miR-20b对自身免疫性肝炎小鼠肝脏的保护作用及机制

摘要

目的 观察miR-20b对自身免疫性肝炎小鼠肝脏的保护作用,并探讨其作用机制.方法 将52只小鼠随机分成模型组16只、对照慢病毒组18只、miR-20b慢病毒组18只.模型组正常饲养,对照慢病毒组注射点突变miR-20b与靶基因结合的种子序列而构建得到对照载体,miR-20b慢病毒组注射miR-20b慢病毒表达载体.7d后三组均注射刀豆蛋白A(ConA)诱导自身免疫性肝炎.造模后6、12、18、24、36、48 h眼静脉采血,采用赖氏法检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)水平;造模后2h采用ELISA法检测血清炎症因子IFN-γ、TNF-α、IL-17A、IL-4水平;处死小鼠,取肝组织进行病理切片及HE染色,观察肝组织损伤情况;应用实时荧光定量PCR法检测肝组织中IFN-γ 、TNF-α、IL-17A、IL-4 mRNA表达.结果 模型组血清ALT水平于造模后6h开始升高,18h左右达峰值,48 h左右基本恢复.与对照慢病毒组相比,miR-20b慢病毒组血清ALT水平降低(P＜0.05);模型组与对照慢病毒组比较差异无统计学意义(P＞0.05).对照慢病毒组肝组织有一定面积的坏死区域,同时伴有炎症细胞浸润和肝实质细胞坏死;miR-20b慢病毒组仅有炎症细胞浸润,未见明显坏死区域.与对照慢病毒组相比,miR-20b慢病毒组血清IFN-γ、TNF-α、IL-17A、IL-4水平和肝组织中IFN-γ、TNF-α、IL-17A、IL-4 mRNA表达水平均降低(P均＜0.05),模型组与对照慢病毒组比较差异无统计学意义(P均＞0.05).结论 miR-20b在小鼠自身免疫性肝炎的病程中发挥一定的保护作用,其机制可能是通过抑制肝脏炎症反应从而减轻肝损伤.