移植胰腺再灌注后细胞凋亡及Fas表达的实验研究

摘要

目的探讨胰腺移植再灌注后胰腺细胞凋亡发生的过程及凋亡相关基因Fas的表达.方法将60只SD大鼠随机分成7组:假手术组(5只),冷缺血2小时组(I组,5只),冷缺血2小时再灌注1、3、6、9、12小时组(I/R1组、I/R3组、I/R6组、I/R9组、I/R12组,各10只).HE染色后光镜及电镜观察各组胰腺组织的病理变化;流式细胞仪检测各组胰腺细胞的凋亡百分比;采用免疫组织化学方法检测各组胰腺组织中Fas蛋白的表达.结果胰腺移植后早期即可观察到细胞凋亡的典型改变,胰腺冷缺血再灌注后发生凋亡的高峰期为再灌注后3小时[凋亡率(AR)为(12.61%±2.94%),P<0.01],再灌注6小时较3小时细胞凋亡有所减少[AR为(6.35%±2.19%),P<0.01),再灌注9小时及12小时细胞凋亡进一步减少[AR分别为(3.67%±1.44%)及(3.33%±1.03%),P<0.05].假手术组与I/R3组均未见Fas蛋白表达,I/R1组Fas(+);至I/R3组Fas表达增强为(++),以后各组表达有所下降.结论细胞凋亡是胰腺移植后的早期事件,移植胰腺冷缺血再灌注后的凋亡高峰发生在再灌注后3小时;移植胰腺的细胞凋亡受基因调控,Fas基因可促进胰腺细胞的凋亡.