参附注射液对窒息法心脏骤停动物模型复苏后肺损伤的影响

摘要

目的 通过猪心脏骤停窒息模型探讨参附注射液对此类肺损伤保护作用的可能机制.方法 34只健康近交系五指山小型猪使用气管插管夹闭方法制作窒息型心脏骤停动物模型及行标准的心肺复苏术,其中18只成功恢复自主循环(return of spontaneous circulation,ROSC),使用随机数字表法分为两组:参附组(n=9):于ROSC后即刻以参附注射液0.24 mg/min的剂量持续静脉泵入直至复苏后6h;盐水组(n=9):于ROSC后即刻持续静脉泵入相同剂量及速度的生理盐水直至复苏后6h.通过血气分析仪测量基础状态、ROSC即刻、ROSC后15 min、30 min、1h、2h、4h及6h的氧代谢及呼吸力学指标[包括:氧合指数(OI)、呼吸指数(RI)、氧输送(DO2)、氧消耗(VO2)、氧摄取(O2ER)、二氧化碳分压(PaCO2)及血乳酸(LAC),并监测同一时刻动物的肺顺应性(Cdyn)、气道阻力(Raw)、血管外肺水指数(EVLWl)和肺血管通透性指数(PVPI)];酶联免疫吸附法测定Na+-K+-ATP酶活性、Ca2+-ATP酶活性、SOD及MDA含量、TNF-α、IFN-γ和IL-4浓度,计算IFN-γ/IL-4值;利用TUNEL法检测细胞凋亡并计算凋亡指数(AI);免疫组织化学法检测Bcl-2、Bax蛋白浓度,计算BAX/BCL-2值;Western blot法检测Caspase-3蛋白定量.结果 至ROSC后6h,参附组存活率为88.9％ (8/9),盐水组存活率为66.7％(6/9);参附组平均生存时间(5.77 ±0.71)h长于盐水组(4.77 ±0.59)h,两组比较差异无统计学意义(P＞0.05).与基础状态比较,两组的OI和Cdyn在ROSC即刻明显降低(P＜0.05),而RI、DO2、VO2、O2 ER、Raw、EVLWl、PVPI、PaCO2和LAC在ROSC即刻则显著升高(P＜0.05),各指标不论升高或降低均随时间延长而恢复;与盐水组比较,参附组在ROSC后的各个时间点,OI、Cdyn、DO2、VO2和O2 ER显著高于盐水组(P ＜0.05,P＜0.01),而RI、Raw、EVLWl、PVPI、PaCO2和LAC则低于盐水组(P ＜0.05,P＜0.01).与盐水组比较,参附组Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、SOD水平、IFN-γ水平、IFN-γ/IL-4值及Bcl-2浓度升高,而MDA、TNF-α、IL-4水平、AI、Bax/Bcl-2及Caspase-3蛋白水平降低(P ＜0.05,P＜0.01).结论 参附注射液能改善细胞能量代谢,提高细胞的抗氧化能力并减少氧化应激,减少炎症介质的释放和并调节Thl/Th2的平衡,同时减轻肺组织细胞凋亡,从而实现对心肺复苏后肺损伤的保护.