BMSC对内毒素诱导的肺泡上皮细胞氧化应激的影响

摘要

目的 探讨骨髓间充质干细胞((bone marrow stromal cell,BMSCs)对内毒素(lipopolysaccharide,LPS)诱导的Ⅱ型肺泡上皮细胞(alveolar epithelial cellⅡ,AECⅡ)氧化应激的影响.方法 选用A549细胞代替AECⅡ,将实验分为A549组、A549+LPS组、A549-BMSC+LPS组及A549-BMSC+PBS组,即单独培养A549细胞或将BMSC与A549细胞共培养于Transwell体系,培养过夜后予LPS或等体积的PBS刺激.收集各组A549细胞样本,通过流式细胞仪检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)的表达水平,并利用化学检测试剂盒,通过分光光度计检测脂过氧化物(lipid peroxides,LPO)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH)表达水平.结果 A549细胞在LPS的干预下,细胞内ROS表达水平(658.40±27.89)及其代谢产物LPO(1.46±0.15)、MDA(36.85±2.75)的水平明显升高(P<0.001),抗氧化因子SOD(13.44±3.32)、GSH(346.56±44.33)的活性明显降低(P<0.001);与A549+LPS组比较,A549-BMSC+LPS组ROS(544.61±41.30)、LPO(1.05±0.09)、MDA(10.63±0.95)的水平明显降低(P=0.001、P=0.006、P<0.001),SOD(33.41±3.59)、GSH(447.18±45.56)的活性明显升高(P=0.001、P=0.028);而与A549组比较,A549-BMSC+PBS组ROS(108.97±17.49)、LPO(0.12±0.03)、MDA(1.23±0.36)的表达水平呈下降趋势(P=0.033、P=0.004、P=0.012),SOD(68.33±8.01)、GSH(793.89±62.33)的活性进一步升高(P=0.001、P=0.002).结论 BMSC能显著减轻LPS诱导的AECⅡ细胞的ROS生成,同时能正向调节其抗氧化的能力,可以一定程度上抑制LPS诱导的AECⅡ细胞的氧化应激反应.抑制肺泡上皮细胞氧化应激状态下ROS的产生、增强肺泡上皮细胞抗氧化的能力,或许可以成为治疗急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征的新策略之一.