DHA对牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导巨噬细胞炎症的抑制作用

摘要

目的 探讨二十二碳六烯酸(DHA)对牙龈卟啉单胞菌(P.g)脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞炎症的抑制作用.方法 用CCK-8方法检测DHA对P.g-LPS诱导的小鼠单核/巨噬细胞系RAW264.7细胞的毒性.将P.g-LPS与RAW264.7细胞共培养24 h后,更换含有DHA的培养基培养24 h,实时荧光逆转录定量PCR(qRT-PCR)检测RAW264.7细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)mRNA的表达.酶联免疫吸附实验检测细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌.用DCFH-DA方法检测RAW264.7细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生.结果 1 mg/L的P.g-LPS对巨噬细胞无毒性作用(P>0.05),浓度≥100μmol/L的DHA对P.g-LPS诱导的RAW264.7细胞有明显毒性作用(P<0.05);P.g-LPS组TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达显著高于阴性对照组(P<0.05);25、50、75μmol/L的DHA减少TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA的表达和TNF-α、IL-6的合成(P<0.05);P.g-LPS组ROS产生增多,25、50、75μmol/L的DHA减少ROS的产生(P<0.05),抑制程度呈浓度依赖性.结论 DHA能够有效抑制P.g-LPS诱发的巨噬细胞炎症反应.