稳定高表达增强型绿色荧光蛋白基因膀胱癌细胞株的构建

摘要

目的 建立稳定高表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的膀胱癌细胞株(KU-7/EGFP)并观察其生物特性的变化.方法 利用脂质体将EGFP真核表达质粒(pEGFP-N3)转染至人膀胱癌细胞株KU-7,经过G418筛选和克隆化培养,荧光显微镜及流式细胞仪观察转染EGFP基因的KU-7在裸鼠体内外的表达情况,分析转染细胞生物学行为变化.结果 KU-7/EGFP在荧光显微镜下发出绿色荧光,能稳定、高效和持久地表达EGFP,与未转染细胞比较,其生物学特性未改变.KU-7/EGFP接种于裸鼠皮下5 d后成瘤,14 d后肿瘤直径达到15 mm.结论 成功建立了稳定高表达EGFP的膀胱癌细胞株KU-7-EGFP,其生物学特性未变.