摘要:应用由犬瘟热弱毒株CDV/R-20/8株研制的犬瘟热减毒疫苗实验免疫临床健康小熊猫17只,隔离饲养观察30天,16只未见不良反应,1只于免疫后第20天出现发热、咳嗽、结膜炎等疑似犬瘟热症状,3天后濒死扑杀,主要剖检变化为小叶性肺炎病变,在其电镜负染标本中见有犬瘟热病毒样颗粒.应用CDV H基因特异性引物对肝脏样品经RT-PCR扩增出了CDV H基因相应核酸片段,并对其H的全基因进行了序列测定与分析,其序列与所用的减毒疫苗CDV/R-20/8株,Onderstepoort株和Convac株CDV弱性及A75-17株CDV标准强毒的同源性分别为99.7%,96.5﹪,91.9﹪.其所推导的氨基酸与上述毒株的同源性则分别为99.5﹪,95.6﹪,91.0﹪,所推导的N-联糖基化位点与Convac株相同含有7个,缺少A75/17株309-311位氨基酸所特有的潜在的糖基化位点,上述结果表明,该小熊猫肝脏样品中所接种的CDV疫苗弱毒的关系最为密切,所表现的犬瘟热症状也就可能与接种该CDV弱毒疫苗有关.另采用固定病毒稀释血清的方法检测了接种该弱毒疫苗前后的16只小熊猫血清CDV中和抗体,结果显示免疫前血清CDV中和抗体效价均小于1:4,免疫30天后的有小熊猫血清CDV中和抗体效价均在1:128以上,表明该疫苗弱毒具有较强的免疫原性.