摘要：背景与目的:透明质酸参与了多种肿瘤细胞增殖和侵袭行为.Layilin是一种新发现的特异性透明质酸受体,在发现Layilin表达于人肺腺癌组织和A549细胞株的前期工作基础上,本研究观察了用RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术抑制Layilin表达后,对人肺腺癌A549细胞体外增殖和侵袭、移植瘤生长和淋巴道转移,以及对荷瘤鼠生存期的影响.方法:构建能表达针对Layilin的小干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA)的RNA干扰载体(LayilinsiRNAVector)和表达不针对任何已知mRNA的siRNA的阴性对照RNA干扰载体(ControlsiRNAVector),分别转染A549细胞,新霉素抗性筛选得到Layilin表达受抑制的A549-siLayilin细胞和Layilin表达未受影响的A549-siControl细胞.针对非转染(A549-nontransfection)、A549-siLayilin、A549-siControl三组细胞,分别采用RT-RealtimePCR和Westernblot技术检测Layilin表达,用MTT比色试验和Boyden小室实验检测细胞体外增殖和侵袭能力.针对三组细胞种植裸鼠形成的移植瘤,分别采用背部皮下种植侵袭模型和爪垫皮下种植淋巴结转移模型,检测它们生长、侵袭和经淋巴道转移能力的差异,以及对荷瘤裸鼠生存期的影响.结果:与A549-nontransfection组和A549-siControl组相比,A549-siLayilin组细胞Layilin表达减少,体外增殖和侵袭能力降低,在裸鼠内形成的移植瘤潜伏期延长,生长变慢,淋巴转移率下降,其荷瘤鼠生存期相对较长.结论:通过RNA干扰抑制Layilin表达后,能显著抑制HA所诱导的A549细胞体外增殖和侵袭,抑制A549细胞裸鼠移植瘤生长与淋巴道转移,并延长荷瘤鼠的生存期.本研究为通过RNA干扰手段抑制Layilin表达,进而抑制肺腺癌增殖、侵袭和经淋巴道转移提供了有益的思路.
