从人源大容量噬菌体抗体库中筛选抗生存素抗体

摘要

目的 从大容量天然噬菌体抗体库中筛选抗生存素(survivin)的人源单链抗体(single chain fragment variable,scFv)并进行鉴定.方法 以survivin为抗原,固化在抗原管上,通过吸附-洗脱-扩增过程,从大容量天然噬菌体抗体库中筛选特异性噬菌体抗体,并转染HB2151菌,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导制备成可溶性抗体,采用酶联免疫吸附测定法对其抗原结合活性进行检测,指纹图谱分析法分析抗体基因的种类.结果 经过4轮筛选,共获得21个与survivin结合的阳性克隆,其中10个特异性结合的克隆,指纹分析有8种不同的抗survivin的scFv基因,在这8种中有5种获得可溶性表达.结论 利用噬菌体抗体库技术获得了特异性的人源抗生存素抗体,为其在今后肿瘤治疗中的应用奠定基础.