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サケ頬Oncorhynchus masou masouのざ仙の陸封型(ヤマメ)と遡河型(サクラマス)のアレルゲンの比較解析

机译:鲑鱼脸颊Oncorhynchus masou masou的陆地密封(yamame)和失控型(樱桃鲑鱼)过敏原的比较分析

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摘要

サケ類のアレルギー表示は遡河型のみが対象となっている.本研究では,サケ類Oncorhynchus masou masouの陸封型(ヤマメ)と遡河型(サクラマス)のアレルゲンを比較した。SDS-PAGE分析により,主要アレルゲンであるパルプアルブミンの含量はヤマメのほうが高いことが示唆され,ELISAによる定量(ヤマメ:1.8~7.8mg/g,サクラマス:0.28~0.52 mg/g)で裏づけられた.また,患者血清を用いたELISAでは,ヤマメ抽出液のほうが強いIgE反応性を示した.次に,ヤマメおよびサクラマスから,それぞれ3成分のパルプアルブミンをゲルろ過,逆相HPLCにより精製した.逆相HPLCにおける保持時間およびMALDI/TOF-MSにより測定した分子量から,両魚種は同じパルプアルブミンアイソフォームを含むと考えられた.以上の結果から,アレルゲン性はヤマメのほうがサクラマスより高いと推測された.%Although the difference in allergenicity between landlocked and anadromous salmon is little understood, only anadromous salmon are recommended to be labeled in the current allergen labeling system. This study was designed to examine the allergenic potency of landlocked species (yama-me) and anadromous species (sakuramasu) of masu salmon Oncorhynchus masou masou, with special reference to parvalbumin, a known major fish allergen. Analysis of the heated extracts by SDS-PAGE suggested that yamame contains parvalbumin in the muscle at considerably higher levels, as compared with sakuramasu. In accordance with this, the parvalbumin content in the muscle of yamame (1.8-7.8 mg/g), determined by visible-light ELISA, was significantly higher than that of sakuramasu (0.28-0.52 mg/g). Furthermore, fluorescence ELISA experiments showed that the heated extract from yamame reacts with serum from fish-allergic patients more strongly than that from sakuramasu. Three parvalbumin isoforms (PA-I, -II and -III) were individually purified from yamame and sakuramasu by gel filtration and reverse-phase HPLC. Based on the retention times in reverse-phase HPLC and the molecular weights estimated by MALDI/TOF-MS, PA-I, -II and -III from yamame were judged to be identical with PA-I, -II and -III from sakuramasu, respectively. Taken together, our data indicate that landlocked masu salmon (yamame) is more allergenic than anadromous salmon (sakuramasu).
机译:鲑鱼的过敏标签仅适用于逆行类型。在这项研究中,我们比较了陆地密封(yamame)和失控(樱桃鲑鱼)之间鲑鱼Oncorhynchus masou masou的过敏原。 SDS-PAGE分析表明,主要的过敏原果肉白蛋白含量在山形鳟鱼中较高,这已通过ELISA定量证实(山形鳟鱼:1.8-7.8 mg / g,樱桃鲑鱼:0.28-0.52 mg / g) 。另外,使用患者血清的ELISA显示山形提取物具有更强的IgE反应性。接下来,通过凝胶过滤和反相HPLC纯化来自山梅鳟鱼和樱桃鲑鱼的纸浆白蛋白的三种成分。根据反相HPLC中的保留时间和通过MALDI / TOF-MS测定的分子量,两种鱼类都被认为含有相同的果肉白蛋白同工型。从以上结果可以推断,山形鳟鱼比樱桃鲑鱼具有更高的致敏性。 %尽管对内陆鲑鱼和无水鲑鱼的致敏性差异了解甚少,但在当前的过敏原标记系统中仅建议对无水鲑鱼进行标记。本研究旨在检查内陆物种(yama-me)和无水生物的致敏效力。鲑鱼Oncorhynchus masou masou(sakuramasu),特别提到了已知的主要鱼类过敏原小白蛋白,通过SDS-PAGE对加热提取物的分析表明,与sakuramasu相比,yamame在肌肉中所含的小白蛋白水平要高得多。据此,通过可见光ELISA测定的山me肌肉中小白蛋白含量(1.8-7.8 mg / g)显着高于sakuramasu(0.28-0.52 mg / g)。Excel,荧光ELISA实验表明yamame的加热提取物与鱼过敏患者的血清反应比sakuramasu的反应强烈。三种小白蛋白同工型(PA-I,-II an d -III)分别通过凝胶过滤和反相HPLC从yamame和sakuramasu中纯化,基于反相HPLC中的保留时间以及MALDI / TOF-MS,PA-I,-II和-估算的分子量yamama的III被认为分别与sakuramasu的PA-I,-II和-III相同。综合来看,我们的数据表明,内陆的马苏鲑(yamame)的致敏性高于无鳞鲑(sakuramasu)。

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