高低淋巴结转移潜能鼻咽癌细胞与LEC共培养后目标细胞miR-92 a-3 p表达及其靶基因功能分析

摘要

cqvip:目的观察高低淋巴结转移潜能的鼻咽癌(NPC)细胞系5-8F(高淋巴结转移潜能)及6-10B(低淋巴结转移潜能)与淋巴管内皮细胞(LEC)共培养后各目标细胞中miR-92a-3p的表达情况,预测其靶基因并分析其功能,探讨其对NPC淋巴结转移的影响及作用机制。方法依据Transwell上下室接种细胞的不同进行分组,LEC+5-8F组Transwell上室接种LEC、下室接种5-8F细胞,LEC+6-10B组上室接种LEC、下室接种6-10B细胞,5-8F+LEC组上室接种5-8F细胞、下室接种LEC,6-10B+LEC组上室接种6-10B细胞、下室接种LEC,作为对照的LEC组、5-8F组、6-10B组分别接种LEC、5-8F细胞、6-10B细胞于6孔板中,以共培养后的Transwell上室细胞和6孔板培养的单细胞为目标细胞。各组细胞培养48 h时,采用qRT-PCR法检测各组目标细胞中miR-92a-3p。通过4个miRNA靶基因预测网站miRDB、miRTarbase、miRWalk、TargetScan预测miR-92a-3p的靶基因并取交集,使用KOBAS3.0在线网站对共同预测的靶基因进行KEGG通路分析。结果LEC+5-8F组、LEC+6-10B组、LEC组细胞中miR-92a-3p的相对表达量分别为605.00±119.00、46.30±11.40、1.01±0.16,组间相比,P均<0.05。5-8F+LEC组、5-8F组细胞中miR-92a-3p的相对表达量分别为212.00±39.40、1.00±0.08,组间相比,P<0.05。6-10B+LEC组、6-10B组细胞中miR-92a-3p的相对表达量分别为4.14±0.87、1.02±0.24,组间相比,P<0.05。有74个基因被4个miRNA靶基因预测网站共同预测为miR-92a-3p的靶基因,富集在TGFβ、PI3k/Akt、AMPK、mToR以及钙信号通路等与肿瘤转移相关的通路上。结论高低淋巴结转移潜能的NPC细胞系与LEC共培养后目标细胞中miR-92a-3p表达均升高,NPC细胞系与LEC共培养后细胞中miR-92a-3p的表达水平与淋巴结转移潜能有关,miR-92a-3p可能是NPC淋巴结转移的潜在标志物。