miR-27a-3p在氧糖缺失-复氧复糖损伤PC12细胞中的表达及其对PC12细胞增殖、凋亡的影响

摘要

目的 探讨miR-27a-3p在氧糖缺失-复氧复糖(OGD/R)损伤PC12细胞中的表达及其对OGD/R损伤PC12细胞增殖、凋亡的影响.方法 将PC12细胞随机分为正常培养(Normal组)、氧糖缺失2 h后分别复氧复糖3 h、6 h和9 h组,qRT-PCR法检测各时点miR-27a-3p表达.之后将PC12细胞随机分为正常对照(Ctrl组)、氧糖缺失2 h复氧复糖(OGD/R组),慢病毒分别转染miR-27a-3p模拟物、模拟物阴性对照、抑制剂和抑制剂阴性对照入细胞后行OGD/R,分别设为Mimics组、Mimics-Ctrl组、Inhibitor组和Inhibitor-Ctrl组,CCK-8法检测各组细胞复氧复糖后24、48、72和96 h细胞的增殖活性;根据前述结果,选择miR-27a-3p表达差异最大的时间点进行复氧复糖,RT-qP-CR法检测各组miR-27a-3p、凋亡相关因子Caspase-3、Bax和Bcl-2 mRNA表达,Western blotting法检测各组Cleaved-Caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白表达.结果 与Normal组相比,3 h、6 h、9 h组miR-27a-3p表达在OGD/R后均降低(P均<0.05),6 h组呈最低(P<0.05).与Ctrl组比较,复氧复糖后48、72和96 h,OGD/R组细胞增殖活性均降低(P均<0.05);与Mimics-Ctrl组比较,24、48、72和96 h时Mimics组细胞的增殖活性均升高(P均<0.05);与Inhibitor-Ctrl组比较,72 h和96 h时Inhibitor组细胞增殖活性均降低(P均<0.05).复氧复糖后6 h,与Ctrl组比较,OGD/R组miR-27a-3p表达降低(P<0.05),Caspase-3、Bax mRNA和蛋白相对表达量均升高(P均<0.05),Bcl-2表达量降低(P<0.05);过表达miR-27a-3p后,miR-27a-3p表达升高(P<0.05),Caspase-3、Bax mRNA和蛋白相对表达量均降低(P均<0.05),Bcl-2表达量升高(P<0.05),抑制miR-27a-3p表达后结果与之相反.结论 miR-27a-3p在OGD/R损伤PC12细胞中呈低表达,miR-27a-3p能促进OGD/R损伤PC12细胞的增殖并抑制其凋亡.