Влияние биогенных и абиогенных дисульфидов на жизнеспособность клеток эндотелия пупочной вены человека в культуре исследовали, применяя три метода — включение в клетки нейтрального красного (НК), определение количества АТФ в клетках и варианты метода Мосмана, суть которыхсостоит в восстановлении клетками солей тетразолия — МТТ и MTS (Mosmann, 1983). В качестве абиогенного дисульфида был выбран 2,2'-дитио-бис(КЬ1-диэтил)этанамин (ДС), а в качестве биогенных дисульфидов использовали окисленный глутатион (GSSG) и масло чеснока (МЧ), мажорным компонентом которого является диаллилдисульфид (ДАДС). Установлено, что ДС и МЧ обладают сопоставимым цитоток-сическим действием (ЕС50 составляет -0.6 мМ), в то время как GSSG в концентрациях вплоть до 1 мМ не влияет на жизнеспособность клеток эндотелия. Впервые показана медиаторная активность ДС и МЧпо отношению к оксидоредуктазам плазматической мембраны клеток эндотелия при использовании в качестве субстрата солей тетразолия, обусловливающая ложноотрицательный эффект. В связи с этим метод Мосмана имеет серьезные ограничения при оценке влияния дисульфидов на жизнеспособность клеток, но может быть использован при исследовании механизма их действия.
展开▼
