IL-1β辅助小胶质细胞M1型活化的作用机制研究

摘要

目的 探讨IL-1β辅助小胶质细胞M1型活化的作用和机制.方法 将BV2细胞分为对照(Control)组、脂多糖(LPS)组、LPS+IL-1β组.Control组常规培养;LPS组用终浓度为1 mg/L的LPS处理;LPS+IL-1β 组先用15μg/L的IL-1β预处理6 h,再用终浓度为1 mg/L的LPS处理.LPS的处理时间为24 h.酪氨酸激酶(JAK1)抑制剂IN-7处理的实验中,将BV2细胞分为LPS组、LPS+IL-1β组、LPS+IL-1β+IN-7组,其中LPS+IL-1β+IN-7组在IL-1β处理前6 h用0.5μmol/L IN-7预处理,阻断JAK1,其余处理同前.采用ELISA法检测培养基中IL-6、TNF-α、一氧化氮(NO)和前列腺素G2(PEG2)水平;免疫荧光染色观察BV2细胞中CD86的荧光强度;Western blot法检测M1型标志物单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、趋化因子8(CXCL-8)的表达以及JAK1-信号转导及转录激活蛋白1(STAT1)信号蛋白JAK1、STAT1、磷酸化的JAK1(p-JAK1)、磷酸化的STAT1(p-STAT1)的表达.结果 与LPS组比较,LPS+IL-1β 组培养基中在3、6、12、18、24 h时IL-6、TNF-α、NO和PEG2表达水平均上调(均P<0.05),细胞中CD86荧光强度上调(P<0.05),细胞中MCP-1、CXCL-8、JAK1、p-JAK1、p-STAT1蛋白表达水平均上调(均P<0.05).而IN-7处理后,与LPS+IL-1β 组比较,LPS+IL-1β+IN-7组培养基在3、6、12、18、24 h时IL-6、TNF-α、NO和PEG2表达水平均下调(均P<0.05),细胞中CD86荧光强度下调(P<0.05),细胞中MCP-1、CXCL-8、JAK1、STAT1、p-JAK1、p-STAT1蛋白表达水平均下调(均P<0.05).结论 IL-1β 可以通过激活JAK1-STAT1信号,进一步促进小胶质细胞M1型活化,这是神经炎症进展的机制之一.