长链非编码RNA双特异性磷酸酶5假基因1对三阴性乳腺癌细胞生物学行为的作用

摘要

cqvip:目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)双特异性磷酸酶5假基因1(dual-specificity phosphatase 5 pseudogene 1,DUSP5P1)对三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)细胞生物学行为的作用。方法采用实时荧光定量PCR法检测TNBC细胞系MDA-MB-231、4T1、MDA-MB-468及正常人乳腺导管上皮细胞MCF-10A中lncRNA DUSP5P1的表达水平;将MDA-MB-231细胞系分为对照组、sh-vector组和sh-DUSP5P1组,分别不感染慢病毒、只感染空载质粒及感染sh-DUSP5P1-慢病毒(lentivirus,lenti)。采用MTT实验和克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力,Western Blot实验检测上皮标志物E-cadherin和间质标志物Vimentin、Snail的表达。结果TNBC细胞系MDA-MB-231、4T1及MDA-MB-468中lncRNA DUSP5P1的表达水平均明显高于正常人乳腺导管上皮细胞系MCF-10A(F=65.10,P<0.05)。细胞培养12、24、48、72 h后,sh-DUSP5P1组吸光度值(OD 490值)明显低于对照组和sh-vector组(分别F=33.62,90.72,41.17,77.94;均P<0.05)。细胞培养7 d后,与对照组和sh-vector组比较,sh-DUSP5P1组克隆形成数明显下降(F=575.1,P<0.05)。敲减DUSP5P1后,TNBC细胞系MDA-MB-231侵袭和迁移能力明显下降(分别F=933.30,160.20;均P<0.05),上皮标志物E-cadherin明显上升(F=6.21,P<0.05),间质标志物Vimentin和Snail明显下降(分别F=100.11,227.37;均P<0.05)。结论LncRNA DUSP5P1可能通过上皮间质转化过程促进TNBC细胞侵袭和迁移。