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miR-130a靶向调控FOSL1基因对胰腺癌PANC-1细胞增殖和凋亡的影响及机制

         

摘要

目的 探讨微小RNA(miR-130a)靶向调控FOS样抗原1(FOSL1)对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法 常规培养胰腺癌细胞PANC-1,并将其分为NC组和miR-130a mimic组,采用脂质体2000进行细胞转染,NC组转染对照,miR-130a mimic组转染miR-130a模拟物.采用CCK-8实验检测细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡情况.Targetscan7.1预测软件及双荧光素酶报告基因试验验证miR-130a靶向调控FOSL1基因.构建FOSL1过表达质粒,并与miR-130a共同转染PANC-1细胞,分为NC组、miR-130a mimic组和miR-130a mimic+oe-FOSL1组,NC组转染对照,miR-130a mimic组转染miR-130a模拟物,miR-130a mimic+oe-FOSL1组转染miR-130a模拟物和FOSL1过表达质粒.Western blotting法检测各组细胞中p53蛋白表达.结果 与NC组相比,miR-130a mimic组PANC-1细胞增殖能力降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05).双荧光素酶报告基因试验证实FOSL1为miR-130a的靶基因.与NC组相比,miR-130a mimic组和miR-130a mimic+oe-FOSL1组PANC-1细胞增殖能力降低、细胞凋亡增加(P均<0.05).而与miR-130a mimic组相比,miR-130a mimic+oe-FOSL1组PANC-1细胞增殖能力增加、细胞凋亡率降低(P均<0.05).与NC组相比,miR-130a mimic组和miR-130a mimic+oe-FOSL1组细胞中FOSL1蛋白表达降低和p53蛋白增加(P均<0.05).而与miR-130a mimic组相比,miR-130a mim-ic+oe-FOSL1组FOSL1蛋白表达增加和p53蛋白表达降低(P均<0.05).结论 miR-130a靶向调控FOSL1抑制胰腺癌细胞增殖并促进细胞凋亡,其机制可能通过增加p53蛋白表达实现.

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