中华眼镜蛇毒膜毒素-12对膀胱癌细胞侵袭、转移的抑制作用及机制

摘要

目的 观察眼镜蛇毒膜毒素12(MT-12)对膀胱癌T24、RT4细胞侵袭、转移能力的影响,探讨MT-12抑制膀胱癌细胞侵袭、转移的机制.方法 取T24、RT4细胞,设置空白对照组(Ctrl组)、溶媒对照组(NC组)、0.25μg/mL组、0.50μg/mL MT-12组,分别应用PBS、0.1％DMSO、0.25μg/mL MT-12、0.50μg/mL MT-12处理细胞24 h,采用细胞划痕实验测算细胞迁移抑制率以评价细胞迁移能力,采用细胞黏附实验测算细胞黏附率以评价细胞黏附能力.设置空白对照组(Ctrl组)、MT-12组、促瘤剂佛波酯(PMA)组、PMA+MT-12组,分别应用PBS、0.50μg/mL MT-12、100 nmol/L PMA、0.50μg/mL MT-12+100 nmol/L PMA干预细胞24 h,采用凝胶酶谱分析法检测细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9酶活性含量,采用RT-PCR法检测细胞侵袭转移相关因子细胞间黏附因子-1(ICAM-1)、血管黏附因子-1(VCAM-1)、血管生成因子(VEGF)mRNA表达,采用ELISA法检测细胞VEGF蛋白表达.结果 T24和RT4两株细胞中,0.25μg/mLMT-12组、0.50μg/mLMT-12组细胞迁移抑制率、细胞黏附率均低于NC组(P均<0.05).T24和RT4两株细胞中,MT-12组MMP-9酶活性均低于Ctrl组(P均<0.05),PMA组MMP-9酶活性均高于Ctrl组,PMA+MT-12组MMP-9酶活性均低于PMA组(P均<0.05);MT-12组ICAM-1及VEGF mRNA表达均低于Ctrl组(P均<0.05),PMA+MT-12组ICAM-1、VEGF mRNA表达均低于PMA组(P均<0.05);PMA组VEGF蛋白表达均高于Ctrl组,PMA+MT-12组VEGF蛋白表达均低于PMA组(P<0.05).结论 MT-12可有效抑制膀胱癌细胞T24、RT4的迁移及转移能力,其分子机制与抑制MMP-9、VEGF、ICAM-1表达有关.