МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ГЛУТАТИОНПЕРОКСИДАЗЫ МОЗГА МЫШЕЙ И ЕЕ ПРИМЕНЕНИЕ В ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОМ ЭКСПЕРИМЕНТЕ

摘要

Метод определения активности глутатионпероксидазы, основанный на использовании Н,02, адаптирован для работы с гомогенатами головного мозга лабораторных мышей. При фиксированной концентрации восстановленного глутатиона, равной 0.55 мМ, концентрация Н_2O_2 равная 0.192 мМ, оказалась насыщающей для глутатионпероксидазы мозга мышей и выбрана как оптимальная для определения активности фермента в трис-HCl-буфере с NaN , и ЭДТА рН 8.5 при температуре инкубации 37°C. Разведение гомогенатов реакционной смесью — 10.4 раза. При использовании 13% гомогената длительность инкубации составляет не более 60 с. Применение данного метода в разведывательном эксперименте показало, что активность глутатионпероксидазы в мозге мышей, получающих производное аминоэтанола на фоне длительной интермиттирующей нормобарической гипоксии, повышена, что может свидетельствовать об активации глутатионпероксидазы.