变形链球菌表面蛋白真核表达质粒pcDNA3/pacArn和pcDNA3/pacP在哺乳动物细胞中的表达

摘要

目的:研究变形链球菌表面蛋白真核表达质粒pcDNA3/pacA 及pcDNA3/pacP在哺乳动物细胞中的转录及表达情况。方法:利用脂质体介导的转染技术，将真核表达质粒pcDNA3/pacA 及pcDNA3/pacP分别转染COS-7细胞，1mg*ml-1 G418加压筛选获取稳定转染的COS-7细胞之后，采用RT-PCR法、LSAB法、流式细胞术及Western印迹法，对真核表达质粒中插入基因pac-A和pac-P的转录及表达产物进行检测。结果:真核表达质粒pcDNA3/pacA及pcDNA3/pacP的插入基因在导入哺乳动物细胞后具有转录和翻译活性，表达的蛋白质产物可位于胞内、胞膜及胞外。结论:构建的真核表达质粒pcDNA3/pacA 和pcDNA3/pacP能在哺乳动物细胞中表达插入基因所编码的蛋白质，为进一步的动物实验提供了实验依据。