利用流式细胞术检测甜菜染色体倍性和DNAC-值

摘要

[目的]研究流式细胞技术快速、准确、方便测定甜菜体内染色体倍性和DNAC-值,为甜菜染色体倍性、分子生物学领域的相关研究提供参考依据.[方法]以二倍体M39-8-4嫩叶为材料,以已知基因组的新疆野杏洛浦洪待克为外标,建立适合于甜菜染色体倍性和基因组的流式细胞术测定方法.[结果]经7种常用细胞解离液筛选,Marie's为甜菜作物的最佳选择.用Marie's解离液制备的甜菜细胞核悬浮液,测定4份甜菜材料和新疆野杏洛浦洪待克值的变异系数(CV)均小于5.0％,且上样速率超过200 events/μL,可重复性好,结果清晰、可靠.M39-8-4超原、02343刘福齐和7208伊抗褐的DNA含量依次是821.88、891.9和1 759.59 Mb;待测材料LSR88-5-1为二倍体,DNA含量822.48 Mb.[结论]流式细胞术能准确区分不同倍性的甜菜材料;可作为鉴定甜菜倍性的方法.