YAP 1-FOS促进人口腔鳞状上皮癌细胞增殖、迁移及上皮间质转换的机制研究

摘要

目的 探讨YAP1-FOS在促进口腔鳞状上皮细胞癌(OSCC)细胞的增殖、迁移及上皮间质转换(EMT)过程中发挥的功能.方法 通过组织免疫荧光实验检测OSCC癌组织及周围正常组织中YAP1的表达及亚细胞定位,细胞克隆形成实验检测YAP1对OSCC细胞增殖情况的影响,细胞划痕实验检测YAP1对OSCC细胞迁移的影响,Western Blot检测YAP1对EMT相关分子标记基因蛋白表达的影响,RT-PCR检测YAP1对EMT相关分子标记基因转录水平变化的影响,CoIP及免疫印迹实验检测YAP1与FOS互作,共同调控下游基因表达以控制EMT过程.结果 组织免疫荧光实验结果显示,OSCC癌组织细胞中YAP1表达增加,且由细胞质转移至细胞核;细胞克隆形成实验结果显示,YAP1上调后克隆形成数目显著增加(P<0.01);细胞划痕实验结果显示,过表达YAP1后,细胞划痕间距显著减小(P<0.01);Western Blot及RT-PCR结果显示,上皮细胞关键基因E-cadherin表达水平在YAP1上调后被显著抑制(P<0.01),而间质细胞关键基因β-catenin,Vimentin及N-cadherin表达水平则显著上调(P<0.01).CoIP及免疫印迹结果显示,YAP1与核转录因子FOS互作,抑制FOS表达后YAP1的促细胞增殖能力显著减弱(P<0.01),同时EMT相关分子标记表达显著下调(P<0.01).结论 YAP1结合FOS基因促进人口腔鳞状上皮细胞癌(OSCC)细胞的增殖、迁移及EMT过程,这一结果可为人口腔鳞状上皮细胞癌的发生发展提供理论基础,YAP1-FOS或可成为新的人口腔癌药物靶点.