一种改良的Southern印迹杂交方法

摘要

在综合前人方法的基础上，改良了一种简捷、灵敏、廉价、效果可靠的Southem印迹杂交方案，使用0．4moL／L NaOH溶液将琼脂糖凝胶上的DNA在变性的同时转移到尼龙膜上，紫外交联固定后用于杂交。预杂交液和杂交液选用Church缓冲系统，该缓冲系统中仅需10g／LBSA作为封闭剂即可。整个洗膜过程可简化为一种溶液、2-3次洗涤。碱变性及转移后的尼龙膜，也可以用于地高辛（DIG）等非放射性检测系统，并可耐多轮杂交和洗膜。方法可适用于包括高等植物基因组在内的多种生物材料的DNA检测。