Выявление РНК вируса ленге в различных биологических жидкостях

摘要

Для лабораторного подтверждения диагноза ?лихорадка денге? (ЛД) используют определение NS-1-антигена методом иммунохроматографии, РНК вируса денге (DENV) методом полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) и детекцию специфических IgM. Первые 2 метода применяют для ранней диагностики ЛД, определение антител - для ретроспективной диагностики или в случае отрицательного результата прямых методов. Для достижения наибольшей диагностической эффективности ОТ-ПЦР необходимо правильно выбрать исследуемый клинический материал на разных этапах заболевания. Цель исследования - определение РН К DENV в различных биологических жидкостях в остром периоде болезни и в период реконвалесценции. Материал и методы. Медицинские карты пациентов, госпитализированных и наблюдавшихся амбула-торно в ГБУЗ ИКБ №1 ДЗМ. Критерии отбора карт - лабораторно подтвержденные случаи ЛД с выполненной ОТ-ПЦР в пробах плазмы крови, мочи, слюны. Исследование проведено в 2 этапа: на I этапе проанализировано 182 медицинские карты и 546 образцов крови, слюны и мочи, взятых с 1-го по 13-й день заболевания. Во II этап включено 10 карт пациентов, перенесших ЛД, с исследованием образцов крови, мочи, слюны, собранных на 3-4,5-7,8-10-й неделях заболевания. Для количественных данных при нормальном распределении проводили расчет среднего арифметического и среднеквадратичного отклонения, при ненормальном - медианы с указанием 1-го и 3-го квартилей. Для анализа непараметрических данных определяли экстенсивный показатель с расчетом 95 доверительного интервала (ДИ), для сравнения значимости различий использован критерий chi~2 Пирсона и точный критерий Фишера. Различия считали статистически значимыми при р< 0,05. Результаты и обсуждение. В остром периоде болезни РНК DENV обнаружена в 97,8 образцов плазмы крови, в 90,7 проб мочи и 80,2 - слюны. В 4 случаях РНК DENV была выявлена только в моче при отрицательном результате исследования плазмы крови. В периоде реконвалесценции на 3-4-й неделе РНК DENV была определена в моче у всех 8 обследованных пациентов. Предельные сроки обнаружения РНК вируса денге в крови и слюне составили 22 и 21 день соответственно. Максимальный срок обнаружения РНК DENV в моче - 66 сут от начала болезни. Заключение. Одновременное определение РНК DENV в пробах крови и мочи увеличивает диагностическую значимость ПЦР в диагностике ЛД, в то время как тестирование образцов слюны для выявления РНК DENV имело меньшую информативную ценность. В связи с этим поиск РНК DENV в пробах мочи в периоде реконвалесценции может быть использован как дополнительный прямой метод диагностики.