血根碱对乳腺癌阿霉素耐药株MCF-7/ADR的逆转作用及机制分析

摘要

目的 探讨血根碱对乳腺癌耐药细胞株的耐药逆转作用及机制.方法 CCK8法检测亲本MCF-7细胞、耐药株MCF-7/ADR细胞及血根碱处理后耐药株IC_(50)的变化;罗丹明123实验鉴定重要耐药蛋白P-gp功能变化;Western blot法鉴定亲本细胞、耐药细胞、血根碱和AKT激动剂IGF-1处理后相关蛋白(P-AKT、AKT、P-gp)的表达水平.结果 与亲本MCF-7细胞相比,ADR、CTX和5-FU对MCF/ADR耐药细胞的IC_(50)明显增高;罗丹明123在MCF-7/ADR细胞胞内蓄积减少,外排功能加强;MCF-7/ADR耐药细胞P-gp表达明显升高.8μmol/L血根碱能显著降低MCF-7/ADR细胞的IC_(50)和罗丹明123外排功能,并能降低P-gp蛋白的表达.8μmol/L血根碱作用后,AKT通路活性明显被抑制,P-gp蛋白表达明显降低;进一步在血根碱作用后应用AKT通路激动剂IGF-1,则P-gp蛋白表达明显升高.结论 MCF-7/ADR细胞具有多药耐药特性,其耐药机制主要为提高P-gp蛋白的表达;血根碱能明显逆转MCF-7/ADR细胞的多药耐药性,其耐药逆转机制主要是通过抑制AKT通路活性进而降低P-gp蛋白表达实现的.