四种Notch配体信号功能活性比较

摘要

目的观察四种Notch配体的功能活性,探讨其在Notch信号传导机制中的作用.方法以Notch1-CHO和Notch2-CHO作为宿主细胞,瞬时转染报告质粒TP1,分别加入转染有不同Notch配体Delta1、Jagged1、Jagged2、Delta4的CHO细胞及未转染CHO细胞,使Notch分子与其配体充分结合,加入发光底物PGL100,用Lumat测定发光情况,由此观察并比较各配体对上述两种宿主细胞的信号功能活性水平.结果各配体与Notch1结合后均能引起荧光素酶活性增高,尤其以Jagged2-CHO、Delta4-CHO1-4、Delta4-CHO1-5为著,而Delta1-CHO、Jagged1-CHO引起的活性增加程度较低,尚不能确定其信号功能活性;各配体与Notch2结合后都有较高的信号功能活性,其反应强于与Notch1的作用.结论 4种配体与Notch2作用后均能使荧光素酶活性增加多倍,故有较强的信号功能活性.