NO介导的代谢紊乱影响小鼠气道祖细胞增殖的机制研究

摘要

目的研究一氧化氮(NO)对小鼠气道club祖细胞增殖功能的调控及可能代谢机制。方法使用流式分选技术分选小鼠气道原代club祖细胞,经25µmol/L的NO供体二乙胺壬酸酯(DEA NONOate)处理后进行转录组测序;分选小鼠气道原代club祖细胞,使用肺脏类器官技术体外培养原代club祖细胞,分别加入正常培养基,40 nmol/L辛伐他汀(Hmgcr抑制剂),0.2µmol/L 6-重氮-5-氧代-L-正亮氨酸(DON,Gmps抑制剂),1 mmol/L氨基羟乙酸酯(AOA,Gpt2抑制剂)培养基,在培养第8天时使用倒置显微镜拍照,观察原代club祖细胞衍生类器官生长情况,并统计类器官直径和形成效率。结果DEA NONOate处理原代club祖细胞转录组表达显著变化(上调倍数超过1.2倍的基因2894个,下调16.7%以上的基因3270个),其中代谢相关基因Hmgcr、Gmps和Gpt2的表达量显著下降(P<0.01)。与对照组相比,辛伐他汀组原代club祖细胞形成的类器官直径减小(P<0.01),类器官形成效率没有变化;DON组类器官直径减小(P<0.01),类器官形成效率降低(P<0.01);AOA组类器官直径减小(P<0.01),类器官形成效率降低(P<0.01)。结论NO抑制小鼠气道原代club祖细胞增殖功能可能与其负调控Hmgcr、Gmps和Gpt2代谢相关通路有关。