测方法，还可以说成是选择 进行抗生素给药的呼吸道传染病患者的方法。检测到伴有细菌感染的呼吸道 传染病的受检者，是罹患伴有细菌感染的呼吸道传染病的可能性高的患者， 成为抗生素给药的适宜对象。在由临床所见疑似为呼吸道传染病的患者中， 应该进行抗生素给药的患者是伴有细菌感染的呼吸道传染病患者。通过以血 液样本中的sCD14-ST的测定值为指标，可以检测是否存在伴有细菌感染的 呼吸道传染病，可以选择进行抗生素给药的呼吸道传染病患者。即，本发明 提供一种选择进行抗生素给药的呼吸道传染病患者的方法，其特征在于，其 测定来自患者的血液样本中的sCD14-ST。本发明的选择进行抗生素给药的 呼吸道传染病患者的方法，可以直接引用伴有细菌感染的呼吸道传染病的检 测方法中的方案。

3．决定正在进行抗生素给药的呼吸道传染病患者的抗生素的给药结束时 机的方法

本发明提供：一种决定正在进行抗生素给药的呼吸道传染病患者的抗生 素的给药结束时机的方法，其以来自患者的血液样本中的sCD14-ST的测定 值为指标。

作为本发明的决定抗生素给药结束时机的方法的对象的患者，只要是正 在进行抗生素给药的呼吸道传染病患者即可，没有特别限定，但在通过上述 2.所述的方法检测到伴有细菌感染的呼吸道传染病的受检者，作为进行抗生 素给药的呼吸道传染病患者而选择的患者成为优选的对象。

本发明的决定抗生素的给药结束时机的方法，其特征在于，其包括下述 工序：1）测定来自患者的血液样本中的sCD14-ST的工序；以及2）以样本 中的sCD14-ST的测定值为指标，决定抗生素的给药结束时机的工序。更具 体而言，2）的工序可以包括下述工序：3）将样本中的sCD14-ST测定值与 预先确定的基准值进行比较的工序、以及4）当样本的测定值低于预先确定 的基准值时，决定结束抗生素给药的工序。

本发明的决定抗生素的给药结束时机的方法，当测定来自患者的血液样 本中的sCD14-ST时，可以随时间进行测定。在伴有细菌感染的呼吸道传染 病中，通常在5天～14天左右的期间给予抗生素，但为了减轻患者的负担、 并且防止耐药菌的出现，优选可以确认感染的治愈或改善，马上结束给药。 通过随时间测定sCD14-ST，可以更准确地判断抗生素的给药结束时机。由 于血中sCD14-ST浓度在呼吸道中的细菌感染缩小、消失的同时迅速降低， 所以其作为治疗结束的判断指标是有效的。作为测定的时期，可以适当设定 为抗生素给药开始后的每1天、每2天、或者第3天/第5天/第7天等。

由于以样本中的sCD14-ST的测定值作为患者是否存在细菌感染的指 标，所以当样本的测定值低于预先确定的基准值时，可以判定为感染治愈或 改善，可以决定抗生素的给药结束。作为本发明的决定抗生素的给药结束时 机的方法中使用的基准值，只要是可以确认抗生素奏效的值即可。例如，可 以设定在抗生素给药前～直至给药开始后24小时测定的sCD14-ST测定值的 1／2、1／5或1／10的值作为基准值。另外，可以采用所述2.的方案中说明 的、根据健康人的血液样本中的sCD14-ST测定值设定的正常值作为基准值。 例如是健康人的平均值+SD、+2SD或+3SD。当sCD14-ST的测定值在正常 值的范围内时，可以看作是感染的治愈或改善达到了与健康人同等的水平。 优选采用预先测定的健康人和伴有细菌感染的呼吸道传染病患者的血液样本 中的sCD14-ST的测定值，可以采用按照疾病检测的灵敏度和／或特异度达 到最优化来设定的截断值作为基准值。例如是500pg／mL。

本发明的决定抗生素的给药结束时机的方法，还可以说成是从正在进行 抗生素给药的呼吸道传染病患者中选择结束抗生素给药的患者的方法。通过 决定抗生素的给药结束时机，患者是作为抗生素的给药结束对象者，因此， 决定给药结束时机的方法和选择结束给药的患者的方法同义。即，本发明提 供一种从正在进行抗生素给药的呼吸道传染病患者中选择结束抗生素给药的 患者的方法，其以来自患者的血液样本中的sCD14-ST测定值为指标。本发 明的选择结束抗生素给药的患者的方法，可以直接引用决定抗生素的给药结 束时机的方法中的方案。

4．伴有细菌感染的呼吸道传染病的治疗方法

本发明提供一种伴有细菌感染的呼吸道传染病的治疗方法。本发明的治 疗方法，其特征在于，其以来自受检者的血液样本中的sCD14-ST的测定值 为指标，选择进行抗生素给药的呼吸道传染病患者。其是一种通过对所选择 的患者给予抗生素来治疗伴有细菌感染的呼吸道传染病的方法。具体而言， 根据所述2.的方案中说明的方法，选择进行抗生素给药的呼吸道传染病患者， 对所选择的患者给予抗生素。另外，根据所述3．的方案中说明的方法，通 过决定抗生素的给药结束时机，可以进行更高效的治疗。

另外，本发明提供一种伴有细菌感染的呼吸道传染病的治疗药（或治疗 用药物组合物），其特征在于，其根据基于上述治疗方法的用法来使用抗生 素。该治疗用组合物作为有效成分含有抗生素。除了包含有效量的抗生素外， 还可以包含制剂上可接受的任意的添加剂、载体。

本发明的所述2.～5.中记载的方案中使用的抗生素没有特别限定，优选 为至少具有下呼吸道传染病和／或肺炎的适应症的抗生素。作为其例子，可 以列举：青霉素系、青霉烯系、碳青霉烯系、头孢烯系、单菌霉素系、磷霉 素系、糖肽系、氨基酸糖苷系、大环内酯系、酮内酯系、林可霉素系、四环 素系、新喹诺酮系、磺胺系、恶唑烷酮系、链阳性菌素系等的抗生素，可以 从这些抗生素中适当选择一种或几种来使用。关于抗菌剂的选择，可以采用 日本呼吸器学会“成人市中肺炎診療ガイドライン（成人社区获得性肺炎诊 疗指南）”（明日の臨床，19卷1号，41-61页，2007年）等公知的方法。

下面，通过实施例来更具体地说明本发明，但本发明并不受这些实施例 的任何限定。

实施例

（实施例1）血中sCD14-ST测定系统的制作

（1－1）过氧化物酶标记抗体的制备

为了制作夹层ELISA系统，用过氧化物酶标记国际公开第2004／044005 号中记载的F1106-13-3抗体。首先，用赖氨酰肽链内切酶（和光纯药）切 断F1106-13-3抗体，制备F（ab’）2。即，用50mM的三(羟甲基)氨基甲烷 盐酸盐（Tris-HCl）（pH8.5）来透析F1106-13-3抗体，以抗体：赖氨酰肽 链内切酶=10：1（摩尔比）进行混合，在37℃下反应1小时。添加TLCK（甲 苯磺酰赖氨酰氯甲基酮）（シグマ）使其最终浓度达到30mM，停止反应。 接下来，为了除去Fc，将反应液添加到蛋白A柱（Prosep-A（产品名称）、 ミリポア公司）上，回收未吸附的组分。将已回收的未吸附组分浓缩，为了 分离所含的F（ab’）2和Fab，通过凝胶过滤（Superdex75（产品型号）、 GEヘルスケア公司）进行纯化。将得到的F（ab’）2浓缩，之后用10mM的 碳酸缓冲液（pH9.5）进行透析。

接下来，按照中根等人的方法（J．Histochem．Cytochem．，22，1084， 1974），将1mg的过氧化物酶（东洋纺）溶解在蒸馏水中，添加用蒸馏水溶 解的100mM的高碘酸，在25℃反应15分钟。反应结束后，添加1.5%的乙 二醇，在25℃反应20分钟，之后用1mM的醋酸缓冲液（pH4．4）进行透 析。第二天，向1mg的F1106-13-3F（ab’）2抗体中添加0.2M的碳酸缓冲 液（pH9.5），混合已活化的0.8mg的过氧化物酶，在25℃反应2小时。添 加4mg／mL的硼氢化钠，进一步在4℃反应2小时。用PBS（磷酸盐缓冲液） （pH7.4）透析反应液，得到过氧化物酶标记抗体。测定液量，由使用的抗体 量算出抗体浓度。

（1-2）夹层EIA系统的制作

使用D-PBS（杜氏磷酸盐缓冲液）（pH7.4）将国际公开第2004／044005 号中记载的S68-肽多克隆抗体稀释至5μg／mL，在酶标板（Maxisorp（产品 型号）、NUNC公司）的各孔中添加50μL。在4℃反应一夜，之后用离子交 换水清洗5次，向各孔中添加200μL含有0.1%的免疫检测稳定剂 （StabilGuard，商品名称）（SurModics，Inc公司）和0.1%的吐温20（Tween20） 的D-PBS，封闭。接下来，以含有1%的CD14吸收血清、0.1%的BSA（牛 血清白蛋白）的D-PBS（pH7.4）作为稀释液，制备0、0.015、0.031、0.063、 0.125、0.25、0.5ng／mL的sCD14-ST蛋白标准品稀释系列。sCD14-ST蛋白 标准品使用国际公开第2005／108429号中记载的rsCD14-ST。向每个孔中添 加50μL标准品稀释系列，使之在25℃反应1小时（第一反应）。反应结束 后，用含有0.05%吐温20（Tween20）的生理盐水清洗5次，向各孔中添加 50μL用含有2%大鼠血清、1%小鼠血清、0.1%吐温20（Tween20）的PBS （pH7.4）稀释至0.25μg／mL的用过氧化物酶标记的F1106-13-3F（ab’）2 抗体。在25℃下反应1小时（第二反应），之后同样清洗5次，向各孔中添 加50μL四甲基联苯胺溶液（TMB、BioFix公司），在室温反应20分钟，之 后使用50μL0.5M的硫酸溶液来停止反应。使用平板分光光度计（マルチス キャンJX（型号）、サーモエレクトロン公司）测定450／630nm的吸光度。 图1显示制作的标准曲线。

（实施例2）血中sCD14-ST的测定

使用实施例1中制作的夹层EIA系统，测定10例健康人（从ProMedDx 公司购入）和6例来自细菌感染的肺炎患者（社区获得性肺炎）（从 Bioreclamation公司购入）的血清（20倍稀释）。其结果，如表1所示，健 康人的血中sCD14-ST浓度的平均值为577pg／mL、标准偏差为159pg／mL。 肺炎患者中浓度为729～1067pg／mL。如图2所示，横轴表示从肺炎患者的 诊断日到样本采集日的天数，纵轴表示sCD14-ST浓度，进行作图时，在接 近诊断日的患者中显示出高值，越往后值越低。需要说明的是，推荐肺炎患 者在诊断后4小时以内开始抗生素给药。由上述结果可知：在存在细菌感染 的肺炎患者中，血中sCD14-ST浓度显示出高值，治疗带来的症状改善与血 中sCD14-ST浓度的降低相关。即，结果显示：通过以血中sCD14-ST浓度 为指标（例如，以健康人平均值+2SD作为截断值），可以检测出伴有细菌 感染的呼吸道传染病，可以选择进行抗生素给药的患者。另外，当血中 sCD14-ST浓度低于某基准值（例如健康人平均值+2SD，条件更严格时以健 康人平均值+SD作为截断值）时，可以作为抗生素给药结束的判断材料。

表1

（实施例3）以sCD14-ST为指标的进行抗生素给药的呼吸道传染病患 者的选择

将临床所见至少出现呼吸困难或咳嗽、且疑似呼吸道传染病的患者分为 以下两组：进行普通的抗生素治疗的对照组和以sCD14-ST为指标进行抗生 素治疗的sCD14-ST组。对照组根据通常医生的判断进行抗生素给药。 sCD14-ST组在进行医生的判断时，以血液样本中的sCD14-ST的测定结果 为参考。当sCD14-ST测定值是高于正常值的值时，推荐抗生素给药。当 sCD14-ST测定值在正常值以内时，不推荐抗生素给药。

对于两组的患者，评价参加试验的2、4、6或8周后的症状改善状況。 另外，评价到参加试验后2或4周为止是否给予抗生素。作为附加的信息， 对于两组的患者，根据X线阴影、血液检查、呼吸功能检查等，鉴定在呼吸 道传染病中是否符合肺炎、支气管炎、慢性阻塞性肺病的急性恶化、支气管 哮喘等中的任一种疾病。

伴随着临床所见的改善来评价症状改善。作为附加的评价项目，可以增 加患者的健康状态的自我评价（VAS、QOL问卷调查表等）、sCD14-ST 测定值。

作为结果，两组间在症状改善状況上没有确认到差别。另一方面， sCD14-ST组中抗生素的给药明显减少。另外，可以确认：在sCD14-ST组 中，呼吸道传染病中，在往往伴有细菌感染的疾病（例：肺炎）中抗生素给 药的比例高，在很少伴有细菌感染的疾病（例：支气管哮喘）中抗生素给药 的比例变少。

通过以sCD14-ST为指标，可以适当选择应该进行抗生素给药的呼吸道 传染病患者，不会损及抗生素治疗的安全性、有效性，可以减少抗生素的使 用（给药对象患者数、给药量、给药期间或处方数）。

（实施例4）以sCD14-ST为指标的肺炎患者的抗生素给药期间的最优 化

将根据临床所见诊断为肺炎、且作为抗生素给药的对象的患者分为以下 两组：进行通常的抗生素治疗的对照组和以sCD14-ST为指标进行抗生素治 疗的sCD14-ST组。对照组根据通常医生的判断结束抗生素给药。sCD14-ST 组在进行医生的判断时，以血液样本中的sCD14-ST的测定结果作为参考。 当sCD14-ST测定值在正常值以内时，推荐结束抗生素给药。优选随时间（例： 抗生素给药开始后每1天）测定sCD14-ST。

对于两组的患者，评价到抗生素给药开始后2、4、6或8周为止的症状 改善状況。另外，评价直至抗生素给药结束的期间。作为附加信息，对于两 组的患者，判定肺炎的重症度。

伴随着临床所见的改善来评价症状改善。特别是，优选确认肺炎的治愈。 作为附加的评价项目，可以增加患者的健康状态的自我评价（VAS、QOL问 卷调查表等）、sCD14-ST测定值。

作为结果，两组间在症状改善状況上没有确认到差别。另一方面， sCD14-ST组中抗生素的给药期间明显减少。

通过以sCD14-ST为指标，可以适当决定结束抗生素给药的时机，不会 损及抗生素治疗的安全性、有效性，可以缩短抗生素的给药期间。

（实施例5）血中sCD14-ST的测定

再次研究实施例1中制作的夹层EIA系统，将实施例1中记载的反应时 间变更为第一反应25℃1小时、第2反应25℃2小时。使用本系统，测定9 例伴有细菌感染的肺炎患者和2例病毒性肺炎患者（从Bioreclamation公司 购入）的血清（20倍稀释）。其结果，在伴有细菌感染的肺炎患者中，血中 sCD14-ST浓度为205～1680pg／mL（中央值为612pg／mL），在病毒性肺 炎患者中，血中sCD14-ST浓度为149～379pg／mL（中央值为264pg／mL）。 病毒性肺炎患者的血中sCD14-ST浓度在健康人平均值以下，明显低于需要 抗生素给药的伴有细菌感染的肺炎患者的血中sCD14-ST浓度（图3）。通 过测定血液样本中的sCD14-ST，可以将伴有细菌感染的呼吸道传染病和病 毒性呼吸道传染病鉴别开来。

（实施例6）血中sCD14-ST的半衰期

确认sCD14-ST从血中消除的速度。对狗（雄性比格犬，7或8月龄，3 只，北山ラベス株式会社）以10μg／kg的用量静脉内给予重组体sCD14-ST （国际公开第2005／108429号中记载的rsCD14-ST），到给药后24小时为 止随时间采集血液。使用实施例1中记载的夹层EIA系统，测定血中的 sCD14-ST浓度。

在给药前、给药5分钟后、10分钟后、30分钟后、60分钟后、90分钟 后、120分钟后、4小时后、以及24小时后采集血液，以进行了离心分离的 血浆作为测定样品。

血中sCD14-ST浓度的变化见图4。作为sCD14-ST的血中半衰期，在 给药1小时以内为25分钟，其后是58分钟，显示出两相性。另外，血中 sCD14-ST浓度在给药120分钟后降低至给药5分钟后的约6%，24小时后完 全从血中消除。由该结果可知：sCD14-ST从血中的消除非常迅速，当呼吸 道中的细菌感染缩小、消失时，血中sCD14-ST浓度也迅速降低，可以适用 于抗生素治疗结束的判断等。