免疫纳米金催化光度法测定痕量补体C3

摘要

在pH值为5.6的磷酸氢二钠-柠檬酸(Na2HPO4-C6H8O7)缓冲溶液及PEG存在下,金标记羊抗人补体C3与补体C3发生特异性结合生成胶体金免疫复合物.以12 000 r·min-1速度离心分离获得未反应的免疫金上层溶液.以它作晶种,在pH2.97柠檬酸钠-盐酸(Na3C6H5O7-HCl)缓冲溶液-53.33μ·mL-1HAuCl4-74.13μg·mL1NH2OH·HCl溶液中及37℃恒温水浴条件下反应显色3min内.结果表明,随着C3浓度增大,离心上层溶液中免疫金浓度降低,760nm处的吸光度线性降低,测定C3的线性范围为0.025～0.60 ng·mL-1,回归方程为△A760 nm=0.276c+0.025 4,相关系数(r)为0.990 3,检测限(3σ)为0.007 2 ng·mL-1.本法具有灵敏、快速和高的特异性,用于定量分析人血清补体C3,结果满意.