九香虫防卫素CcDef3基因的克隆与表达分析

摘要

[目的]探明九香虫防卫素基因CcDef3的生物信息学特征及其在九香虫体内的表达模式,揭示CcDef3基因的调控规律,为进一步研究该基因的功能及开发新型药物奠定基础.[方法]采用反转录PCR克隆CcDef3基因并使用生物信息学软件和方法对其进行序列分析,采用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测其时空表达模式及细菌诱导后的表达模式.[结果]九香虫防卫素基因CcDef3的cDNA长度为522 bp,包含一个长351 bp的开放阅读框,编码116个氨基酸残基;CcDef3多肽由1个信号肽、2个前肽及1个成熟肽组成,成熟肽形成1个α-螺旋,2个β-折叠片和3个二硫键的三维分子结构;九香虫防卫素CcDef3与红尾碧蝽防卫素的亲缘关系最近;CcDef3在九香虫不同发育时期均表达,其中在5龄若虫中表达水平最高,在所检测的组织中皆表达,在脂肪体中表达水平最高;用细菌诱导九香虫成虫后CcDef3的表达水平上调,在12 h时达到峰值,而后下调至48 h时趋向于诱导前表达水平.[结论]该研究克隆了九香虫防卫素CcDef3基因,并进行了特征分析,解析其表达模式.CcDef3基因的表达受到自身免疫的调控,还可以被诱导而参与免疫应答反应.