针刀松解“三合阳”对KOA模型兔膝关节IL-1β、IL-10、TNF-α的影响

摘要

目的 从抗炎方面探讨针刀松解膝骨关节炎模型兔“三合阳”保护关节软骨,改善膝关节功能的相关机制。方法 36只健康新西兰兔取12只作为空白组,其余24只采用单碘乙酸(monoiodoacetic acid,MIA)建立兔膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)模型,2周后,造模成功的新西兰兔随机分为模型组、针刀组,每组12只。针刀组松解“三合阳”进行治疗,每3天1次。分别于治疗2周、4周后对各组行骨关节炎严重程度指数(Lequesne MG)评分,依据X线结果行K-L(Kellgren-Lawrence)评分,取材后观察膝关节大体情况,苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin staining,HE)染色后对关节软骨进行Mankin’s评分,酶联免疫吸附法(ELISA)检测关节液中白介素-10(interleukin-10,IL-10)的水平,免疫印迹法(Western Blot,WB)和实时荧光定量PCR法(real-time quantitative PCR,RT-PCR)法检测软骨组织中白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)的蛋白和mRNA表达。结果 造模第4周、第6周后,模型组较空白组Lequesne MG评分、K-L评分、Mankin’s评分、关节软骨中IL-1β和TNF-α的mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P <0.01),关节液中IL-10蛋白表达水平显著降低(P <0.01);针刀组较模型组Lequesne MG评分、K-L评分、Mankin’s评分、关节软骨中IL-1β和TNF-α的mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P <0.01),关节液中IL-10蛋白表达水平显著升高(P <0.05,P <0.01)。结论 针刀松解“三合阳”可纠正KOA模型兔膝关节力学失衡,下调关节软骨中IL-1β、TNF-α的表达以减轻炎症反应,上调关节液中IL-10的表达以抑制炎症相关因子释放,保护关节软骨,改善膝关节功能。