Цель исследования: разработка тест-системы для ПЦР-диагностики Орisthorchis felineus в фекалиях человека. На основании баз данных, доступных в Интернете, разработаны олигонуклеотидные праймеры, а также ТаqМап-пробы (зонды с флюоресцентной меткой), специфичные для генома О. felineus для проведения ПЦР с детекцией результата в режиме реального времени. Подобраны условия ПЦР, включая температурные режимы, количество компонентов амплификации и т. д. Проведены испытания тест-систем на образцах фекалий 254 человек, отобранных случайным образом, образцах фекалий 100 человек с подтвержденным диагнозом описторхоза, а также на образцах фекалий 100 здоровых людей. Установлено, что достоверность работы тест-системы составляет около 98%. Чувствительность тест-систем для определения Орisthorchis felineus составляет около 10~3 копий целевой ДНК в 1 мл. Проведены сравнительные исследования эффективности различных методов (копроовоскопия, ИФА, ПЦР) выявления описторхозной инвазии.
展开▼
