甲泼尼龙对高糖腹膜透析液诱导人腹膜间皮细胞表达纤维化相关细胞因子的影响

摘要

目的 观察甲泼尼龙(MP)对高糖腹膜透析液(PDS)诱导人腹膜间皮细胞(HMPCs)纤维化相关细胞因子表达的影响.方法 体外培养HPMCs,随机分为空白组(10％FBS培养液)、模型组(4.25％PDS和10％FBS培养液)和MP低、中、高剂量组(含MP浓度为0.1、0.2、0.4μg/mL的4.25％PDS和10％FBS培养液).采用CCK-8法检测细胞存活率;MTT法检测各组细胞增殖活性;流式细胞仪检测细胞内ROS水平;RT-PCR法检测IL-6、α-SMA、HA的mRNA表达;Western blotting法检测核转录因子(NF-κB)、转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、透明质酸(HA)、Smads蛋白表达.结果 MP浓度在0.032～0.256μg/mL时,HPMCs存活率升高(P<0.05);MP对HPMCs的半抑制率(IC50)为0.842μg/mL.与空白组相比,模型组增殖活性减弱(P<0.05),ROS、IL-6、NF-κB、TGF-β1、CTGF、VEGF、α-SMA、HA、p-Smad2/3、Smad7的表达增强(P均<0.05);与模型组相比,ROS在MP中、高剂量组的表达减少(P均<0.05),IL-6、NF-κB、TGF-β1、CTGF、VEGF、α-SMA、HA、p-Smad2/3、Smad7在MP三个剂量组表达下调(P均<0.05).结论 MP通过减少高糖PDS诱导HPMCs纤维化相关细胞因子的表达,发挥抗PF的作用.