RNAi对结肠癌HCT-8细胞桩蛋白表达的沉默作用观察

摘要

目的 观察RNA干扰(RNAi)对结肠癌HCT-8细胞桩蛋白(Paxillin)表达的沉默作用.方法 构建针对Paxillin基因序列的短发卡RNA(shRNA)表达载体,并转染至结肠癌HCT-8细胞,72 h后分别用实时定量PCR和Western blot法测定转染细胞中Paxillin mRNA及蛋白.结果 根据针对Paxillin基因设计了小干扰RNA (siRNA)序列,构建了shRNA表达载体,并成功转染至HCT-8细胞.以空白对照组作均一化,转染Paxillin-shRNA_1、Paxillin-shRNA_2、Paxillin-shRNA_3、Paxillin-shRNA _NC的细胞及空白对照组细胞Paxillin mRNA相对表达量分别为0.66±0.28、0.31±0.11、1.00±0.22、1.05±0.32、1.00±0.29,Paxillin蛋白相对表达量分别为0.62±0.11、0.39±0.13、0.74±0.21、0.94±0.09、1.00±0.16.结论 RNAi可沉默结肠癌HCT-8细胞Paxillin的表达.