槲皮素抑制肠道病毒71型感染的机制研究

摘要

目的:通过体外细胞实验探讨槲皮素抑制肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)感染的能力,并对其抗病毒机制进行探讨,为手足口病的治疗及抗病毒中药开发提供基础研究数据。方法:TCID50法滴定病毒;MTT法行细胞毒性及槲皮素抗病毒活性实验,计算CC50、EC50及SIs;Western blot检测病毒蛋白;针对不同实验组Western blot检测TLR7、Caspase3及病毒蛋白VP1水平;实时荧光定量PCR检测实验组白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)及白细胞介素8(interleukin-8,IL-8)等细胞因子水平,以此进行抗病毒机制研究。结果:槲皮素50%细胞毒性浓度(CC50)值>100μM,细胞毒性小,有效抑制50%RD细胞感染EV71的EC50为15μM,计算SI至少大于6,同时Western blot结果显示槲皮素处理的细胞中病毒VP1蛋白受到显著抑制,且存在剂量依赖效应;针对机制研究发现,EV71病毒感染RD细胞后上调TLR-7表达水平,而槲皮素通过抑制下游的IL-6及Caspase3表达水平发挥抗病毒作用。结论:槲皮素体外对EV71有较好的抗病毒作用,具有潜在的临床应用前景,其抗病毒机制可能通过抑制IL-6及下游的细胞凋亡来实现。