KPT-6566对肺癌细胞增殖、侵袭、凋亡的影响及机制

摘要

目的 探讨肽脯氨酰基顺反异构酶1(Pin1)小分子抑制剂KPT-6566对肺癌细胞增殖、侵袭、凋亡的影响及机制.方法 取对数生长期A549细胞,将其分为对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,分别加入0、2.5、5、10μmol/L的KPT-6566.采用CCK-8法评估各组细胞存活率(以细胞存活率表示细胞增殖能力),采用细胞克隆形成实验评估细胞克隆形成个数(以细胞克隆形成个数表示细胞克隆形成能力),采用Transwell侵袭实验评估细胞侵袭能力(以侵袭细胞个数表示细胞侵袭能力),采用流式细胞术评估各组细胞凋亡率,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞中Pin1、髓样细胞白血病-1(MCL-1)、蛋白激酶B(AKT)、人髓细胞增生原癌基因(MYC)、大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(Ras)、原癌基因丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Raf)、丝裂原激活蛋白激酶的激酶(MEK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)mRNA表达,采用Western blotting法检测各组细胞中Pin1、MCL-1、AKT、MYC、Ras、Raf、MEK、ERK、PI3K蛋白表达.结果 KPT-6566呈浓度依赖性降低A549细胞存活率(P均<0.05);KPT-6566呈浓度依赖性减弱细胞克隆形成能力(P均<0.05);KPT-6566呈浓度依赖性增加A549细胞凋亡率(P均<0.05);KPT-6566呈浓度依赖性地减弱A549细胞侵袭能力(P均<0.05);KPT-6566呈浓度依赖性减少A549细胞中Pin1、MCL-1、AKT、MYC、Ras、Raf、MEK、ERK、PI3K基因及蛋白表达(P均<0.05).结论 KPT-6566可抑制肺癌细胞增殖并促进细胞凋亡,其作用机制可能与Pin1调节PI3K/AKT和MEK/ERK信号转导通路有关.