双黄连冻干粉通过抑制MEK-ERK信号通路诱导急性淋巴细胞白血病Nalm6细胞凋亡

摘要

目的 探讨双黄连(SHL)冻干粉诱导急性B淋巴细胞白血病细胞(Nalm6)凋亡的机制.方法 采用0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 g/L的SHL处理急性白血病细胞株(Nalm6、Jurkat、Molt4、KG1a),CCK-8法检测细胞增殖抑制率,并计算半数抑制浓度(IC50).Nalm6细胞分为空白对照组(含有10％胎牛血清的RPMI 1640培养基)和SHL 0.1、0.2、0.4 g/L组.流式细胞术检测各组细胞周期分布及凋亡情况,Hoechst 33342染色细胞后观察细胞凋亡形态学改变.蛋白免疫印迹法检测各组Nalm6细胞MEK-ERK-c-Myc信号通路蛋白以及凋亡相关蛋白的表达情况.结果 SHL对Nalm6的IC50最低,为(0.11±0.01)g/L.细胞周期分析显示,0.1～0.4 g/L SHL处理后,Nalm6的细胞周期分布无明显变化,但随着处理浓度的升高,Nalm6凋亡细胞数增多,总凋亡率升高,tBid、cleaved Caspase-9、cleaved Caspase-3、cleaved PARP表达升高,MEK/ERK通路相关蛋白p-MEK/MEK、p-ERK/ERK、c-Myc表达下降(均P<0.05).经凋亡抑制剂Z-VAD-FMK预处理后,SHL对Nalm6细胞的促凋亡作用被抑制.结论 SHL可通过抑制MEK-ERK信号通路来诱导Nalm6细胞凋亡.